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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
939
- 英文名:
SABC(Goat IgG)-POD Kit
- 保质期:
一周
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)现货,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)现货
英文名:SABC(Goat IgG)-POD Kit
产地:国产|进口
编号:QN1225
规格:100T-200T
本试剂盒适合于一抗为山羊IgG的免疫组化实验,DAB显色。
试剂盒组份:
封闭液(5% BSA)————————10ml
3% H2O2-———————————10ml
Bio-兔抗山羊IgG浓缩液-————100ul
SABC-POD浓缩液————————100ul
稀释液————————————30ml
20×DAB显色液A————————1ml
20×DAB显色液B————————1ml
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
操作步骤:(以石蜡切片为例)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾 后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃孵育1小时左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
6. 根据用量,用稀释液将Bio-兔抗山羊IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-兔抗山羊IgG浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-兔抗山羊IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。
7. 根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
8. DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9. 苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟,PBS漂洗两次,3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,接上述第4步。
对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
关于SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·大豆异黄酮80%
编号:QN0227
英文名称:Soy Isoflavones
规格:25g
纯度:80%
·全蛋白提取试剂盒(强)
编号:QN1069
英文名称:Soy Isoflavones
规格:50T|100T
全蛋白提取试剂盒(强)用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4℃12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
悬浮细胞:4℃400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃12000g离心30min;
将上清移入新的EP管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
注意事项:
实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解;
储存条件 :-20℃
SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)现货关键词:QN1225,SABC(Goat IgG)-POD Kit,SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)
·X-gal(20mg/ml)
编号:QN1049
规格:5ml
IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶*基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α 互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。此产品为X-gal用DMF溶解过滤后配成的无菌溶液。
储存条件:-20℃
·果胶酶
编号:QN0471
英文名称:Pectinase
规格:1g
本品常用于植物细胞杂交和花药培养,促进果胶水解为蔗糖和半乳糖醛酸等研究领域。
别名:粘胶质酶;Macerozyme R-10;Polygalacturonase
CAS号:9032-75-1
储存条件:2~8℃
酶活:40u/mg
性状:灰黄色粉末
·DiI标记低密度脂蛋白
编号:QN0292
英文名称:DiI-LDL
规格:500μg
本品来源于人,仅供科研实验使用。
浓度:1.0mg/ml
储存条件 :2~8℃避光保存,请勿冷冻。
·热启动Taq DNA Polymerase
编号:QN0871
英文名称:Hot Start Taq DNA Polymerase
规格:500U|1000U
Hot Start Taq DNA Polymerase品是抗Taq单克隆抗体修饰的热启动Taq DNA Polymerase,高温加热前抗Taq单克隆抗体与 Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性,因此无需特殊失活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。在qPCR反应中,能明显提高荧光PCR的扩增效率(尤其对低拷贝数模板),改善其扩增曲线的完美度,其稳定性好、可重复性高、特异性强。此酶室温放置一周,酶活性仍可保持95%以上。
活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE检测Taq DNA Polymerase纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:20mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mM EDTA;1 mM DTT;100 mM KCl;50% glycerol;稳定剂
适用范围:用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。
建议PCR条件:预变性温度是95度,时间为5-10分钟,其它的和普通Taq酶的反应条件一样。
PCR体系(以50μl反应体系为例)
Template———————————<0.5μg
上游引物(10μM)————————1μl
下游引物(10μM)————————1μl
10×Buffer(含Mg2+)——————5μl
dNTP(各2.5mM)—————————4μl
热启动Taq酶——————————0.5-1μl
ddH2O—————————————up to 50μl
储存条件:-20℃保存, 有效期至少一年
SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)现货关键词:QN1225,SABC(Goat IgG)-POD Kit,SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色)
ARB14062 鲑鱼降*素(SCT)含量检测 Salmon calcitonin,sct ELISA KIT
F030624 FITC标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*FITC
001000 胎牛血清 100ml|500ml
3767-28-0 PNPG 对硝基*(代"*")基-α-D-吡喃半乳糖苷
3-叔丁基*(代"*")酚 L(-)-Pipecolinic acid 585-34-2
BL1355 预染超低分子量蛋白MARKER
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比吸光度比色法) 120T
N-*甲酰-L-酪*酰乙酯 D-Panthenol 3483-82-7
顺丁烯二酸* DL-Cysteine HC1 3105-55-3
TBS缓冲液(0.02mol/L,pH8.2) 500ml
PY04-035 *啶酮酸(II) 10mg/支×10支 每支添加于225ml胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)培养基中,用于单增李氏菌增菌肉汤(EB)的配制,也可用于李斯特氏菌的培养
L-酪*酸乙酯 TMAB 949-67-7
CYB166008-D 兔抗豚鼠IgG-GOLD
兔抗GAPDH多克隆IgG抗体 0.1ml
ARB10241 人一氧化碳血红蛋白(HbCO)免费代测 Human carboxyhemoglobin,hbco ELISA KIT
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文献和实验>>>显色剂 货号 品名 规格 价格 备注 C1501 DAB染色
>>>显色剂 货号 品名 规格 价格 备注 C1501 DAB染色
步,才能找到解决办法。8、SABC染色(37℃):这是博士德的人性化之处,直接就可以用。9、DAB显色镜下控时:DAB浓度应该比推荐的要低一些,这样可以便于控制反应时间以及在合适的时候中止反应。同时注意,使用后残余的DAB应妥善处理,而不是随便倒入下水道,因为它可能有致癌性。10、苏木素轻度复染:不建议使用。尽管复染后标本层次分明,但实际情况是,这样有时也会掩盖阳性结果,从而使前功尽弃。11、脱水透明:脱水乙醇的浓度由低到高,有一个较准确判断脱水成功与否的办法是:观察透明后盛二甲苯容器的壁,若发现白色雾状
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