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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
17
- 供应商:
圻明
- 检测范围:
详见说明
- 检测方法:
免疫组织化学
- 应用:
病理学研究
- 适应物种:
人大小鼠兔牛
- 标记物:
HRP-SA
- 样本:
组织
- 规格:
50T-100T
免疫细胞化学染色方法
1、细胞标本置于载玻片上;
2、固定:建议使用95%乙醇或10%中性缓冲福尔马林固定液固定10分钟;
3、稍水洗,载玻片上加1%Triton X-100试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
4、根据第一抗体的要求,对细胞进行相应的抗原修复;
5、如有必要,每张载玻片上加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
6、除去PBS,载玻片上加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,PBS冲洗3x3分钟;
7、除去PBS,载玻片上加检测试剂盒(按照试剂盒说明书进行操作),PBS冲洗3x3分钟;
8、除去PBS,根据检测试剂盒选择相应的显色系统,后中性树胶封固。
备注:更好的方法是通过离心或直接收集将细胞聚拢,再用蛋清或琼脂包裹后形成细胞块进行固定、脱水、包埋、切片,再按照免疫组化染色步骤进行操作。
免疫组织化学技术是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色。借助显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察其颜色变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的一门新兴组化技术。
在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义颇为重要。免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到普遍认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50-75%。
组织的固定:病理学研究和免疫组化实验中,组织的固定是非常重要的一步。将目的组织放于某些化学试剂中,使组织中的细胞物质接近于具有生命功能时的结构和形态称为固定。组织固定还要减少外源性和内源性分解酶的作用,防止细胞自溶等,从而保持组织和细胞内的抗原性,使抗原不失活。
O-6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶,MGMT,免疫组化试剂盒大鼠具有以下特点:多聚物技术,使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度的敏感性、染色强度,可以避免由于生物素引起的非特异性背景显色,更适合于生物素含量较高的组织细胞的免疫组化实验;孵育时间短,只需孵育15分钟,使得免疫组化实验时间大为缩短,是医院病理科开展免疫组化实验的理想试剂盒。
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文献和实验化及CpG岛 DNA甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一,可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。甲基化的主要形式有5-甲基胞嘧啶,N6-甲基腺嘌呤和7-甲基鸟嘌呤。原核生物中CCA/TGG和GATC常被甲基化,而真核生物中甲基化仅发生于胞嘧啶。 DNA的甲基化是在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5'端的胞嘧啶转变为5'甲基胞嘧啶。这种DNA修饰方式并没有改变基因序列,但是它调控了基因的表达[3]。脊椎动物基因的甲基
。ctDNA 在循环中的半衰期短,一般为 16 min~2.5 h,适用于肿瘤负荷的实时监测。我们通过对 ctDNA 序列分析可以监测肿瘤内的异质性和克隆进化,从而改善疾病控制和指导治疗决策。 2. DNA 甲基化与肿瘤 DNA 甲基化是一种共价化学变化,在高等真核生物基因组仅发生在胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)中胞嘧啶的 C5 位,胞嘧啶结合一个甲基(CH3)后形成5-甲基胞嘧啶(5-mC)。该反应由 DNA 甲基转移酶催化,CH3 基团来自s-腺苷甲硫氨酸。这些二核苷酸
mRNA的帽状结构 cap structure(of mRNA)
XMe 。 第二个核苷也甲基化,是最普通的帽状结构。第二个核苷( x)多为腺嘌呤核苷,也有鸟嘌呤核苷或嘧啶核苷。这些核苷的甲基化一定是在 2′ -核酸的位置上,腺嘌呤核苷的腺嘌呤的 6位也可被甲基化,形成二甲基( 2′- O, N6 )腺嘌呤核苷:( 3) Cap2: 7Me Gppp XMe p YMe ,为 7-甲基鸟嘌呤核苷加上第二个核苷( x)的甲基化,第三个核苷( Y)的核糖( 2′- C)也甲基化。这种结构在动物细胞中均有微量存在。帽状结构,由 RNA的 5′末端
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