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- 百奥莱博
- BTN131008-OWS
- 北京
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
740
- 英文名：
RIPA Lysis Buffer(Weak)
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，4℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")弱RIPA裂解液优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应弱RIPA裂解液优惠促销，产品信息：
类别：蛋白质研究
英文名：RIPA Lysis Buffer(Weak)
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 弱RIPA裂解液 | BTN131008 | 250mL |
编号：BTN131008
品牌：百奥莱博
规格：250mL
产地：国产|进口
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：
| 产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
| 有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40，0.25% deoxycholate |
| 裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
| 对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
| 对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
| 胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
对于培养细胞样品：
1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
备注：
1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
弱RIPA裂解液优惠促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：弱RIPA裂解液,BTN131008,RIPA Lysis Buffer(Weak)
我公司是一家集研发、销*(代"售")、实验室技术服务于一体的高科技企业。 多年来一直处于行业前沿。我们专业经营培养基、生化试剂、弱RIPA裂解液、进口ELISA试剂盒、化工产品、实验室消耗品、实验室耗材以及实验室器材。产品涉及分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗等领域。
欲了解更多弱RIPA裂解液优惠促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN130978 | RNA纯化 | 血清血浆游离RNA提取试剂盒 |
| BTN60207 | 克隆与表达 | *霉素溶液 |
| BTN131122 | 蛋白质研究 | 考马斯亮蓝R-250 |
| BTN130204 | 克隆与表达 | Oligo快速复性液 |
| BTN81101 | DNA纯化 | 柱式昆虫DNA提取试剂盒 |
| BTN120692 | 克隆与表达 | 硫*(代"酸")庆大霉素 |
| BTN130665 | 工具酶 | Cre重组酶 |
| BTN120308 | 细胞及免疫学 | 植物叶绿体纯化试剂盒 |
| BTN120687 | 克隆与表达 | 环孢霉素A |
| BTN90708 | 核酸扩增(PCR) | 即用型高保真PCR试剂盒 |
| BTN131223 | 其他细胞生物学试剂 | Zenker固定液 |
| BTN130635 | 工具酶 | T7核酸内切酶I |
| BTN130958B | 核酸电泳和回收 | 蓝色DNA上样液(6×,非甘油) |
| BTN130675 | 工具酶 | 核糖核酸酶HII |
| BTN81212A | 蛋白质研究 | 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH) |
| BTN130856 | 工具酶 | T4 RNA连接酶2(截短型) |
| BTN160903 | 核酸扩增(PCR) | 可调式易错PCR试剂盒 |
| BTN61205 | 蛋白质研究 | 血清白蛋白清除剂 |
| BTN3280 | 核酸电泳和回收 | 电泳级SYBR Green I |
| BTN120408 | 工具酶 | 绿豆核酸酶 |
| BTN160681 | 细胞组织染色 | 乙酰胆碱酯酶染色试剂盒(亚铁*化铜法) |
| BTN60604 | RNA纯化 | DEPC处理水 |
| BTN140391 | 克隆与表达 | 大肠杆菌T1化学感受态细胞 |
| BTN100939 | 蛋白质研究 | 福林酚试剂 |
| BTN130639 | 工具酶 | 核酸内切酶III(Nth) |
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文献和实验，比如 RIPA，虽然裂解剧烈，但是无法维持蛋白天然构象，会破坏互作蛋白对。 如果自配，建议采用温和系统，比如 NP40/Triton 0.1%-1%；SDS ≤0.1%，盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合，要考虑孵育（结合）顺序 如果抗体和 beads 先孵育，建议 选择 pH 8.2（更常用）或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y，抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
【原创】Western Blot技术交流第一期 蛋白样品的获得
样本的获得。 Western Blot实验主要目的是检测蛋白质的表达，所以首先得从实验样本中获取蛋白质，目前使用较多的样本是细胞及哺乳动物组织、其次是细菌及真菌、再后是植物。 细胞及哺乳动物的组织：目前提取与纯化蛋白质最经典的方法是RIPA强、中、弱系列的裂解液及NP-40裂解液、SDS裂解液、哺乳动物蛋白抽提试剂，组织蛋白抽提试剂。这几种裂解液裂解原理相似，但作用效果不同，实验者需要根据自身实验需求来选取合适的裂解方式，例如RIPA（强）裂解液与SDS裂解液是作用效果很强的裂解液，可以使样本充分
？如果我想检测全细胞的蛋白，不分可溶性和不溶性，应该怎么做呢？ waterzouyx RIPA裂解液也分强、中、弱的，要看看你的目的蛋白是否为难溶性蛋白，如果为难溶，你的沉淀中有目的蛋白也正常了。暂时没听说不溶性蛋白可以做WB的。个人认为你要求的全细胞蛋白的问题，你可以考虑用二维电泳用的蛋白裂解液，其裂解效率非常高，不溶性沉淀非常少 。另提醒下，RIPA法裂解的蛋白提取物，不能用Bradford法测定蛋白浓度的 zhangyong1980121
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