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94-75-7
北京百奥莱博科技有限公司
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2,4-Dichlorophenoxy acetic acid
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
2,4-二**氧基乙酸打折促销由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多2,4-二**氧基乙酸等培养基配套试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:2,4-二**氧基乙酸打折促销
规格:100g
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SY0629
英文名:2,4-Dichlorophenoxy acetic acid
本品为合成的生长类激素,用于植物培养中典型的工作浓度为1-50μM。2,4-二**氧基乙酸,英文名称2,4-Dichlorophenoxy acetic acid,简称2,4-D,是植物组培中最常用的一种诱导愈伤组织生成的生长素,可维持细胞的去分化状态。2,4-D也可作为除草剂的有效成分,通过破坏肌动蛋白骨架来控制细胞生长和根部伸长。
英文别名:2,4-D; Vidon 638; Diclordon;
CAS:94-75-7
分子式:C8H6O3Cl2
分子量:221
外观:white to light yellow powder
纯度:>98%
熔点:138℃
溶解性:溶于95%乙醇(100mg/ml)、乙*(代"醚")及丙*(代"酮"),几乎不溶于水
储存条件:室温
结构式:
关于2,4-二**氧基乙酸打折促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液
编号:SY0353
英文名称:10×Tris-Glycine-SDS Running Buffer
规格:500ml
Tris-Glycine-SDS Running Buffer,常用作蛋白质SDS-PAGE的电泳缓冲液。本缓冲液是10倍浓缩液,在使用前只需用去离子水稀释到1×工作液即可。
Tris-Glycine-SDS Running Buffer [1×]:25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS, pH 8.3。
储存条件:室温。
·动植物组织RNA稳定液
编号:SY0267
英文名称:Tissue Stabilizer
规格:100ml
RNA酶广泛存在环境中,很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA,从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻,或者立即进行RNA的纯化,给研究人员的户外工作带来很多不便。
动植物组织稳定液(Tissue Stabilizer)是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA的完整性,一种无毒溶液,可迅速渗入组织,灭活内源RNase。具有以下特点:
1)操作极其简便:只需要将新鲜组织切成合适大小(≤0.5 cm)的组织块,浸入5~10倍体积的本品中即可。2)稳定周期长:经本品浸渍的组织/细胞可在37℃保存1天,室温保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃长期保存。3)下游兼容性广:几乎兼容于所有的RNA分离方法,如Total RNA Extraction Reagent总RNA抽提试剂,以及商业化的几乎所有RNA抽提试剂盒,包括离心柱抽提法,磁珠纯化法等。4)应用性广:可用于多种动植物组织如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等的保存,还可用于酵母、组织培养细胞等。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)经本品稳定液处理的样本还可做DNA的提取,甚至蛋白质的提取,但由于本品会变性蛋白质,因此不适合做天然蛋白的提取。
3)本本品稳定液室温保存过程中可能会产生一些沉淀,只需要在使用前放到37℃温育片刻,并摇晃使其重溶即可。
4)本本品稳定液仅适用于新鲜组织,不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的稳定性,可使用我司的本品-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液,即可在将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态,并进行RNA抽提的过程中,维持RNA的稳定性。
