- ￥800 - 1800
- ATCC
- 美国
- CC-Y2043
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
T25/瓶
- 组织来源：
见名称
- 物种来源：
人，大小鼠
- 细胞形态：
正常
- 器官来源：
见说明书
- 运输方式：
常温
- 年限：
永生代细胞
- 生长状态：
贴壁或悬浮
- 规格：
1X10^6 cells
我库细胞近3000种，来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。冻存细胞时间为5-7个工作日，活细胞为7-15个工作日。
凡购买本公司细胞，发货均送STR鉴定报告
培养操作及注意事项说明
一．产品简介
1、细胞名称：J774A.1；小鼠单核巨噬细胞
2、生长特性： □ 贴壁 □ 悬浮 □悬浮+贴壁
3、细胞生长条件：
| 培养条件 | 90%DMEM+10% FBS+1%双抗 |
| 温度 | 37℃ |
| 空气条件 | 5% CO2,95% AIR |
| 传代方法 | 1:2传代，2~3天换液 |
| 冻存条件 | 90%FBS+10%DMSO |
二．使用方法
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
- 细胞传代：
先将悬浮细胞收集，再处理贴壁细胞。
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核／巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后，进入血流分布于各种器官组织，并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子．其中受体多达数十种，如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6)，补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR)，以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13)，介导单核／
RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢，普通的方法根本就不可能将它消化下来，这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得，简介如下：消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，实验前加温到37度以50ml培养瓶为例：1、细胞贴壁生长，长满瓶底80％时，弃去培养液，加D-HANKS 漂洗 两次；2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃约2-5min，镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化，弃消化液加D-HANKS 漂洗两次；3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
・ Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab) Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from anticoagulated venous blood are isolated by layering onto histopaque
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