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- 库存:
291
- 英文名:
Plant microRNA Extraction Kit
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京植物miRNA提取试剂盒现货在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京植物miRNA提取试剂盒现货
编号:ALH073
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Plant microRNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速提取植物microRNA或者microRNA/总RNA分别提取。采用分提取操作步骤也可单独纯化富集后的microRNA组分和总RNA(>200 nt)从而得到分离富集的microRNA和RNA。试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物通过基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA(包括microRNA)被选择性滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗-离心的步骤,将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA(包括microRNA)从硅基质膜上洗脱。
传统的microRNA提取试剂盒均是采用异硫*酸胍/*酚/*仿(TRIzol法)加高浓度乙醇硅胶膜吸附小片段microRNA的原理方法制成,但是复杂的植物品类如棉花、葡萄、胡杨、冬青、月季、石斛、单参、水稻种子、人参、玉米胚芽等大量样品用TRIzol的原理甚至无法提取符合要求的总RNA,更不用说microRNA。世界著名公司采用Trizol法原理的microRNA提取试剂盒面临复杂植物样品时束手无策,产品线中干脆就没有复杂植物microRNA提取试剂盒。用户无奈只好用传统方法,或者TRIzol法提取,用异丙醇/乙醇沉淀方法来提取microRNA,虽然也能提取到部分microRNA,但是沉淀法损失巨大或者和杂质共沉淀,影响实验结果,在国际刊物投稿时常常面临质疑,甚至论文被撤销。而本试剂盒在公司全球领先数百种复杂植物提取的经验基础上(包括人参、雪莲、棉花、胡杨、冬青等各种复杂植物),创新性的采用了不用*酚,*仿的技术路线全球首家解决该问题,可以提取绝大多数复杂植物如棉花、杨树、冬青、月季、丹参等植物microRNA,当然本试剂盒也适用于拟南芥、水稻、小麦、烟草、水稻等各种简单样品。
产品组分:
专用裂解液—————————50ml
植物RNA助提剂———————5ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
基因组DNA清除柱和收集管——50套
吸附柱和收集管———————50套
产品特点:
1. 完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3. 独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,β-巯基乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量
时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT Plus 和Wash Solution 1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留),该产品由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术,绝大多数DNA已经被清除,个别特殊情况需要清除微量基因组DNA残留,可使用以下几种DNA酶消化的方式。
1) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA,热灭活DNA酶后直接用于后续实验。
2) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA,然后使用RNA清洁纯化试剂盒(但是需要将说明书改动一个地方,第二步加入250μl无水乙醇改成加入700μl无水乙醇)清洁纯化后用于后续实验。
3) 直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒(但是需将说明书的去蛋白液RW1改成Wash Solution 1) 可先索取具体
操作说明书。
6. 碰到特别复杂多糖多酚,淀粉等次级代谢产物特别丰富的样品,如葡萄果实,水稻种子,裂解液RLT Plus效果不佳的情况下,应该购买专用裂解液CLB。裂解液CLB是本公司为特别复杂的多糖多酚植物样品研发的最强配方,绝大部分裂解液RLT Plus无法提取的复杂样品都可以提取成功。
储存条件:室温,有效期6个月。
本品别名:植物miRNA提取试剂盒|植物microRNA提取试剂盒|植物microRNA分离试剂盒|植物microRNA纯化试剂盒|植物miRNA分离试剂盒|植物miRNA纯化试剂盒|植物总RNA提取试剂盒|植物总RNA纯化试剂盒|植物总RNA/miRNA分离提取试剂盒
北京植物miRNA提取试剂盒现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·长片段Taq DNA聚合酶
编号:ALH233
英文名称:Long Taq DNA Polymerase
规格:500U|3000U
本试剂盒所用的Long Taq是Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶,这种混合酶可以染色体和其它细胞器的DNA 为模板高效进行PCR 反应。在人的染色体上可以扩增长度可达27 kb 的DNA 片段,而以λDNA 为模板则可以扩增出高达40 kb 的片段。
产品组分(500U):
Long Taq DNA Polymerase—————————————500U
10×Long Taq Buffer(2.5mM Mg2+ Plus)——————1ml
储存条件:-20℃。
·RNA酶抑制剂
编号:ALH056
英文名称:RNase Inhibitor
规格:2000U
本品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成1:1复合体,对RNase 表现高度的非竞争性抑制(Ki=3×10-10 M)。该反应是可逆的,通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体,使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。
活性定义:抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)
储存条件:-20℃
·固定包埋组织RNA提取试剂盒
编号:ALH043
英文名称:RNA rapid extraction From fixed and embedding tissue
规格:50次
