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217
- 英文名:
Coelenterazine e
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
腔肠素e品牌由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多腔肠素e等报告基因检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:腔肠素e品牌
品牌:百奥莱博
英文名:Coelenterazine e
规格:1×500μg
编号:SY0241
本品为粉末形式供应的腔肠素e(Coelenterazine e),一种天然腔肠素衍生物,结构上比天然腔肠素多了一个乙基。作为海肾荧光素酶的底物,其荧光强度是天然腔肠素的137%。腔肠素e具有最高的体外水母发光蛋白反应性,且具有双发射峰(405& 465),从而可在pCa 5-7范围内通过双波长的比例测定Ca2+浓度,由于该法不依赖于腔肠素浓度,因此提高了检测精确性。但对于细胞内相关实验则无此优势,因为该衍生物的细胞通透性较差。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。

图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
英文别名:e-CTZ; e Coelenterazine
CAS:114496-02-5
分子式:C28H23N2O3
分子量:449.5
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不溶于DMSO
外观:黄色至橘色固体
纯度:≥95%(TLC)
结构:

注意事项
1) 腔肠素e粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成腔肠素e氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
想要了解更多关于腔肠素e品牌的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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腔肠素e品牌关键词: e Coelenterazine,e-CTZ,腔肠素e
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腔肠素e品牌关键词: e Coelenterazine,e-CTZ,腔肠素e
·27mm透析袋(透析分子量14kDa)
编号:SY0413
英文名称:Dialysis Tube MD34 (Mw14,000)
规格:1卷(5米)
透析袋通常为半透膜制成的袋状,以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换,透析的主要原理是:透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外,直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析。
本透析袋参数:扁平宽度为34mm,直径27mm,截留分子量14kDa。
储存条件:4℃,有效期2年。
注意事项
1)每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,具体长度需根据待透析的样品而定。
2)在大体积(eg.500mL)的2%(W/V)的碳酸**和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3)用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4)放在大体积(eg.500mL)的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5)冷却后,存放于4℃,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。【注】:从此时起取用透析袋必须戴手套。
6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7)使用时,一端由透析夹夹紧,另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液。
【注】:
① 通常要留1/3~1/2的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大或样品含盐量较高时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大,如大烧杯等。
·快速姬姆萨染液(适用于血涂片、骨髓涂片染色)
编号:SY0579
英文名称:Fast Giemsa Stain
规格:250ml*1,500ml*1
姬姆萨染色(Giemsa stain)是一种标准化的组织学染色方法,通过对染色体染色的原理形态学上区分不同的细胞类型如血小板,红细胞,白细胞和其他细胞。吉姆萨染色液是由亚甲基蓝(methylene blue,),曙红(eosin)和天青B(Azure B)组成的混合液,主要用于血液,骨髓涂片,石蜡切片和其他临床细胞学标本。
产品组份:
试剂1————250ml
试剂2————500ml
操作步骤
1. 平置血涂片于染色架上,滴加试剂一3~5滴,使其迅速盖满血膜,染色1~2分钟,以固定血片。
2. 不要倒掉试剂一,直接滴加试剂二6~10滴,轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染色5~8分钟。
3. 水洗30秒,待干后镜检。
染色结果
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆浅红色。胞浆中各种颗粒区分明显。其中1)中性粒细胞胞浆中颗粒呈淡紫红色、嗜酸粒细胞胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。Ⅱ)单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。Ⅲ)淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
注意事项
1. 推片:取全血3微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血液铺完血膜为止。
2. 涂片时不要太厚也不要太薄。太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。
3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。
4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400微升,试剂二是试剂一的2倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。
5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1~3分钟,直至红润为止。
6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3~5秒。
储存条件:室温,有效期12个月。
我公司生产供应销*(代"售")的报告基因检测正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购腔肠素e品牌。
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