操作流程
1. 样品处理:
A. 动物组织:本品稳定液不会破坏动物组织结构的完整性,因此,已经浸入本品的组织平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块(≤0.5 cm大小),再重新放回本品稳定液中。另外,某些动物组织如骨头具有比较弱的液体渗透性,不适合用本品进行RNA保护。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
B. 植物组织:植物组织天生具有的屏障如叶子表面的蜡层可阻碍本品稳定液的渗透,往往需要破坏这些屏障层从而允许溶液的浸透。对于许多柔软的植物组织如嫩叶,嫩茎等,本品可直接渗透且达到理想的RNA保护效果。
使用:将组织切成合适的大小块(≤0.5 cm大小)后,加入5倍体积的本品稳定液。
C. 组培细胞、白细胞:按照标准实验操作方法收集细胞(用PBS清洗1-2次)。之后往细胞内加入5~10倍体积的本品稳定液。
D. 酵母:收集大约108个细胞 (12,000 g,2 min),弃上清。加入0.5~1 ml的本品稳定液。长期保存时应将酵母细胞置于本品稳定液中,4℃放置1小时。然后离心收集细胞 (12,000 g,5 min),弃上清,再置于-80℃保存。
2. 样品保存:
A. -80℃保存:对于归档的样本建议-80℃保存,且效果最佳,样本可长期保存,-80℃条件下本品溶液也会结冻。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-80℃。如果中间需要做样本的融化,建议取出4℃浸透过夜的组织或者离心收集细胞,然后再冻存在-80℃。之后,样本可直接放在室温融化,之后重新冻上,不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
B. -20℃保存:也适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃冻住,但可能会形成结晶。不会对后续RNA分离造成影响,样本可长期保存。
首先需要让样本4℃浸透过夜,然后再转移到-20℃。之后,样本可直接放在室温融化。重新冻上后不会造成RNA量的损失或者RNA完整性的破坏。
C. 4℃保存:大部分样品放到本品溶液中,稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。
D. 室温(25℃)保存:建议低温环境保存。若条件不允许,请将本品稳定液于冰上冷却几个小时,然后将样品浸入此溶液中,室温稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存:纯化的RNA样本于37℃孵育24h,结构依然完整。
3. RNA提取:
注意:RNase失活的过程是可逆的,在样本使用前不要清洗掉本品稳定液。
A. 组织样本:直接用灭菌镊子从本品稳定液中取出组织块,然后用干净的吸水纸吸掉表面的液体。之后立即置于裂解液中匀浆。
B. 细胞样本:由于本品稳定液密度较大,此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说,保存在本品稳定液中的细胞能承受更高的转速,并维持细胞的完整性。大部分细胞能够承受离心速度 (5,000 g,5 min),收集细胞沉淀。注意:由于不同细胞承受离心力会有差异,建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。
C.之后进行后续的RNA抽提,兼容各种常见的RNA抽提试剂,以及商业化的RNA抽提试剂盒。
2,4-二**氧基乙酸打折促销关键词: Diclordon,2,4-D, Vidon 638
·His标签蛋白琼脂糖纯化树脂
编号:SY0392
英文名称:Ni-NTA Agarose Resin
规格:10ml
Ni-NTA Agarose Resin以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联四配位的氮川三乙酸(NTA)为配体,螯合镍离子(Ni2+)后,形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构可保护镍离子免受小分子的进攻,与Ni-IDA树脂相比,更加稳定,可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件。已经成为实验室纯化His标签蛋白不可获取的树脂之一。
基质(Matrix):高度交联的4%琼脂糖凝胶
孔径(Bead size):45-165µm
载量(Capacity):>40mg 6×His-tagged protein/ml 基质
耐压(Tolerance Pressuremax):0.1MPa, 1bar
储存缓冲液:含20%乙醇的1×PBS
储存条件:4℃,有效期2年。
使用方法
(一)纯化流程
1 缓冲液的准备
