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沉淀型TMB显色试剂盒现货促销

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  • ¥190 - 2420
  • 百奥莱博
  • BTN101106-HMR
  • 北京
  • 2025年07月16日
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      338

    • 英文名

      Precipitated TMB Chromogenic Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输,4℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应沉淀型TMB显色试剂盒现货促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:沉淀型TMB显色试剂盒现货促销
    编号:BTN101106
    英文名:Precipitated TMB Chromogenic Kit
    产地:国产|进口
    规格:100mL
    品牌:百奥莱博
    TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。

    产品特点:
    1.相对于DAB来说,灵敏度高。
    2.色泽稳定,无须避光显色。
    3.色带为蓝色,便于观察。
    4.无毒环保,可以放心使用。

    产品组成:

     
    成分 规格
    溶液A 100ml
    溶液B 100ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、免疫印迹染色
    1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
    4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
    5.空气中晾干。
    6.拍照记录。

    二、免疫化学染色
    1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
    4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
    5.小心移去切片上显色工作液。
    6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
    7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
    8.放上盖玻片或封片。
    9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
    10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。

    注意事项:
    1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
    2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
    3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能永久存在。
    4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
    5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。

    疑难解答:
    Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
    A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
    Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
    A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
    Q:如何降低背景读数?
    A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。

    关于沉淀型TMB显色试剂盒现货促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·Sulfolobus DNA聚合酶IV
    编号:BTN131182
    英文名称:Sulfolobus DNA Polymerase IV
    规格:100U
    Sulfolobus DNA聚合酶IV是一种热稳定的Y家族DNA聚合酶,能在复制过程中绕过DNA损伤,因而能以多种损伤DNA为模板合成DNA。

    产品特点:
    1.以损伤DNA为模板合成DNA。
    2.DNA修复。

    产品组成:
    成份 规格
    Sulfolobus DNA聚合酶IV(2000U/mL) 50μL
    10×Buffer 1.5mL
    使用手册 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·dCTP溶液(100mM)
    编号:BTN130917
    英文名称:dCTP Solution(100mM)
    规格:0.5mL
    本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

    dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。


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    ·96孔板质粒DNA提取试剂盒(真空法)
    编号:BTN130994
    英文名称:Plasmid DNA extraction kit(96-well plates)(Vacuum method)
    规格:1次

    ·Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉)
    编号:BTN81226
    英文名称:Tricine SDS-PAGE Anode Buffer
    规格:10L
    本产品为干粉型Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液,加水配制后即可直接使用,非常方便。

    储存条件:常温运输和保存,有效期两年。

    ·链激酶
    编号:BTN131183
    英文名称:Streptokinase
    规格:10kU
    链激酶,又名溶栓酶,是由β-溶血性链球菌产生的一种酶。其能与血浆纤溶酶原结合成复合物,使其暴露活性部位,催化纤溶酶原转化为纤溶酶,使血栓溶解。但不能溶解形成已久且已机化的血栓。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·Southern专用DNA Marker(DIG标记)
    编号:BTN120654B
    英文名称:Southern DNA Marker(Labeled by DIG)
    规格:20次
    本产品是用DIG标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。

    产品特点:
    1. 即开即用,非常方便。
    2. 每个DNA片段显色强度均匀。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
    2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
    3. 按常规方法电泳。
    4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
    5.转膜。
    6. 按常规的方法杂交和检测DIG的方法检测。


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    ·柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)
    编号:BTN80803
    英文名称:Animal mitochondrial DNA column extraction kit(PCR Grade)
    规格:50次
    线粒体DNA(mtDNA)是进行分子进化研究和母性遗传研究的重要材料,但传统的两步式mtDNA提取方法是先温和裂解细胞,分离线粒体,然后再从线粒体中提取mtDNA。此方法中的温和裂解细胞的条件十分难以控制,需要针对不同组织材料单独进行优化。本试剂盒克服了上述缺点。

    产品特点:
    1. 不需要单独纯化线粒体,柱式法纯化,操作简单快捷。
    2. 得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。
    3. 每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。
    4. 注意:本产品只适合于动物材料,不适合于植物材料,因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。

    产品组成:
    成分 规格
    溶液A 13ml
    溶液B 13ml
    溶液C 18ml
    离心吸附柱 50套
    通用洗柱液 50ml
    DNA洗脱液 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,短期可以在室温放置;长期保存最好放4℃。

    使用方法:

    一:培养细胞预处理
    1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。
    2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。
    二:组织细胞预处理
    3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小最好),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:最好不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。
    三:血液预处理
    4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。
    5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。
    四:mtDNA提取
    5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。
    6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。
    7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。
    8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。
    9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。
    10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。
    11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。
    12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。
     注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
    13. 重复上步1次。
    14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
    15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
    16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。
    17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。
    18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。
    19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。



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