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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
17
- 供应商:
圻明
- 检测范围:
详见说明
- 检测方法:
免疫组织化学
- 应用:
病理学研究
- 适应物种:
人大小鼠兔牛
- 标记物:
HRP-SA
- 样本:
组织
- 规格:
50T-100T
免疫细胞化学染色方法
1、细胞标本置于载玻片上;
2、固定:建议使用95%乙醇或10%中性缓冲福尔马林固定液固定10分钟;
3、稍水洗,载玻片上加1%Triton X-100试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
4、根据第一抗体的要求,对细胞进行相应的抗原修复;
5、如有必要,每张载玻片上加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
6、除去PBS,载玻片上加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,PBS冲洗3x3分钟;
7、除去PBS,载玻片上加检测试剂盒(按照试剂盒说明书进行操作),PBS冲洗3x3分钟;
8、除去PBS,根据检测试剂盒选择相应的显色系统,后中性树胶封固。
备注:更好的方法是通过离心或直接收集将细胞聚拢,再用蛋清或琼脂包裹后形成细胞块进行固定、脱水、包埋、切片,再按照免疫组化染色步骤进行操作。
免疫组织化学技术是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色。借助显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察其颜色变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的一门新兴组化技术。
在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义颇为重要。免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到普遍认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50-75%。
组织的固定:病理学研究和免疫组化实验中,组织的固定是非常重要的一步。将目的组织放于某些化学试剂中,使组织中的细胞物质接近于具有生命功能时的结构和形态称为固定。组织固定还要减少外源性和内源性分解酶的作用,防止细胞自溶等,从而保持组织和细胞内的抗原性,使抗原不失活。
UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1,UGGT1,免疫组化试剂盒人具有以下特点:多聚物技术,使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度的敏感性、染色强度,可以避免由于生物素引起的非特异性背景显色,更适合于生物素含量较高的组织细胞的免疫组化实验;孵育时间短,只需孵育15分钟,使得免疫组化实验时间大为缩短,是医院病理科开展免疫组化实验的理想试剂盒。
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文献和实验C6 H12 O6 相当于葡萄糖的 4-差向异构体。在自然界几乎不存在游离态。 D-半乳糖除作为乳糖、蜜二糖、蜜三糖等寡糖的组成糖而分布于动植物界外,还广泛地作为细菌细胞膜的核多糖、荚膜多糖、植物粘质、果胶、红藻的细胞膜、动物的糖蛋白、糖脂、粘多糖等多糖的组成糖而存在着。这些半乳糖残基是以 UDP葡萄糖在 UDP葡糖 -4-差向异构酶的作用下生成的 UDP半乳糖为前体,经过特异的半乳糖基转移酶的作用而引入的。另一方面,当作为营养源供给生物体半乳糖时,通常经由半乳糖
二磷酸尿甘半乳糖 uridine diphosphate ga-lactose
一般简称UDP-半乳糖。其结构是 α-D-半乳糖残基结合在二磷酸尿苷的末端磷酸残基上,与二磷酸尿甘葡糖(UDP-葡糖)同样广泛分布于微生物、动植物细胞内的一种核苷酸糖。由1-磷酸α-D-半乳糖在己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(hexose-1-phospha-te uridylyltransferase,EC 2.7.7.12)的反应中生物合成。UDP-葡糖 1-磷酸半乳糖UDP半乳糖 1-磷酸葡萄糖。然而因为在细胞内有UDP葡糖-4-差向异构酶,容易进行UDP-半乳糖UDP葡糖的互变,实际
与一些内源性的物质(如葡萄糖醛酸、甘氨酸、硫酸等)结合或经甲基化、乙酰化排出体外。药物的结合反应,常常使其转化为无活性的代谢物,且极性增加,以便药物排出体外。 药物的结合反应包括葡萄糖醛酸结合、硫酸化、乙酰化、甲基化、谷胱甘肽结合、氨基酸结合及缩合反应等。葡萄糖醛酸结合反应是体内生物转化最重要、最普遍的结合反应。葡萄糖醛酸基的直接供体是尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)(见图1)。 图1 葡萄糖醛酸结合反应 葡糖醛酸基转移酶(UGT)催化的葡萄糖醛酸化代谢反应是以尿苷5’-二磷酸葡萄糖
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