缓冲液使用原理:低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。Buffer 在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。可溶性组*酸标签蛋白纯化所需配方详见附表1。包涵体组*酸标签蛋白纯化所需缓冲液及配方详见附表2。
2 样品准备
2.1 细菌表达的蛋白(本说明以细菌表达的蛋白纯化为例)
1)挑取单菌落到含有适合抗性的LB培养基中,根据载体说明加入相应的诱导剂诱导相应的时间。
2)表达结束后,将培养液转至离心瓶,7000rpm,离心15min,收集菌体,然后加入1/10体积的裂解液(Lysis buffer)和PMSF(PMSF在破碎前加入,其终浓度为1mM),同时也可加入其他蛋白酶抑制剂,但不能影响目的蛋白与树脂的结合。
3)之后加入溶菌酶,使其工作浓度为1mg/ml。【注】:如果表达的宿主细胞内含pLysS或pLysE,可以不加入溶菌酶。
4)将菌体沉淀悬浮起来(如果菌液浓度高,可考虑加入10µg/ml RNase A和5µg/ml DNase I),混匀,置于冰上超声破碎细胞,至菌液基本保持澄清。
5)收集上述澄清蛋白液,10000rpm,4℃离心20-30min。取上清0.22µm或0.45µm滤膜过滤后置于冰上备用或-20℃保存。
2.2 酵母、昆虫和哺乳细胞分泌表达的可溶性蛋白
将细胞培养液转移至离心瓶,5000rpm离心10min,收集上清。如上清中不含EDTA、组*酸和还原剂等,即可直接上柱纯化;如含有EDTA、组*酸和还原剂等物质,则需用1×PBS 4℃下透析后方可上柱。
【注】:对于大量体积的上清,需加入硫*(代"酸")铵进行沉淀浓缩,之后经1×PBS 4℃下透析后上柱。
2.3 包涵体蛋白纯化(以细菌为例)
1)将培养液转移至离心瓶,7000rpm,离心15min,收集菌体去上清。
2)按照菌体:裂解液=1:10(w/v)的比例将菌体充分悬浮,混匀,冰浴超声破碎。
3)将破碎液转移至离心管,10000rpm,4℃离心20-30min,去上清。可重复步骤2)和3)一次。
4)按照菌体:裂解液(含8M尿素)=1:10(w/v)的比例将包涵体充分悬浮。
5)变性条件下纯化His标签蛋白纯化。
3样品纯化
1)装柱:将Ni-NTA Agarose Resin借助重力的作用装入合适的纯化柱中。
2)清洗:3-5倍柱体积去离子水冲洗色谱柱。
3)平衡:至少5倍柱体积的Lysis Buffer 平衡色谱柱。
4)上样:注意控制加样速度,确保目的蛋白与Ni2+充分接触,以提高纯化得率。
【注】:注意收集流出液,用于后续SDS-PAGE检测蛋白的结合情况。
5)平衡/洗杂:Wash Buffer 平衡柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。注意收集流出液。
【注】:在样品和结合缓冲液中加入低浓度咪唑可以提高样品纯度。
6)洗脱:使用5-10倍柱体积Elution Buffer洗脱,收集洗脱液即目的蛋白溶液。
7)清洗:依次用3倍柱体积的Lysis Buffer和5倍柱体积的去离子水清洗树脂。
【注】:建议在清洗之前用更高浓度咪唑(如500mM)彻底清洗纯化柱上结合的杂蛋白。
8)保存:5倍柱体积的20%乙醇平衡树脂,最后将树脂保存在20%乙醇的1×PBS中,置于4℃保存。
4 SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。
(二)在位清洗
当填料使用过程中发现反压过高(>0.5Mpa)或者填料上面出现明显的污染时,需对其进行在位清洗(Cleaning-in-Place,CIP)。在位清洗时,先把Ni2+脱掉,清洗结束后,将填料保存在20%乙醇中,后者重新挂Ni后再保存在20%乙醇中。建议按照下面操作去除填料上残留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。
1 去除强疏水结合的蛋白,脂蛋白和脂类
使用30%异丙醇清洗5-10个柱体积,接触时间为15-20min可以去除此类污染物。之后再用去离子水清洗10倍柱体积。也可以选择使用含有去污剂的酸性或者碱性溶液清洗填料2倍柱体积。例如含有0.1-0.5%非离子去污剂的0.1M醋酸溶液,接触时间为1-2h。去污剂处理后,需用70%的乙醇清洗5倍柱体积,彻底去除去污剂。最后利用去离子水清洗10倍柱体积。
2 去除离子作用结合的蛋白
使用1.5M NaCl 溶液接触10-15min,之后用去离子水清洗10倍柱体积。
(三)填料再生
当填料使用过程中发现反压过高,填料上面出现明显的污染,或填料载量明显变低时,需要对其进行镍离子剥离及重新挂镍处理,即填料再生。按照下面操作流程进行:
1)使用0.2M 醋酸溶液(含6M GuHCl)清洗2倍柱体积;
2)去离子水清洗5倍柱体积;
3)2%SDS清洗3倍柱体积;
4)去离子水清洗5倍柱体积;
5)乙醇清洗5倍柱体积;
6)去离子水清洗5倍柱体积;
7)100mM EDTA(pH 8.0)清洗5倍柱体积;
8)去离子水清洗5倍柱体积;
9)100mM NiSO4清洗5倍柱体积;
10)去离子水清洗10倍柱体积。
填料再生后,可立即使用,也可保存在20%乙醇中,置于4℃备用。
