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- 详细信息
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- 库存:
大量
- 英文名:
Protease and phosphatase inhibitor cocktail for bacterial cell extracts, 50X
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
10ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM1066 | 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X) | 各10ml | 786.00元 |
细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于细菌蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂/氨基肽酶抑制剂,以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。
本蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物含11.5mM AEBSF, 1mM Bestatin, 0.15mM E64, 0.15mM Pepstatin A, 250mM sodium fluoride,50mM sodium pyrophosphate, 50mM β-glycerophosphate, 50mM sodium orthovanadate,分别配制在高纯度DMSO和超纯水中。EDTA为单独包装,以便选择性使用。如用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
本产品使用便捷,通常以1:50的比例分别把蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X)和0.05M EDTA加入裂解液中,即可用于细菌蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如,哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶,细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶,哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶,植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此联迈生物针对不同类型样品的蛋白提取,提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择,具体请参考附表1。
本产品可以有效抑制细菌提取物中的各种蛋白酶(如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等)和磷酸酶(如丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶等)。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂;EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂;氟化钠(sodium fluoride)是酸性磷酸酶可逆抑制剂;焦磷酸钠(sodium pyrophosphate)是丝氨酸/苏氨酸磷酸酶不可逆抑制剂;β-甘油磷酸(β-glycerophosphate)是丝氨酸/苏氨酸磷酸酶可逆抑制剂;正钒酸钠(sodium orthovanadate)是碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶可逆抑制剂。各种抑制剂的具体信息请参考附表2。
蛋白酶、磷酸酶和去乙酰化酶抑制剂混合物的比较和选择请见:
一个包装的本产品通常足够用于500ml裂解液的配制。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM1066-1 | 蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X) | 10ml |
| LM1066-2 | 磷酸酶抑制剂混合物(50X) | 10ml |
| LM1066-3 | 0.05M EDTA, pH 8.0 | 10ml |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。
本产品提供了独立包装的EDTA,可以选择性使用。例如,后续用于检测提取液中金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
本产品中含有的蛋白酶和磷酸酶抑制剂对人体有害,请注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验DNA Extraction ・ DNA Extraction from Bacteria (Julie B. Wolf,UMBC) Phenol/chloroform method ・ DNA Extraction From Bacteria (Triton Method) (NWFSC) Isolation of Chromosomal DNA from Bacteria
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问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。 答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
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