志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格，是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格
等级：科研试剂
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：SYA003
一、简介：
志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰氏阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。人类及其它动物对志贺氏菌易感，10-200个细菌即可致病。本方法为荧光PCR检测方法，反应在同一管内进行，操作简单，并有效防止了污染，能对样品中或预培养液中的志贺氏菌进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。志贺氏菌的探针报告基团为FAM，淬灭基团为None。

二、用途：
该试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及食品中志贺氏菌的检测。

三、试剂盒组成：(50T/Kit)
组份 数量 规格
志贺氏菌荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX) 1管 750μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Shig-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品采集与预培养参照《中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验(GB 4789.5-2012)》要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取(用户可根据需要选择商业化DNA提取试剂盒)
6.2.1 培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μl DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Shig-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(Shig-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明Shig核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Shig核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Shig qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明Shig核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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·禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA378
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·EB病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA144
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪伪狂犬野毒(gE)抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA644
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·沙门菌及痢疾杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA079
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·人类小DNA病毒(B19)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA246
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·脊髓灰质炎病毒1型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA205
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·季节性H3流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA149
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·玉米转基因MON810单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA270
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA070
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对副溶血性弧菌不耐热溶血毒素特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对副溶血性弧菌不耐热溶血毒素的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH)，用于副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)

 

组份	数量	规格
TLH反应液(TLH-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
TLH阳性对照(TLH -PTC)	1管	50μL/管

四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

六、样品采集、前处理与DNA 提取
6.1 样品采集
水样便取0.5-1 mL；疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理：
水样便13000rpm离心2min，去尽上清；疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；疑似污染的水直接取100μL。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TLH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合液	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL 荧光PCR 反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TLH-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(TLH-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阴性。
(3)如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行副溶血性弧菌不耐热溶血毒素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒价格关键词：Fluorescent PCR detection kit for Shigella,志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒,SYA003


·小反刍兽疫病毒(PPRV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA504
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫亚I型(FMDV-I)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA483
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

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编号：SYA639
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

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编号：SYA073
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规格：48次/盒

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等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪流感病毒N1亚型(SIV-N1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA453
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA378
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

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规格：96次/盒

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等级：科研实验专用
规格：192次/盒|480次/盒

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规格：48次/盒

·人类小DNA病毒(B19)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA246
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·脊髓灰质炎病毒1型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA205
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·伤寒杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA013
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Salmonella typhi
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·金黄色葡萄球菌单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA258
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Salmonella typhi
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA439
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Salmonella typhi
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
本试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA，用于传染性胸膜肺炎放线杆菌的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对传染性胸膜肺炎放线杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对猪传染性胸膜炎放线杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

组份	数量	规格
APP荧光qPCR反应液(APP-qPCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(APP-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
 样品的采集与预培养按照《牛传染性胸膜肺炎病原分离鉴定》(SNT1376.1-2004)要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
 可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取DNA。
➤培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μLDNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μLDNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(APP-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(APP-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明APP核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明APP核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行APP qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明APP核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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