北京真菌RNA提取试剂盒价格

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北京真菌RNA提取试剂盒价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多真菌RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京真菌RNA提取试剂盒价格
英文名：Fungal large-scale extraction kit
编号：BTN60305
产地：国产|进口
规格：50次
品牌：百奥莱博
本试剂盒专门用于从常见的各种真菌和革兰氏阳性细菌中快速提取总RNA，提取过的真菌包括Candida albican，Saccharomyces cerevisiae，Schizosaccharomyces pombe和Pichia pastoris、Aspergillus flavus等。

试剂盒特点：
1. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
2. RNA产量高，一般在20-70μg/mL 酵母培养物(约2.0×107个细胞)
3. 操作简单，整个过程只需要约30分钟。
4. 最大处理量为10mL 酵母。
5. 固体培养基上的真菌菌落也可以直接用于提取。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	20ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mg左右的干菌丝(或100mg左右的鲜菌丝、或适当数量的真菌菌落或革兰氏阳性细菌)转移到1.5mL塑料离心管中。如果是液体真菌培养物，则直接将1-10mL液体真菌在1.5mL塑料离心管中12000～15000g离心 1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.4mL溶液A并充分吹打混匀。如果A溶液存放时产生沉淀，请置于65℃融化，用前充分摇晃均匀。
3. 加入0.4mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。
5.室温 12000～15000g离心3～5分钟，转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中.
6. 再加入0.1mL溶液B和0.1mL自备*仿，振荡混匀30秒。
7.室温 12000～15000g离心3～5分钟，转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入两倍体积(约0.8-1mL)的溶液C，充分混匀。
9.室温 12000～15000g离心离心3-10分钟，RNA 将在管底形成沉淀，小心弃上清。
10. 加自备的75%乙醇，振荡器上振荡混均30秒。
11.室温 12000～15000g离心1分钟。
12.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
13. 重复 75%乙醇洗涤步骤一次。
14. 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留液(约50μL)。
15. 短暂放1-2分钟后加入100μl左右的RNA-free 水使RNA沉淀溶解，可以立即使用或存放于-80℃长期保存。
16. RNA 完整性的电泳检测：
 如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA 两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9:558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以最好不要使用。尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳，因为TBE 所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应，形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物，使同样长度的RNA 具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA 络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反应，使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂，所以TBE 对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，最好是避免使用。
17. RNA产量产率测定：
 将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%。
18. RNA 纯度测定：
 无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3 之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNA Scavenger和PS Scavenger 去除。

疑难解答：
Q：为何从酵母中提取的总RNA 有3 条小带？
A：它们分别是70bp左右的tRNA，120bp左右的5 S RNA，160bp左右的5.8 S RNA。
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA/变性。使用百奥莱博优化的上样变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA
在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。

北京真菌RNA提取试剂盒价格正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
编号：BTN51101
英文名称：Tranzol
规格：20次
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验，使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备，保存和运输等繁琐的事情而操心，大大地缩短了基因克隆实验的时间，提高使用者的工作效率。

产品特点：
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1，B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM，pET和Clion系列等。
4.转化效率适中，使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作，整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行，最短可以在三十分钟内完成，不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好，本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
 

成分	规格
常态转化液	1ml
阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL	5T
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB)，每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中，用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液，则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时，可以提高转化效率一倍，但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基)，离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心，用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出，否则残留培养基将会严重影响转化效率，故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀；在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体，也可以使用常用的pGEM，pUC，pBR322等质粒)；在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照，如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时)，然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液，混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上，剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养，阴性对照盘上不应有任何落菌，否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素，100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。

