北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买
规格：50次
英文名：Hair DNA column extraction kit
编号：BTN80805
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
动物毛发不容易降解，同时含有大量的线粒体，所以是考古研究、法医研究和线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品DNA提取的产品很少，为此我们研发了本产品。

产品特点：
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合，前者使DNA充分释放，后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理论产率一般是0.1-1.5μg之间)。
3.DNA纯度高，OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.适合于动物的各种毛发。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50mL
蛋白酶K溶液(10mg/ml)	1mL
溶液B	15mL
溶液C	50mL
离心吸附柱(15层膜)	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液	5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1.将30-50mg左右毛发充分剪碎(成芝麻大小就可以)，最后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：最好从靠近根部的地方剪取样品。
2.加入1mL溶液A(使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇，β-巯基乙醇的终浓度为5%)和20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。
 注意：最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12000rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7.将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8.将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30μL通用洗脱液。
11.12000rpm离心1分钟，管底即为毛发DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。
 注意：由于头发中DNA的含量十分少，所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。

更多有关北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·生物素化蛋白L
编号：BTN131101
英文名称：Biotin-Protein L
规格：0.5mg
本产品为生物素标记的蛋白L，可以结合含有特别kappa轻链的所有种类的IgG(IgG,IgM,IgA,IgE和IgD)，与kappa轻链结合而不干扰抗原的结合。其还可以结合单链抗体可变区基因片段(ScFv)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·核酸液相杂交液
编号：BTN131165
英文名称：Nucleic Acid Hybridization Solution
规格：10mL
本产品为4×核酸液相杂交液，可专门用于核酸液相杂交实验，如差减杂交(SSH)等实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·辛甲基β葡糖苷
编号：BTN131044
英文名称：Octyl-β-Glucoside
规格：1g
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量，可通过透析去除。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·pUCm-T载体
编号：BTN160101
英文名称：pUCm-T vector
规格：1μg
本产品是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC系列载体改造而成，在pUC载体的多克隆位点处插入特殊的限制性内切酶识别位点，酶切后能在载体的3´端形成悬挂的“T”末端。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA 每条链的3´端加上一个突出的碱基A。这样，pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT 配对，在连接酶的催化下，就可以把PCR产物连接到，pUCm-T载体中，形成含有目的片断的重组载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片断的重组克隆，大大提高了3´末端A 突出PCR产物的连接、克隆效率。本产品应用于进行TA 克隆，克隆PCR产物。对克隆后的PCR产物可以用M13通用引物进行DNA 测序。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一. 实验准备
1. PCR产物3´末端带有突出的A碱基：Taq、Tth、Ampli Taq、Klen Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物3´末端均带有突出的A碱基。建议扩增的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行回收，再进行连接转化实验。
2. PCR产物3´末端没有突出的A碱基：Pfu、Pwo、Tli或DeepVent等DNA聚合酶具有3´5´外切酶活性，其扩增的PCR产物末端可能不带有3´A，要对这种平末端PCR产物进行克隆，应先对其进行3´末端加A，再进行连接转化实验。

二.连接反应
3.在一个标准的10mL连接反应体系中，加入下列成分：

反应组分	10μl反应体系
插入的目的片段	xμL(0.2 pmol)
本产品	1μL(50 ng)
10×连接酶缓冲液	1μL
T4 DNA连接酶	3-5 U
补水到	10 L

 注意:一般最后加入T4 DNA连接酶。
4. 用移液器吹打反应混合液使之混匀后，16-23℃连接1～12小时(或按T4 DNA连接酶供货商提供的操作手册进行连接)。

三．细菌转化和鉴定
5. 将100μl感受态细胞置于冰上解冻后，完全解冻后轻轻将细胞均匀悬浮。
6. 加入上述5μl连接液，轻轻混匀，冰上放置30分钟。
7. 42℃水浴热激90秒，再冰上放置15～20分钟。
8. 加入400μl自备的SOC培养基，37℃ 200～250rpm振荡培养1小时。
9. 4000rpm离心5分钟，用枪头吸掉400μl上清液，用剩余的培养基将细胞悬浮。
10. 将细菌悬液均匀涂布在含20μl的IPTG(100mM)和100μl的X-gal(20mg/mL)的*苄青霉素抗性的自备的LB平板上。(涂布菌液的用量可以根据连接的效率及感受态细胞的转化效率而进行适当的调整。)
11. 将平板于37℃培养1小时，然后倒置培养过夜。(先将平板正向放置1小时，以吸收过多的液体。)

