SYA236型委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒厂家现货

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SYA236型委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒厂家现货由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：SYA236型委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒厂家现货
编号：SYA236
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂
产地：国产|进口

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·禽腺病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA391
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽腺病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对禽腺病毒DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测呼吸道分泌物棉拭子(感染I群禽腺病毒的鸡、火鸡、鹅、鹌鹑)、卵巢、输卵管、卵泡、子宫和输卵管粘膜组织、泄殖腔拭子(感染II、III群禽腺病毒的鸡、鸭)等样本中的禽腺病毒(AADV)，用于禽腺病毒(AADV)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
AADV反应液(AADV-qPCR MIX) 1管 720μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
AADV阳性对照(AADVPTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死禽取卵巢、输卵管、卵泡、子宫和输卵管粘膜组织；活鸡取呼吸道拭子或泄殖腔拭子，放于1ml 50％甘油生理盐水中。
6.2 样品前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；泄殖腔拭子直接取100μL提取。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.31 纯培养物：取培养物50μL与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.3.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，取50μL样品，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.3.3 组织研磨液、拭子、血清、血浆及其他液体标本：取处理好的标本50μL，加入50μl DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(AADV-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AADV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)： 不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AADV-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线，表明AADV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AADV核酸阴性。
（3） 如果Ct值＞35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AADV 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AADV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·手足口病EV71型/CoxA16型病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA213
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽马立克(MDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA540
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感H7N9病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA151
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·蜡状芽孢杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA135
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA099
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·流感N9亚型病毒(AIV-N9)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA531
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鼻疽伯克霍尔德菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA800
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的鼻疽伯克霍尔德菌(BP)，用于鼻疽伯克霍尔德菌(BP)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
BP反应液(BP-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
BP阳性对照(BP-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶液	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BP-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

1循环

50℃ for 2 min预变性

1循环

95℃ for 10 minPCR扩增

40循环

95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BP-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


SYA236型委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒厂家现货关键词：百奥莱博,委内瑞拉马炎病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA236

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