Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)价格厂家用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)等二抗产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)价格厂家
规格：100μl
品牌：百奥莱博
英文名：Alexa Fluor 647 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
编号：SY0689
产地：国产|进口
本品是由Alexa Fluor 647标记的山羊抗小鼠IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子，也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 647的光谱性质类似于APC，其最大激发波长（Amax）为651nm，最大发射波长（Emax）为667nm。本品适合做单标实验。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:50～400（适用于大多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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·E2F-GFP报告基因质粒
编号：SY0198
英文名称：E2F GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
E2F-GFP报告基因是用于检测E2F转录活性水平为目的的报告基因。E2F转录因子在细胞周期调控中起重要的作用。研究证明，E2F-1对细胞的生长具有双向调节作用，可以调节细胞的增殖和凋亡。因此，E2F与肿瘤发生、细胞凋亡、肿瘤抑制等均有密切关系。

E2F-GFP报告基因主要用于检测细胞中Cell Cycle信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGME2F-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个E2F结合位点，可以高效地检测E2F的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得E2F-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM E2F -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGME2F-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·双链DNA(dsDNA)定量试剂
编号：SY0259
英文名称：Picogreen dsDNA Quantitation Reagent
规格：100μl
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义。疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

常用的检测核酸的方法有:
1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；
2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；
3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：
①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；
②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；
③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

若每次分析体积为2 mL，1ml Picogreen定量试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则足够2000次分析。另外，我公司提供【双链DNA（dsDNA）定量检测试剂盒】方便客户选用。

储存条件：4℃避光干燥，有效期6个月。

注意事项
1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。

应用实例
【注】：本方法参照2010《中国药典》进行操作的，如结果要求不是特别严格，可参照Yeasen 【双链DNA（dsDNA）定量检测试剂盒（Cat#10225）】的标曲制备方法。

1、染料工作液的配置

PicoGreen dsDNA定量试剂取出后回温至室温，该试剂是以1mL的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天，根据实验用量用1×TE（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH7.5）按1:200 的比例稀释PicoGreen浓缩液。如，要准备足够的操作溶液测定20个样品，可在19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】：
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

2、标准品工作液的配制

小牛胸腺嘧啶DNA干粉 1mg（Tris，Nacl等浓度已成标准体系），加入1mL无菌去离子水（无Dnase），配制成1mg∕mL的标准品工作液。
【注】：标准品也可用λDNA或其他已知浓度的纯化DNA。

3、标准品工作液稀释

1）母液稀释：取10µl（1mg∕mL）标准品工作液加入到990ul TE溶液中，浓度稀释成10µg∕mL，取10µl（10µg∕mL）标准品工作液加入到990µl TE溶液中，浓度稀释成100ng∕mL；
2）倍比稀释：取800µl （100ng∕mL）的标准品工作液加入到200µl TE溶液中，浓度达到80ng∕mL，取500µl（80ng∕mL）的标准品工作液加入到500µl TE溶液中，浓度稀释到40ng∕mL；依次倍比稀释，配成20ng/ml、10ng/ml、5.0ng/ml、2.5ng/ml、1.25ng/ml、0.625ng/ml的标准品溶液；
3）标准曲线的制备：倍比稀释后的各梯度标准品溶液和染料工作液各取100µl混匀，避光室温放置5min。使用FB-15型便携式荧光仪检测样品的荧光值：将混合后的溶液加入微量比色皿，确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。以1×TE缓冲液为blank，测定样品和空白对照的荧光值；用标准品溶液的浓度（ng/ml）对应的荧光强度作直线回归，制备标准曲线。
4）测量剩余样品的荧光值。荧光计将给出一个直接的浓度读数，数据可以用来产生DNA 浓度的标准曲线。

4、结果分析


表1 标曲测定荧光值


图1 标准曲线图


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·X-Gal
编号：SY0275
规格：1g
X-Gal常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点，当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时，或M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。

·PPARγ-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0069
英文名称：PPARγ luciferase reporter plasmid
规格：1μg
PPARγ荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（PPARγ uciferase reporter plasimd）是用于检测PPARγ转录活性水平为目的的报告基因。PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)是调节靶基因表达的核内受体转录因子超家族成员，可分为α、β和γ三种类型。其中PPARγ主要表达于脂肪组织及免疫系统，与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛系统抵抗关系密切。

PPARγ报告基因主要用于检测细胞中PPARγ的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMPPARγ-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个PPARγ结合位点，可以高灵敏度地检测PPARγ的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得PPARγ报告基因更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMPPARγ-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。


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