四．筛选
12.转化子的蓝白筛选：
 当外源DNA片段插入到pUCm-T载体中后，由于外源DNA的核酸序列存在改变了LacZ基因的编码，从而影响了其产物β-半乳糖苷酶α-片段的活性，因此重组克隆在-gal/IPTG 平板上呈现为白色，而非重组克隆呈蓝色。选择在IPTG/X-gal 平板上生长的白色菌落，用牙签挑至含*苄青霉素的液体培养基，37℃培养过夜。
13.转化子的鉴定：
1)用上述培养的白色菌落的菌液抽提质粒，用PstI单酶切或用其它合适的酶切,琼脂糖凝胶电泳检查片段大小，确定是否含有目的片段。
2)用M13通用引物或其它合适的引物直接进行测序来确定是否含有目的克隆。

操作提示：
1. PCR产物的纯度：
 连接反应前需用琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物，如果电泳检测PCR产物条带弥散，或出现非特异条带，则需要切下目的条带，用胶回收试剂盒对目的片段进行回收。若PCR产物电泳检测只有预期大小的明显条带，也应使用PCR产物纯化试剂盒直接纯化PCR产物，以除去引物二聚体。不经纯化的PCR产物在某些条件下可直接用于连接，但由于引物二聚体和PCR产物中其它物质的影响，造成含有插入片段的阳性克隆数减少，因而需要筛选很多克隆方可得到含有目的PCR产物的阳性克隆。
2. 平端PCR产物
 具有校正活性的热稳定性DNA聚合酶如Pfu、Pwo、Tli在进行PCR扩增时产生平端PCR产物。这种平端PCR产物可以进行3´末端加A 尾后连接到pUCm-T载体中，采用这种方法进行连接，可大大提高克隆的效率。
3.优化插入片段和载体的摩尔比
1)pUCm-T载体优化的插入DNA片段和载体的摩尔比为3:1，采用3-10:1的连接比例也可成功进行连接。如果你的PCR产物开始连接的不理想，则有必要优化连接比例。
2)PCR产物的量可采用以下公式进行换算：
PCR片段的量(ng)= [加入载体的量(ng)×插入片段大小(kb)/载体大小(kb)]×插入片段和载体的摩尔比
4.筛选含插入片段的转化子
插入片段成功克隆到pUCm-T载体中，可阻断β-半乳糖苷酶的编码序列，因而重组克隆可在指示培养基上通过颜色进行筛选。大多数情况下含有PCR产物的克隆菌为白色，如果PCR片段和LacZ基因在同一读码框内，即PCR片段碱基数是3的整数倍(含3´-A)，并且读码框无终止密码子，则重组克隆菌可能为蓝色。

质粒图谱：



北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买关键词：Hair DNA column extraction kit,BTN80805,柱式毛发DNA提取试剂盒


·LB-Lennox培养基
编号：BTN100820
英文名称：LB-Lennox Medium Powder
规格：250g
LB培养基全名是Lysogeny Broth(非Luria-Bertani)，它是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。Lennox将其Glucose去掉，并将NaCl浓度从0.5 g/L增加到15 g/L。本产品就是根据Lennox配方制备，可用于各种细菌培养。其盐浓度较LB Miller低一倍，主要跟盐敏感抗菌素(如Zeocine)一起使用。本产品加水灭菌后即得液体培养基，即可使用。配制一升液体培养基需要25g本产品。

储存条件：常温运输及保存，有效期半年。

·miRNA尿素-PAGE上样液
编号：BTN70608
英文名称：miRNAload
规格：1.5mL
本品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳上样液，含有RNase-free的去离子甲酰胺、RNase-free的EDTA和RNase-free的染料等。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备RNase-free的各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将miRNA样品与本上样液1：5混合，70℃加热处理2-3分钟后，0℃冷却即可直接上样。
3.染料分子小，不会干扰mi R N A的染色。
4.跟本公司的一站式miRNA 尿素-PAGE电泳套装兼容。
5.还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·基因转染增强剂
编号：BTN140621
英文名称：Hexadimethrine bromide
规格：0.5mL
聚凝胺Polybrene又名为*化己二甲铵、海美*铵，CAS号：28728-55-4。聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强转染效率。Polybrene 增强转染效率原理图如下：


产品特点：
1．Polybrene广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒介导的基因转染等实验，可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的转染效率。
2．Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元，DC细胞)毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。
3．Polybrene还是一种有效的抗肝素剂(肝素拮抗剂)，常用来生产非特异性凝集的红细胞；还可用于蛋白测序，小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象；PVDF 膜上加入Polybrene能提高膜的亲和性。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

