北京现货BTN131108型ONPG干粉哪里买

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名称：北京现货BTN131108型ONPG干粉哪里买
品牌：百奥莱博
规格：1g
编号：BTN131108
英文名：o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物，在420nm 有最大吸收，且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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ARB11822 人精*酸加压素(AVP)Elisa方法检测 Human arginine vasopressin,avp ELISA KIT
CD111 超纯dATP(100mM)
F030105 HRP标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*HRP
ARB11871 人糖蛋白130(gp130)Elisa分析 Human glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
ARB14164 小鼠流行性出血热(EHF)血清中含量检测 
柠檬酸*-EDTA抗原修复液(40×)   100ml
没食子酸乙酯 Protein  little MW marker 831-61-8
ARB11481 人胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶免分析 Human ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
PY01-060  肌酐  5克  
BTN130516 羧基磁珠 Magnetic beads,Carboxylic
ARB11773 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)酶标法分析 Human ureaplasma urealyticum antibody,uu-ab ELISA KIT
F030611 FITC标记山羊抗小鼠IgA抗体 Goat Anti-Mouse IgA*FITC
BL0940 生物素化人IgG抗体
北京现货BTN131108型ONPG干粉哪里买关键词：o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside,ONPG干粉,BTN131108


·绿如蓝核酸染料(UV)
编号：BTN70303
英文名称：DNAgreen(UV)
规格：1.5mL
目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花*类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高，但由于其化学稳定性差(怕光、怕水、怕热)，实验结果的重复性往往不尽人意；此外，SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位，很容易使DNA 条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率也不如EB。所以在实际应用中依然不能有效替代EB。本产品是同时具有EB 稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料

产品特点：
1.低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2. 灵敏。检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。
3. 稳定。对光、水和热的稳定性跟EB相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4. 无分子间位移现象。不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5. 使用方法多样。既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7. 观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源，可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9. DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。由于避免了UV 对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意:虽然本产品的主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，但操作时最好还是戴上塑料手套。

使用方法之一：电泳中染色DNA(RNA的染色跟DNA完全一样)。
本方法是将DNAGREEN 直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于PAGE。
1. 将DNAGREEN 直接加入到融化的琼脂糖凝胶中，每100mL凝胶加3-10μl DNAGREEN，混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I，否则会相互干扰)。在100mL 琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10μl，否则背景将很强。注意：一定要保证琼脂糖彻底熔化，尤其是在第一次熔化胶的时候，否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。
2. 将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。注意：一定要使用不含SDS等去污剂的上样液，否则SDS 会跟染料结合，极大地降低灵敏度。
3.上样后电泳，电泳参数同常规的电泳。如果使用百奥莱博五分钟核酸电泳液SuperBuffer-2，需要较高电压，详见该产品说明书。
4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。注意：不要使用波长为260nm或360nm的UV，否则检测灵敏度会降低。如果DNA或RNA浓度较高，还可以直接在日光下直接观察(需要将胶放在黑色背景下)，避免UV 对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。
 注：显色结果：在紫外下，DNA浓度非常高的时候是白色，浓度低的时候是绿色的，单链核酸有时是红色的。
5. 用配置了520-550nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。注意：不要使用与EB 兼容的红色滤光片(它能阻挡520-550nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片，效果会更好。
6.后续 Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。

使用方法之二：电泳后染色DNA
本方法是在电泳后对DNA进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。但该方法需要单独的染色处理，染料用量较大，不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用去离子水将DNAGREEN 稀释500倍后(100mL 水需要加0.2mL DNAGREEN)，将凝胶放入，室温下摇晃染色30分钟(对琼脂糖凝胶)或15分钟(对PAGE)。
3. 用水脱色 10-30分钟，具体时间需根据背景强弱决定，其余同方法一。
 注意：电泳后染色液可以反复使用次数。

