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773
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京现货冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)特价优惠用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)特价优惠
等级:科研试剂
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
编号:SYA194
北京现货冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)特价优惠正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
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规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对钩端螺旋体特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对钩端螺旋体的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
本试剂盒适用于检测动物内脏、血液等样本中的钩端螺旋体,用于钩端螺旋体感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| Lep反应液(Lep-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| 核酸提取液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| Lep阳性对照(Lep-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死动物取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等组织1g;活动物用无菌注射器抽取3~5mL 血液。
6.2 样品前处理
每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液 100µL于 1.5mL灭菌离心管中;血液样本:取抗凝血下层血细胞 50µL,加入 100µL 双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
6.3.1 对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lep-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1 µL | N×1 µL |
| 总量 | 15 µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(Lep-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(Lep-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线,表明Lep核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Lep核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行Lep 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Lep核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测植物中特异性基因Lectin,用于筛查待检测植物中是否含有Lectin基因片段DNA成分。其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对大豆特异性基因Lectin特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术进行大豆特异性基因Lectin的检测。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| Lectin反应液(Lectin-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| Lectin阳性对照(Lectin-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃,应避免反复冻融,有效期12个月。
使用方法:
一、样品采集及处理:
➤适用标本类型:植物组织及其加工制品。
➤样本采集:称取200g样品。
二、DNA提取:
样品需用粉碎机或冷冻研磨仪研磨至细粉末状。
用户可采用SN/T2584-2010中推荐的方法提取DNA,也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的植物基因组DNA提取试剂盒(过柱法)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.PCR扩增
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lectin-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1 µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Lectin -PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Lectin -PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明Lectin核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Lectin核酸阴性。
➤如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行Lectin qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Lectin核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)特价优惠关键词:百奥莱博,Hcov,PIV,SYA194,冠状/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒(Hcov)
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