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- 2025年07月10日
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文献和实验质，小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时，通过洗杂步骤，即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质，通过改变缓冲液的条件，如pH，或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢？仅达到所需的质量量级，如毫克级（或克级）即可满足吗？ 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要，比如，就蛋白的生物活性和纯度而言，通常会有所要求。 以下我们来讨论并且比较2种技术： His-tag系统和Strep-tag®系统，都使用了亲和层析法来纯化
上的其他蛋白质，小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时，通过洗杂步骤，即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质，通过改变缓冲液的条件，如 pH，或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢？ 仅达到所需的质量量级，如毫克级（或克级）即可满足吗？ 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要，比如，就蛋白的生物活性和纯度而言，通常会有所要求。以下我们来讨论并且比较 2 种技术：His-tag 系统和 Strep-tag®
结果与分析 动物、微生物总DNA抽提通常采用酚-氯仿抽提；从植物种子中抽提DNA，因种子所含杂质少，多采用SDS法.目前能有效去除植物多糖、酚类化合物和其它杂质的总DNA抽提方法主要有两种：一种是CsCl梯度离心法，另一种是CTAB法.前者由于仪器设备比较贵重，使用受到限制，后者不需要贵重仪器，操作较为简单，能适用于许多植物的DNA抽提，纯度也能满足分子生物学实验操作的要求，因而从植物叶片组织中抽提DNA多采用此法.我们使用标准的CTAB法抽提山茶属植物叶片DNA，在抽提过程中抽提液明显变黄，在用乙醇
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