疑难解答：
Q：本产品可否用于RNA染色？
A：可以，不论RNA是在甲醛变性胶中电泳，还是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE胶中电泳，RNA染色后在300nm下都跟DNA一样呈绿色。
Q：本产品是否可以加入上样液中进行染色？
A：不行，本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。
Q：为何前端(靠近正极)的DNA 条带很淡或根本看不见？
A：跟EB一样，电泳时DNAGREEN 朝负极方向移动，当前端的DNA(最小片段)进入没有DNAGREEN的区域时，已经结合的染料分子会逐渐从DNA分子上脱落，所以条带会变淡或根本看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色；之二是在每100mL电泳缓冲液中补加3-5μL染料。
Q：本产品在哪种缓冲液中效果最好？
A：DNAGREEN染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同，从弱到强的顺序是：
 SuperBuffer-2、TBE、TAE。在背景较强的缓冲液体中，可以适当降低染料的用量，比如100mL胶中加3-5μl。最佳浓度需要稍做摸索。
Q: 为何电泳后前面部分(靠近正极)的胶呈白色，后面的胶呈黑色？
A: DNAGREEN染料带正电，电泳时往上走，胶的黑色部分是染料上移后留下的无染料胶。
 本产品在TAE中背景最强，可参考上个问题答案更换电泳液以降低背景值。
Q：用SYBR染色的DNA在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象？
A：SYBR染料一般与DNA的小沟结合，但在常规电泳条件下该结合并不牢固，染料分子可以在标记的和未标记的DNA分子之间转移，使DNA分子的泳动速度时快(无染料结合时)时慢(有染料结合时)，发生条带模糊和扭曲现象。嵌入型染料(如EB和本产品)与DNA 结合牢固，则无此现象。
Q：核酸染料是否都有毒性？
A：核酸染料对动物和人的毒性由多方面决定。
 一是染料的膜通透性，EB 被归类为强诱变剂是由于其分子量较小，容易进入细胞内。而EB 二聚体Ethidium Homodimer(EthD)嵌入DNA的能力比EB 强上千倍，但毒性很小，就是由于其分子比EB大，不能透过细胞膜，所以毒性反而更低。SYBR 系列染料虽然低毒，但由于一般都溶于DMSO(因为容易水解，不能使用水溶液做溶剂)中，所以如果溅到皮肤表面，更容易进入皮肤。
 二是染料是否容易被人体降解。比如EB在体外就很难降解，一旦进入体内能在人体内残留的时间可能比较长，增加了毒性；而SYBR Green I等染料(也能以嵌入方式与DNA 结合)由于不稳定，比较容易自然降解，所以毒性自然较低。
 三是降解产物是否有毒性，比如用很多方法(如强碱法)降解EB 得到的产物有的比EB 毒性更大，而有的染料降解产物毒性却低很多，甚至无毒。
 四是染料进入细胞核以后是否能跟DNA 结合，很多实验结果显示即使EB染料也很难嵌入型到染色体中，因为染色体中的DNA 已经紧密地与各种组蛋白结合。
 五是细胞修复突变的能力，正常人体都有很强的修复突变的能力，如修复日光中UV 诱导的DNA突变。总之，一种DNA染料的毒性强弱是多种因素综合的结果。


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·溶壁酶干粉(破壁酶)
编号：BTN100932
英文名称：Lywallzyme,powder
规格：1g
本品是一种多种水解酶的混合物，它能分解真菌细胞壁葡聚糖等的多聚β(1-3)糖苷键，具有广谱性和高效性两大特点，可以用于核酸纯化和高效获得优质的原生质体，是真菌生物工程研究的重要工具酶。

单位定义：在25℃，pH为7.5的条件下，在3mL反应混合物中以悬浮酵母作为底物，每分钟ΔA800增加0.001的所需的酶量定义为一个酶活单位。
酶活性：2000 U/mg protein。
溶解性：溶于冷的灭菌水，参考浓度500U/mL。
适用范围：对大多数真菌都有较好的脱壁效果，对担子菌和子囊菌的效果最佳。其中有食用和药用真菌，如草菇、平菇、蘑菇、香菇、银耳和灵芝等，有工农业生产上的重要菌种，如产黄青霉、黑曲霉、酵母等，有研究遗传用的重要材料，如裂褶菌、粗糙脉孢菌、构槽曲霉等，都能用溶壁酶去壁，获得大量原生质体，分离的原生质体活性强，有再生能力。
用途：生化研究。能分解真菌细胞壁，可获得高产、优质的原生质体。该酶是真菌生物工程研究的有效工具酶。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·水样病毒沉淀剂
编号：BTN101118
英文名称：Water Sample Virus Precipitation Reagent
规格：10次
本品是一种多种水解酶的混合物，它能分解真菌细胞壁葡聚糖等的多聚β(1-3)糖苷键，具有广谱性和高效性两大特点，可以用于核酸纯化和高效获得优质的原生质体，是真菌生物工程研究的重要工具酶。

单位定义：在25℃，pH为7.5的条件下，在3mL反应混合物中以悬浮酵母作为底物，每分钟ΔA800增加0.001的所需的酶量定义为一个酶活单位。
酶活性：2000 U/mg protein。
溶解性：溶于冷的灭菌水，参考浓度500U/mL。
适用范围：对大多数真菌都有较好的脱壁效果，对担子菌和子囊菌的效果最佳。其中有食用和药用真菌，如草菇、平菇、蘑菇、香菇、银耳和灵芝等，有工农业生产上的重要菌种，如产黄青霉、黑曲霉、酵母等，有研究遗传用的重要材料，如裂褶菌、粗糙脉孢菌、构槽曲霉等，都能用溶壁酶去壁，获得大量原生质体，分离的原生质体活性强，有再生能力。
用途：生化研究。能分解真菌细胞壁，可获得高产、优质的原生质体。该酶是真菌生物工程研究的有效工具酶。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·农杆菌EHA101感受态细胞
编号：BTN161205
英文名称：E.coli EHA101 Rosetta Competent Cell
规格：10×100μL
 EHA101菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因，vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签：kan，赋予EHA101菌株卡那霉素抗性，适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。

 本公司生产的EHA101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。EHA101农杆菌的基因型是：C58(rifR)TipEHA101(pTiBo542 D T-DNA)(kanR)Nopaline。

产品组成：

 

成分	规格
EHA101 农杆菌感受态细胞	0.1ml×10
pKWGF2(10ng/uL)	10μl
说明书	1份

储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等。

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100μL感受态加1μg(体积不大于10μL)质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700μL无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2～3小时。
4. 6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB 平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有转化所用双元载体抗生素时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入双元载体抗生素，20μg/ml rif时，需28℃培养60小时；如果使用的平板含有50μg/ml rif 则需要28℃培养72-90小时)。

注意事项：
1、加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2、混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3、平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4、利福平浓度不应高于25μg/mL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan，若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

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