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439
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
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北京百奥莱博生产销*(代"售")的SYA198型轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒价格厂家,是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:SYA198型轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒价格厂家
编号:SYA198
品牌:百奥莱博
规格:48次/盒
产地:国产|进口
欲了解更多SYA198型轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒价格厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·肉毒杆菌B型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA019
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·水稻转基因Cry1Ac单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA287
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·卵形疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA126
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对卵形疟原虫特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR探针技术进行卵形疟原虫的检测。
二、用途:
本试剂盒可用于卵形疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置,还可用于卵形疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
卵形疟原虫荧光PCR反应液(qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(DNA Polymerase MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
卵形疟原虫阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列,Bio-Rad 系列,Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃保存,避免反复冻融,有效期为6 个月。
六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液: 用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml,置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中,摇匀送检。
肺脏等组织:取上述组织1g左右,置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本:取相应标本3-5ml,转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本:直接取200μl 抗凝血,转至一洁净的1.5ml 离心管中,加入1ml 双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm 离心5min,弃上清,至无明显红色沉淀。(若沉淀明显,请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水,剧烈震荡15s,13000rpm 离心5min,弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
肺、淋巴结等固体组织:剪取约0.1g 组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入0.5mL TE 转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl 转移到1.5mL 离心管中,加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
乳液等液体标本:取标本2-3mL,13000rpm 离心3min,弃上清,沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl进行PCR 反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(卵形疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
阳性对照(PTC):均产生扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明卵形疟原虫核酸阳性。
Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明卵形疟原虫核酸阴性。
如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行卵形疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明卵形疟原虫核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
SYA198型轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒价格厂家关键词:SYA198,百奥莱博,轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒
·牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA662
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·马源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA295
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·流感嗜血杆菌/肺炎链球菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA055
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·结核杆菌(TB)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA488
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介
本试剂盒用一对结核杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对结核杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
该试剂盒适合于检测外周血等样本中结核杆菌DNA,用于结核病等疾病的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(40T/Kit)
组份 数量 规格
TB反应液(TB-qPCR MIX) 1管 560μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合液(Enzymes MIX) 1管 40μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
TB阳性对照(TB-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-18℃以下保存,有效期为12个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 适用标本类型:痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水,其他肺外感染可取血、相应部位分泌液或组织细胞等。
6.1.2 标本采集
6.1.2.1 组织:取发病组织约1g,置入1.5mL洁净EP管,立即送检;
6.1.2.2 血液:无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;
6.1.2.3 液体标本:取0.5-1mL左右,置入1.5ml洁净EP管,立即送检;
6.2 样本前处理:
6.2.1 脑脊液和胸、腹水:13000rpm离心3min沉淀集菌,去上清;
6.2.2 痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本:经4%NaOH(痰和碱的比例为1:4,尿、支气管灌洗液和碱的比例为1:1)处理15min;尿标本加5%鞣酸、5%乙酸各0.5mL于锥形量筒内静置,处理后吸去上清,沉淀直接用于提取结核杆菌DNA或者经酸中和后接种培养,然后再对培养物提取DNA。
6.3 DNA提取
6.3.1 对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(TB-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TB-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(TB-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明结核杆菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明结核杆菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行结核杆菌real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明结核杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
SYA198型轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒价格厂家关键词:SYA198,百奥莱博,轮状病毒B型荧光PCR检测试剂盒
·猪伪狂犬野毒(gE)抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA644
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA075
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA629
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·RoundupReady®转基因抗除草剂大豆特异性基因单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA278
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·季节性H3流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA149
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规格:48次/盒
·玉米转基因MON810单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA270
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA139
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·口蹄疫(FMDV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA556
等级:科研实验专用
规格:10次/盒|48次/盒
·博卡病毒(HBocaV)/偏肺病毒(HMPV)双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA189
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中偏肺病毒/博卡病毒的特异性检测。适用于偏肺病毒/博卡病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对偏肺病毒型特异性引物,一对博卡病毒型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对偏肺病毒/博卡病毒RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中偏肺病毒型的探针报告基团为FAM,博卡病毒型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 偏肺病毒/博卡病毒反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX) | 1管 | 576μL/管 |
| qRT酶混合物(qRT Enzymes MIX) | 1管 | 192μL/管 |
| 无核酸酶水(Nuclease-Free Water) | 1管 | 500μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 偏肺病毒/博卡病毒阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
➤血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
➤血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
➤拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
➤病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
二、RNA提取:
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 12µL | N×12µL |
| 酶混合物 | 4µL | N×4µL |
| 总量 | 16µL | N×16µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC)4μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 反转录(Reverse Transcription) | 1循环 | 50℃ for 30 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 5 min | |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 10 sec 55℃ for 45 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测HMPV,VIC/HEX/JOE基团检测HBocaV。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
➤阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
3.结果判定
➤FAM通道:Ct值≤35HMPV核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明HMPV核酸阴性。
Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明HMPV核酸阳性;否则判为样本阴性。
➤VIC/HEX/JOE通道:Ct值≤35 HBocaV核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明HBocaV核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明HBocaV核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
➤PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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一、 市场上主要产品种类与主要生产厂家 目前,我国已获得FDA批准的快速诊断产品有471项,国产试剂441项,可分为7类,但大部分产品集中在以下类别中前4类: 1. 传染病类: a) 肝炎类:乙肝两对半、甲肝、丙肝、戊肝 b) 性病类:HIV、TP、淋球菌 c) 肠道相关病毒:幽门螺旋杆菌、轮状病毒 d) 其他:结核分支杆菌、肺炎支原体、霍乱、疟原虫 2. 反应生殖水平的激素类:绝大部分集中在hCG(早早孕)与LH(排卵水平)检测; 3. **类
以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。 为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下(表22-5);这些仪器主要用变温铝块、变温水浴及变温气流的方式达到热循环的目的,各有其优缺点。国产1109型DNA扩增仪则是用恒温浴机械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B体积小,智能化与自动化程序高,可以兼做套式PCR,方便实用。以上各种仪器
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