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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
942
- 英文名:
Verhoeff Fixative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN140588型Verhoeff固定液怎么卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN140588型Verhoeff固定液怎么卖
编号:BTN140588
规格:250mL
产地:国产|进口
英文名:Verhoeff Fixative Solution
本产品为眼球常用固定液,主要成分为甲醛、酒精、苦味*(代"酸")。固定48h后,即可脱水。固定于Verhoeff固定液中的眼球可以长期保存。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
欲咨询购买BTN140588型Verhoeff固定液怎么卖,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·青霉素G*盐溶液
编号:BTN120698
英文名称:Penicillin G Sodium Solution
规格:10mL
本产品为浓度200mg/mL的青霉素G*盐溶液,参考浓度100mg/mL。青霉素G *盐(苄基青霉素*盐;Benzylpenicillin sodiu*(代"m") salt),分子式:C16H17N2NaO4S,分子量:356.37,CAS号:69-57-8。溶于水。常用的用途有生化研究、培养基的配制和抗生素等。
储存条件:低温运输、-20 ℃避光保存,有效期为6个月。
·藻类RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN120503
英文名称:Algae RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 100ml |
| 溶液D | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为1mL,则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中,室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入0.7mL混合液,重复上面的操作,直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤:将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定,建议先使用小体积洗脱液,这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD比值没有意义。
BTN140588型Verhoeff固定液怎么卖关键词:Verhoeff Fixative Solution,Verhoeff固定液,BTN140588
·一站式GST标记蛋白质微量纯化套装
编号:BTN111116A
英文名称:One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(A)
规格:20次
重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶能提高重组蛋白的水溶性,所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合,并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立,是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的,其原理如下:
产品特点:
1.一站式套装,含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达GST 标记蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
2.专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。
3.只能在非变性条件下使用,只可用于纯化没形成包涵体的GST 标记蛋白。
4.每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
5.提供4mL浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose 介质,可吸附5-10mg GST 标记蛋白质。
6.本介质可以反复使用多次。
试剂盒组成:
| 成分 | 20次(A) | 20次(B) |
| 谷胱甘肽-Agarose介质,50% | 4ml | 4ml |
| 10×PBS缓冲液 | 100ml | 100ml |
| 溶液A | 1ml | 无 |
| GST洗脱缓冲液成分一 | 25ml | 25ml |
| GST洗脱缓冲液成分二 | 约80mg | 约80mg |
| 溶菌酶(20KU/mg) | 无 | 30mg |
| Benzonase(2U/μL) | 无 | 20μl |
| PMSF(10mg/mL) | 0.5ml | 0.5ml |
| 6mL层析柱(带筛板) | 1套 | 1套 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需低温运输。收到货后,介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:
1.每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照,在下面描述中就不再提醒。
2.本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供的10×PBS缓冲液而得。PBS缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌,注意防止污染。
3.GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中,摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液,分装成小份放-20℃保存,每次用一管。
一、重组蛋白的表达和细菌收集
1.37℃振荡培养20mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2.加IPTG 到终浓度为0.1mM,30℃振荡培养3小时或22℃振荡培养8小时(或过夜)。
3.4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清。
4.用1×PBS缓冲液重悬细菌沉淀,4℃ 5000g离心10分钟,弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
二、细胞裂解
5.如果用本产品A型,用1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(1mL 1×PBS缓冲液+50μl溶液A+ 25μl 10mg/mL的PMSF溶液)重悬细菌沉淀,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,一般选1K-10K 频率处理15次,每次20秒,间隔1分钟(必需放置在冰上)。裂解物不能粘稠,否则会堵塞层析柱。
6.如果用本产品B型,在1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(在20mL 1×PBS缓冲液中加入所有30mg 溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,取一管使用,剩余的-20℃放置)中加入25μl 10mg/mL的PMSF溶液和1μl Benzonase,用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置30分钟,得到细菌裂解物。
7.将超声或酶法细胞裂解物在13000 g 4℃离心10分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱,所得上清即含可溶性GST 标记蛋白。
三、层析柱的制备和GST蛋白纯化
8.摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据GST蛋白产量决定,100mL菌液一般使用200μL介质即可)。下列步骤各溶液的用量均针对200μL介质而定,如果介质用量不同,各溶液用量需相应调整。
9.用5mL预冷的1×PBS缓冲液洗柱。
10.将第7 步得到的上清液(含可溶性GST标记蛋白)上柱,让重力使上柱液自然流出,收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢,所以流速一定不能快,否则结合不充分。流速一般在0.2-1mL/分钟即可。如要提高GST 标记蛋白与介质的结合效率,可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用0.5-2mL 1×PBS缓冲液洗柱,收集并保存穿透液(含杂蛋白)。
12.用0.2-1mL GST洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含GST 标记蛋白)。由于可能含蛋白酶污染,所以穿透液不能在4℃放置,需立即用于后续处理(如浓度测定或SDS-PAGE电泳)或-80℃长期放置。
13.对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意:如果不预先脱盐,则只能用Bradford法或OD 检测法(1 OD280 约等于0.5mg/mL蛋白)测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD,所以在SDS-PAGE胶上,GST 标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。
附:GST柱的恢复(本试剂盒不含所需试剂)
1.用3倍体积的6M盐*(代"酸")胍处理柱子10分钟。
2.用3倍体积的超纯水处理柱子10分钟。
3.用3倍体积的缓冲液一(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH8.5)处理柱子10分钟。
4.用3倍体积的缓冲液二(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH4.5)处理柱子10分钟。
5.再重复3-4 步两次。
6.用3倍体积的超纯水处理柱子3次。
7.用3倍体积的1×PBS缓冲液处理柱子2次。
8.堵上漏口,加3倍体积的1×PBS缓冲液待用。若长时间不用,则第7步和第8步的1×PBS改成20%的乙醇。
BTN140588型Verhoeff固定液怎么卖关键词:Verhoeff Fixative Solution,Verhoeff固定液,BTN140588
·微量蛋白沉淀试剂盒
编号:BTN81217
英文名称:Mini Protein Precipitation Kit
规格:50次
本产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品,其原理是通过酸使蛋白质变性,溶解度降低,在离心条件下沉淀,而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。
产品特点:
1. 操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
2.产品稳定,可室温长期放置。
3.可以处理各种液体样品(如细胞或细菌培养物,细胞裂解物,蛋白质提取物等等)。
4.浓缩效果强,可浓缩浓度低达1μg/mL的蛋白。
5.可用于含SDS的样品,但灵敏度稍低(5μg/mL)。
6. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 0.5ml |
| 溶液B | 1ml |
| 溶液C | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法一:用于不含SDS的样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL
1、将100μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2、加入10μL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置15分钟。
4、加入10μL溶液B,轻轻混匀。
5、冰上放置60分钟。
6、4℃12000~15000×g离心10分钟。
7、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8、加入1mL 冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000~15000×g离心15分钟。
9、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
10、短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
11、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
使用方法二:用于含SDS的样品,但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL
1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品(浓度不低于5μg/mL)转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2、加入8μl溶液B,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4、4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
5、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
6、加入1mL冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
7、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
8、短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
9、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
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