流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒现货在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒现货
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：48次/盒
编号：SYA043
等级：科研试剂

我公司的流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒现货，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·禽流感H9N2病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA160
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA664
英文名称：Mycoplasma Bovis ELISA Antibody Test Kit
等级：科研实验专用
规格：96次/盒

【主要成分】
组份 数量 规格
包被板 1 块 96T
阴性血清对照 1 管 1ml/管
阳性血清对照 1 管 1ml/管
样品稀释液 1 瓶 50ml/瓶
10×洗液 1 瓶 30ml/瓶
兔抗牛IgG酶标抗体 1 瓶 12ml/瓶
底物显色液 1 瓶 12ml/瓶
终止液 1 瓶 6ml/瓶
说明书 1 份
【作用与用途】
适用于牛血清中牛支原体抗体的检测。
【用法与判定】
1、试剂准备
仔细阅读说明书，所有的试剂在使用前需放置于室温至少1小时，使试剂盒恢复到室温。
2、洗涤液的配制
取1 份10×洗液加入到9份双蒸水中，混匀。配好的液体，应在3天内用完。
3、稀释待检血清。用样品稀释液将待检血清做1∶160(VV)倍稀释(建议在1.5ml微量离心管中加入400μl 样品稀释液，吸取2.5μl 待检样品加入该管中充分混匀)。
4、操作步骤
4.1 加样
包被板上对照和待检样品添加如下所示。
4.2 孵育
将稀释好的样品加入包被板中，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.3 洗涤
甩去孔内液体，用稀释好的洗涤液洗涤包被板，300μl/孔，振荡洗涤3次，拍干。

 

	1	2
3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
A	P	S1	S2	S3	S4
B	P
C	N
D	N
E
F
G
H

(注：“P”为阳性血清对照；“N”为阴性血清对照；S1、S2、S3、S4 为待检血清样品)
4.4 二抗孵育
向各孔中加入兔抗牛IgG 酶标抗体，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.5 洗涤
方法同4.3。
4.6 显色
加入底物显色液，100μl/孔，置室温(15～25℃)下，避光孵育9分钟。
4.7 终止
加入终止液，50μl/孔，轻微震荡混合均匀。
4.8 读数
在加入终止液15分钟内，将包被板置于酶标仪中，用波长450nm(OD450)读数。
4.9 S/P值计算
按照以下计算公式，计算S/P值。

4.10 判定标准
4.10.1 试验结果有效的条件是：阳性血清对照OD450值均应≥0.8，阴性血清对照OD450 值均应＜0.1。
4.10.2 待检样品的S/P 值≥0.418时，判定为阳性；待检样品的S/P值＜0.418时，判定为阴性。
【注意事项】
(1)所有试剂在2～8℃条件下保存。
(2)贮存时，所有的板条一定要用封口膜密封，防止潮气对包被板的损伤。
(3)不要使底物溶液接触强光和氧化物。取出后，不得再加回瓶中。
(4)仔细阅读说明书。
(5)不要使用过期的成分或者不同批次试剂混合使用。
(6)稀释10×洗液时，如发现存在结晶，可置37℃下加热使其溶解后再使用。
(7)注意加样和洗涤过程，以确保试验的准确度，不能用嘴吸液。
(8)被检血清发生腐败时勿用于检测。
(9)检验用器皿必须清洁，操作过程避免与金属类器物接触。
(10)在加样时，应使各孔的加样时间差别小于5 分钟，以保证各孔反应时间一致。
(11)操作过程中使用手套，终止液是硫*(代"酸")，如接触，应用清水迅速冲洗接触部位。
【贮存与有效期】
2～8℃保存，有效期为9个月。



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·乙型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA163
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素(TSST-1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA038
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·马尔堡病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA232
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·Nipah病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA237
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪口蹄疫病毒亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA647
等级：科研实验专用
规格：192次/盒|480次/盒

·转基因植物35S启动子单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA276
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·新城疫病毒(中强毒株)(vNDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA348
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·间日疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA124
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对间日疟原虫特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR 探针技术进行间日疟原虫的检测。

二、用途：
本试剂盒可用于间日疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置，还可用于间日疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
间日疟原虫荧光PCR 反应液(qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(DNA Polymerase MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
间日疟原虫阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列，Bio-Rad 系列，Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃保存，避免反复冻融，有效期为6 个月。

六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液：用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml，置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中，摇匀送检。
肺脏等组织：取上述组织1g左右，置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本：取相应标本3-5ml，转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本：直接取200μl 抗凝血，转至一洁净的1.5ml 离心管中，加入1ml 双蒸水，剧烈震荡30s，8000rpm 离心5min，弃上清，至无明显红色沉淀。(若沉淀明显，请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水，剧烈震荡15s，13000rpm 离心5min，弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
肺、淋巴结等固体组织：剪取约0.1g 组织，用生理盐水洗去血污，剪碎加入0.5mL TE转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl转移到1.5mL 离心管中，加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm 离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
乳液等液体标本：取标本2-3mL，13000rpm 离心3min，弃上清，沉淀加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(间日疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明间日疟原虫核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明间日疟原虫核酸阴性。
(3)如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行间日疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明间日疟原虫核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒现货关键词：SYA043,流感嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博

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