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取总RNA。独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞释放出RNA,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。得到的RNA可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
试剂盒组分:
| 裂解液PKD | 15ml |
| 结合液RBC | 25ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| 蛋白酶K *(代"粉")(可选)40mg/ml | 20mg |
| RNase-free H2O | 10ml |
| 基因组DNA清除柱和收集管 | 50套 |
| RNA 吸附柱 和收集管 | 50套 |
产品特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品RNA提取操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特基因组清除柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如不超过2个10μm厚度石蜡切片。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液PKD、结合液RBC中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA提取过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本固定包埋组织RNA快速提取试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于石蜡包埋组织福尔马林固定和包埋过程中一般由于RNA 与蛋白反应交联会导致RNA 断裂或者降解,一般电泳后UV 下只能看到模糊弥散(smear)带型,随着储存的时间越长,降解断裂越严重,甚至只能看到峰值仅仅在100bp 左右的模糊条带。这都属于RNA 提取正常情况。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
北京植物miRNA提取试剂盒现货关键词:植物microRNA提取试剂盒,植物microRNA分离试剂盒,植物miRNA提取试剂盒,植物microRNA纯化试剂盒
·T Simple 载体连接试剂盒(不含多克隆位点)
编号:ALH347
英文名称:T Simple vector ligation Kit
规格:20次|60次
本试剂盒T Simple Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。这种载体是由pBlueScript II SK(+)质粒改建而成,和传统T载体ECOR V切开后加T方法不同,T Simple载体通过改造pBlueScript II SK(+),在原pBlueScript II SK(+)多克隆位点引入 Xcm I酶切后使其原多克隆位点两侧的3’末端直接产生未配对的T碱基,因此有更高的重组效率。同时它消除了pBlueScript II SK(+)载体上的多克隆酶切位点,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。此外,本公司载体连接体系还有背景低(蓝斑小于10%),重组率高(白斑中超过90%有插入片段),可快速连接等特点。本说明书末列出了T Simple 载体相关的技术资料,其全序列可参照pBlueScript II SK(+)序列,只是其多克隆酶切位点处序列稍有不同。
试剂盒组份:
T Simple Vector(30ng/μl)———————20μl
1000bp Control(30ng/μl)-——————5μl
10×PEG Enhancer-———————————50μl
10×Ligation Buffer-—————————40μl
2×Quick Ligation Buffer-———————100μl
T4 DNA ligase(5Uμl)—————————20μl
储存条件:-20℃。
北京植物miRNA提取试剂盒现货关键词:植物microRNA提取试剂盒,植物microRNA分离试剂盒,植物miRNA提取试剂盒,植物microRNA纯化试剂盒
F020106 兔抗盐*(代"酸")克伦特罗抗体 Rabbit Anti-Clenbuterol
ARB12055 大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)elisa检测 Rat stem cell factor/mast cell growth factor,scf/mgf ELISA KIT
N-羟基琥珀酰亚胺 Lithium acetate dihydrate 6066-82-6
DNA Marker Ⅳ(500~7000bp)
ARB11667 人维生素C(VC)酶联免疫定量检测 Human vitamin c,vc ELISA KIT
F030626 FITC标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*FITC
RN4001 EASYspin植物microRNA快速提取试剂盒
BTN131017 乙酰化牛血清白蛋白 Bovine Serum Albumin, Acetylated
转化储存液(2×TSS,pH6.5) 100ml
去氧*尿甙 1-(3-Chlorophenyl)piperazin*(代"e") hydrochloride 3094-09-5
BTN130569 GAPDH小鼠单抗 GAPDH Mouse Mab
硫代甜菜碱10 Boc-D-asparagine 15163-36-7
ARB13528 兔p53(p53)含量测试 Rabbit p53/tumor protein,p53/tp53 ELISA KIT
显影定影试剂盒 2加仑
BL0848 兔抗鸡IgG纯化抗体
PY08-069 四硫*(代"磺")酸盐亮绿培养基 10ml 20支/盒,用于沙门氏菌选择性增菌培养
NF-242 冻干抗人IgG血清
7385-67-3 尼罗红
ARB13430 鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)免费代测 Chicken alternative macrophage activation-associated cc chemokine 1,amac-1 ELISA KIT
ARB10006 人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)检测服务 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-hete ELISA KIT
F030303 胶体金标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*GOLD
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
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