- ¥4200 - 5800
- 百奥莱博
- SYA800-CAT
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
249
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括北京现货鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒厂家在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。
名称：北京现货鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒厂家
产地：国产|进口
编号：SYA800
规格：48次/盒
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
本试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的鼻疽伯克霍尔德菌(BP)，用于鼻疽伯克霍尔德菌(BP)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成：
| 组份 | 数量 | 规格 |
| BP反应液(BP-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| BP阳性对照(BP-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件：-20℃以下，有效期6个月。
使用方法：
一、样品采集：取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BP-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：
| 1循环 | 50℃ for 2 min预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 minPCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。
四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BP-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性；否则判为样本阴性。
五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验北京地区1. 北京万泰生物药业有限公司北京万泰生物药业有限公司目前有卫生部颁发的甲肝,乙肝，丙肝,艾滋病,梅毒等9个体外诊断试剂生产文号,成为国内生产体外诊断免疫诊断试剂品种最全的厂家之一.公司近年来发展迅速,在国内市场具有一定的知名度.为满足日益扩大的市场需求,于99年2月按国家卫生主管部门要求的最高水平建成GMP厂房并投入使用,成为国内第一家GMP 认证要求实施的体外诊断试剂生产企业.公司提供了血源筛查的全套试剂：HBSAG,HCV，HIV,TRUST,产品工艺先进,质量稳定,批批
7. 其他：粪便隐血（FOB）、C反应蛋白 、尿微量白蛋白、反恐系列（炭疽杆菌、A型肉毒毒素、鼠疫菌、鼻疽菌、类鼻疽菌等） 国内主要生产商：艾康、新创、荣盛、上海凯创、万华普曼、蓝十字、金豪（金豪产品主要集中在反恐系列） 国外主要生产商（指在国内获得FDA批准文号的厂家）：英维利斯（InvernessMedical）、韩国SD 二、快速诊断的市场现状与前景 1． 传染病与优生优育检测： 目前疾病传染病类检测除用于手术前快速诊断外，还占有一部分临床诊断份额。尽管传染病的胶体金诊断
菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常阳性，粘质和液化沙雷菌和某些变形杆菌及枸橼酸杆菌阳性。此外，铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜水气单胞菌也能利用枸橼酸盐。 2．丙二酸盐利用试验 (1)原理：某些细菌能利用丙二酸盐作为唯一碳源，丙二酸盐被分解生成碳酸钠，使培养基变碱。 (2)方法：将待检菌接种于丙二酸盐培养基中，置35℃孵育24~48h，观察结果。 (3)结果：培养基由绿色变为蓝色为阳性。颜色无变化为阴性。 (4)应用：肠杆菌科中亚利桑那菌和克
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