使用效果：

左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。


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*化*溶液(无菌)  1mol/L|2.5mol/L 500ml
ARB13588 兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)elisa检测操作说明书 Rabbit fibrinogen degradation product,fdp ELISA KIT
BTN130860 φX174 RFⅠDNA φX174 RFⅠDNA
PY02-348  脑心浸液培养基  100克  
ARB11722 人游离三碘甲状腺原*酸(Free-T3)代做ELISA实验 Human free tri-iodothyronine indes,free-t3 ELISA KIT
中性树胶 β-DPN
ARB11581 人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)血清中含量检测 Human tissue inhibitor of metal protease 1,timp-1 ELISA KIT
多聚甲醛-戊二醛混合固定液(2%/2.5%)   500ml
F020221 兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)
ARB13819 豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)elisa检测 Guinea pig matrix metalloproteinase 9,mmp-9 ELISA KIT
酵母基因组提取试剂盒 
ARB11517 人胸腺基质淋巴生成素(TSLP)elisa检测操作说明书 Human tslp   ELISA KIT
BTN61203 高GC DNA清除剂,PCR级 High GC DNA Erasol
1,2-茚满二酮 Brilliant green 16214-27-0
ARB10606 人血红素氧化酶1(HO-1)代做ELISA实验 Human heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
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·*化乙锭清除剂(EB清除剂)
编号：BTN3092
英文名称：EB scavenger
规格：100次
本品通过与*化乙锭(EB)分子中的*基反应和断开EB分子中的含氮杂环而有效破坏EB的分子结构，达到去除EB污染的目的，适用于清除溶液和物体表面污染的EB。

产品特点：
1. 能消除EB的荧光，并使其致突变性降低99%以上。
2.适用范围广泛，可用于含EB污染的水、*化铯溶液、电泳缓冲液(TAE、TBE、MOPS等)、有机溶剂(乙醇、异丙醇、异戊醇、异丁醇等)和受污染的多种物体表面(玻璃、不锈钢、塑料、地板、紫外滤光片等)。
3. 使用简单、方便、迅速。
4. 无色或浅黄色透明液体、无毒但有腐蚀性和刺激性气味。
5. 本品暴露于空气中的时间不宜过长，使用完毕请立即密封、保存于避光、通风处。

产品组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	200ml
说明书	1份

储存条件：室温保存及运输，有效期一年。

使用方法：

一：清除水溶性溶液(如水、Tris、MOPS、*化铯等)中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于0.5mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液A:溶液B:被污染溶液=1:2:100的比例将溶液A和溶液B先后加入到溶液中(由于溶液混合初期会产生少量有害气体，所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 搅拌五分钟，室温静置20小时。
4. 用自备的饱和碳酸**溶液中和使其pH变为中性。
5. 检查清除程度。
6. 弃废液。
二：清除*化铯饱和的异丙醇中的EB
1. 用水将*化铯饱和的异丙醇溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按*化铯饱和的异丙醇溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五)，室温搅拌20小时。
3. 用自备的饱和碳酸**溶液中和，使溶液pH为中性。
4. 倒弃废液。
三：清除异戊醇和丁醇中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五)，溶液分成两相，室温搅拌72小时。
3. 2克活性炭/100mL混合液的比例加入自备活性炭，再搅拌30分钟。
4. 过滤去活性炭。
5. 用饱和碳酸**中和液体混合液体使pH变为中性。
6. 倒弃废液。
四：清除物体表面的EB
1. 用浸泡过新鲜EB Scavenger工作液(配制方法见五)的纸巾擦洗物体表面污染处5次，每次更换新的纸巾。由于工作液pH为1.8，如果物体表面不耐酸(如玻璃、不锈钢、地板等)，直接进入第二步操作。但一般紫外透射滤光片可以直接用工作液处理。
2. 再用浸泡过水的纸巾擦洗物体表面污染处5次，每次更换新的纸巾。
3. 用紫外灯检查清洁效果，如果看不见EB荧光,可以进行下一步操作。如果还有可见的EB荧光,则重复第二步。(对不便于直接用紫外灯照射的污染处，可以将所用的纸巾中的溶液挤出，放置在紫外灯下比较荧光的强弱，一般荧光会逐渐变弱)。
4. 风干清洁过的物体表面。
5. 将用过的纸巾浸泡在EB Scavenger工作液中，静置至少一小时降解EB。
6. 丢弃纸巾。
7. 用自备的饱和碳酸**溶液中和工作液,使其pH为中性。
8. 倒弃废液。
五：新鲜EB Scavenger工作液的配制
1. 估计工作液的用量。
2. 按溶液A:溶液B:水=1:2:30的比例在化学通风橱中先后将水，溶液A和溶液B加入到大小合适的容器中室温搅拌10分钟混匀(由于配制时会产生少量有害气体，所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 立即按上面的各种情况使用新鲜配制的工作液。使用者需戴手套，溅到皮肤上后立即用自来水冲洗。

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