附表1 可溶性His标签蛋白纯化所需缓冲液及配方
缓冲液名称 | 配方 | 配制1L溶液所需各种试剂量 |
Lysis Buffer (pH8.0) | 50mM NaH2PO4 300mM NaCl 10 mM imidazole NaOH调pH至8.0, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
NaH2PO4 ·2H2O 7.8g NaCl 17.54g Imidazole 0.68g |
Wash Buffer (pH8.0) | 50mM NaH2PO4 300mM NaCl 20 mM imidazole NaOH调pH至8.0, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
NaH2PO4 ·2H2O 7.8g NaCl 17.54g Imidazole 1.36g |
Elution Buffer(pH8.0) | 50mM NaH2PO4 300mM NaCl 250 mM imidazole NaOH调pH至8.0, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
NaH2PO4 ·2H2O 7.8g NaCl 17.54g Imidazole 17.0g |
缓冲液名称 | 配方 | 配制1L溶液所需各种试剂量 |
Lysis Buffer (pH8.0) | 8M Urea 100mM NaH2PO4 100 mM Tris·HCl 盐*(代"酸")溶液调pH至8.0, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
Urea 480.5g NaH2PO4 ·2H2O 15.6g Tris 15.76g |
Wash Buffer (pH6.3) | 8M Urea 100mM NaH2PO4 100 mM Tris·HCl 盐*(代"酸")溶液调pH至6.3, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
Urea 480.5g NaH2PO4 ·2H2O 15.6g Tris 15.76g |
Elution Buffer(pH4.50) | 8M Urea 100mM NaH2PO4 100 mM Tris·HCl 盐*(代"酸")溶液调pH至4.5, 0.22µm或0.45µm过滤除菌 |
Urea 480.5g NaH2PO4 ·2H2O 15.6g Tris 15.76g |
试剂种类 | 浓度 |
还原剂 | 5mM DTE 0.5-1 mM DTT 20mM β-mercaptoethanol 5mM TCEP 10mM reduced glutathione |
变性剂 | 8M urea 6M Gua-HCl |
去污剂 | 2% TritonTM X-100(nonionic) 2% TweenTM20(nonionic) 2% NP-40(nonionic) 2% Cholate (anionic) 1% CHAPS (zwitterionic) |
其他类 | 500mM imidazole 20% ethanol 50% glycerol 100mM Na2SO4 1.5M NaCl 1mM EDTA 60mM citrate |
缓冲液 | 50mM sodiu*(代"m") phosphate, pH7.4 100mM Tris-HCl, pH7.4 100mM Tris-acetate, pH7.4 100mM HEPES, pH7.4 100mM MOPS, pH7.4 100mM sodiu*(代"m") acetate, pH7.4 |
检测方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK法 |
甲臜产物的水溶性 | 差(需加有机溶剂溶解后再检测) | 好 | 好 | 好 |
产品性状 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 现配现用 | 即开即用 | 即开即用 |
检测灵敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
检测时间 | 较长 | 较短 | 较短 | 最短 |
检测波长 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
细胞毒性 | 高,细胞形态完全消失 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 |
试剂稳定性 | 一般 | 较差 | 一般 | 很好 |
批量样品检测 | 可以 | 非常适合 | 非常适合 | 非常适合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
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