慢病毒感染举例：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．第二天感染前，从-80℃冰箱取出病毒，冰浴融化，参考相关文献或者根据预实验得到的MOI 值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。
 注意：轻轻混匀，不要使用振荡器。
3．吸去细胞原有培养基，将按照MOI 稀释好的病毒液+培养基+ Polybrene(对于293细胞，终浓度6μg/mL)加入细胞中，轻轻摇匀。37℃培养过夜。
 注：病毒液-培养基-Polybrene 混合液，按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②加入病毒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为2μg-12μg/mL。
轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI高于20时，建议客户添加Polybrene(终浓度2～12μg/mL，浓度因不同的细胞而异，具体的请参考相关文献)来提高病毒的感染效率。如果感染目的细胞是Jurkat，kasumi，NB4，H929，GBC-SD，MCF-7等，建议不要添加Polybrene；大部分原代细胞感染也不需要添加Polybrene，以上仅供参考。
4．感染48小时后，吸除含慢病毒的培养基，换为新鲜的培养基。
5．继续培养24～48小时后，根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。

质粒转染：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．准备 DNA-培养基-Polybrene混合液。按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②添加10ng～10μg质粒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为5μg-10μg/mL。
 轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
3．去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h 轻柔混匀。
4．去除 DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1×HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3mL，100mm培养皿4mL)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
5．立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5mL培养液清洗，100mm培养皿每次用10mL培养液清洗。
6．加入完全培养基到细胞中，根据需要进行后续实验。
 稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
 瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

备注：Polybrene的使用浓度依据细胞种类，转染方法等影响，以下使用浓度仅作参考。
1．为提高腺病毒转染效率和LacZ转基因表达，使用6μg/mL Polybrene处理病毒载体后转入BHK-21细胞(MOI为100)，转染率提高到95%，没有用Polybrene处理的只有2.3%转染率。
2．在KSHV(Kaposi"s sarcoma-associated herpesvirus)纯化和转染实验中，浓缩的病毒与8μg/mL Polybrene加到BCBL-1细胞中37℃下孵育2h。
3．在逆转录病毒构建研究中，用v-rasHa 逆转录病毒转染角质细胞(Keratinocytes)后在含有4μg/mL Polybrene培养基中培养3天，病毒滴度为1×107 virus/mL，MOI 为1。
4．在shRNA编码的慢病毒载体的转染研究中，病毒上清中加入8μg/mL Polybrene，转染到HEK293细胞中。
5．在慢病毒shRNA转染研究中，将含有6μg/mL Polybrene的新鲜培养基加入到培养24h的RCC10细胞中，用慢病毒颗粒转染细胞。


北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买关键词：Hair DNA column extraction kit,BTN80805,柱式毛发DNA提取试剂盒

5-*-6*-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 Thymol 93863-88-8
DN3801 新型大量植物DNA快速提取试剂盒
DP440 RNAlock血液稳定剂
BTN81205 一站式Tricine-SDS-PAGE套装 One-Stop Tricine-SDS-PAGE Pack
F030819 BIOTIN标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*BIOTIN
ARB13855 猪甘油三酯(TG)检测服务 Porcine triglyceride,tg ELISA KIT
ZCQX02 兔全血 500ml
ARB11896 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa检测 Human phospho protein kinase c,p-pkc ELISA KIT
尿酮体定性检测试剂盒(Lange法)   50T
SJ0191 Dextran T-70  葡聚糖 T-70
ARB10247 人乙*(代"胺")碘呋酮(AD)Elisa方法检测 Human amiodarone,ad ELISA KIT
PY04-024  1%亚碲酸*(*)溶液  2mg/支×10支  每支添加于00ml亚碲酸*(*)肉汤培养基基础，用于金黄色葡萄球菌增菌培养
ARB13397 羊布病(BrucellosIs)代做ELISA实验 
ARB11768 人腺相关病毒载体(AAV)含量检测 Human adeno-associated virus,aav ELISA KIT
ARB10253 人乙醇脱*酶(ADH)ELISA检测服务 Human alcohol dehydrogenase,adh ELISA KIT
ARB11454 人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)elisa测定使用说明书 Human oxidized lowdensity lipoprotein antibody,olab ELISA KIT

我公司正在火爆促销DNA纯化系列产品，欢迎您的垂询选购北京现货柱式毛发DNA提取试剂盒哪里买。