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文献和实验、脂多糖等,大小为0.5-1um,具有很高的密度(约1.3mg/ml),无定形,呈非水溶性,只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。NMR等新技术的应用表明包涵体具有一定量的二级结构,他们可能在复性的启动阶段中具有一定的作用。[1] 1.2包涵体的形成: 主要因为在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠的辅助因子,或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的。 1.2.1、基因工程菌的表达产率过高,超过了细菌正常的代谢水平,由于细菌的δ因子的蛋白水解能力达到饱和,使之表达产物积累起来。研究发
效率。浓度为0.4-0.6M L-Arg有助于增加复性中间产物的溶解度。成功的应用于很多蛋白如t-PA的复性中,可以抑制二聚体的形成。 NDSBs是近年来出现的可促进蛋白复性的新家族, NDSBs由一个亲水的硫代甜菜碱及一个短的疏水集团组成,故不属于去垢剂,不会形成微束,易于透析去除,目前,常用的有NDSB-195,NDSB-201,NDSB-256。[8] 2.2.2.3PEG-NaSO4两相法 用PEG和NaSO4作为成相剂,然后加入盐酸胍,再把变性的还原
产物的溶解度。成功的应用于很多蛋白如 t-PA 的复性中,可以抑制二聚体的形成。 NDSBs 是近年来出现的可促进蛋白复性的新家族 , NDSBs 由一个亲水的硫代甜菜碱及一个短的疏水集团组成,故不属于去垢剂 , 不会形成微束 , 易于透析去除,目前,常用的有 NDSB-195 , NDSB-201 , NDSB-256 。 [8] 2.2.2.3PEG-NaSO4 两相法 用 PEG 和 NaSO4 作为成相剂 , 然后加入盐酸胍,再把变性
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