58-58-2型嘌呤霉素试剂报价

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百奥莱博专业生产供应58-58-2型嘌呤霉素试剂报价，我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂，同时价格极具竞争力，满心期待您的咨询订购。

名称：58-58-2型嘌呤霉素试剂报价
品牌：百奥莱博
规格：25mg|100mg
英文名：Puromycin
编号：QN0078
产地：国产|进口
本品是蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
储存条件：-20℃
纯度：≥98%(TLC)
性状：白色或白中带有黄色的粉末
别名：二盐*(代"酸")嘌呤霉素;嘌呤霉素盐*(代"酸")盐
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是*酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

使用方法：

1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。

2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。

3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2：
a)准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL，至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。

4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后，将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。

除58-58-2型嘌呤霉素试剂报价外，我公司正在打折促销以下产品：
2-脱氧-D-葡萄糖 Boc-L-aspartic acid 4-benzyl ester 154-17-6
ARB11456 人特异性免疫球蛋白E(sIgE)酶联免疫定量检测 Human specific immunoglobulin e,sige ELISA KIT
ARB10812 人抗存活素抗体/生存蛋白(Surv)检测服务 Human anti-survivin antibody,surv ELISA KIT
碳酸铈 HEPPSO sodiu*(代"m") salt 54451-25-1
BTN131008 RIPA裂解液(弱) RIPA Lysis Buffer(W)
ARB10193 人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA代测服务 Human α-glutathione s-transferases,α-gst ELISA KIT
ARB12776 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)elisa检测操作说明书 Mouse toll-like receptor 9,tlr-9 ELISA KIT
ARB12765 小鼠L选择素(L-SelectIn/CD62L)Elisa定量检测 Mouse l-selectin ELISA KIT
ARB12583 大鼠烟*(代"碱")型乙酰胆碱受体(N-AChR)代做ELISA实验 Rat nicotinic acetylcholine receptor,n-achr ELISA KIT
ARB12020 大鼠α葡萄糖苷酶(A-Glu)含量检测 Rat α-glucosidase,a-glu ELISA KIT
BL0840 羊抗人C3纯化抗体
过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)   2×10ml|2×20ml
二乙基二硫代*基甲*(代"酸")* Cholesterol 20624-25-3
58-58-2型嘌呤霉素试剂报价关键词：嘌呤霉素试剂,二盐*(代"酸")嘌呤霉素,嘌呤霉素盐*(代"酸")盐


·2-*基乙酯
编号：QN0795
英文名称：Naphthalen-2-yl acetate
规格：5g
别名：乙酸-2-*酯
CAS号：1523-11-1
分子式：C12H10O2
分子量：186.2066
储存条件：常温干燥

·乙*(代"烯")利(液体)
编号：QN0238
英文名称：Ethrel
规格：25g
本品乙*(代"烯")利是一种有机化合物，易溶于水，甲醇、丙*(代"酮")、乙二醇、丙二醇，微溶于甲*，不溶于石油醚。用作农用植物生长刺激剂。 乙*(代"烯")利是优质高效植物生长调节剂,具有促进果实成熟，刺激伤流，调节性别转化等效应。

别名：乙*(代"烯")磷;ethephon
CAS号：16672-87-0
分子式：C2H6ClO3P
分子量：144.49
储存条件：2～8℃
性状：白色针状结晶
熔点：70～72℃(lit.)
溶解性：溶于水、醇、丙*(代"酮")，参考浓度100mg/ml。

注意事项:
(1)用于细胞实验，溶解后，须用一次性针头滤器过滤除菌。
(2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

·酪*酸酶
编号：QN0458
英文名称：Tyrosinase
规格：25KU|100KU
酪*酸酶可催化含酚基化合物(如酪*酸、酚类化合物等)氧化成醌的酶。此类酶广泛存在于自然界，植物中分布很广，如马铃薯、茶叶、漆树乳汁中含量相当高。高等动物的皮肤、毛发、角膜中的黑色素也是由于此酶氧化酪*酸所生成的产物。蘑菇等菌类及其他微生物中也产生此类酶。通常从野蘑菇中提取，系生物催化剂之一，含有铜离子的蛋白质。等电点<5.0;含氮量约13.6％。含铜量约0.25％。紫外吸收峰在273nm和330nm处。酪*酸酶常用于催化酪*酸氧化成多巴和多巴进一步氧化成能产生黑色素的前体物——多巴醌。

别名：陈干酪酵素,酥*基酸酶;多聚*酚氧化酶;儿茶酚氧化酶;多酚氧化酶
CAS号：9002-10-2
分子量：128KDa
储存条件：−20℃
酶活：≥500units/mg protein
性状：粉末
最适温度：25℃
最适pH：6.0～7.0

活力定义：在含有L-二羟*丙*酸或儿茶酚和L-抗坏血酸的3ml反应混合液中，在pH值6.5，25℃时，每1min内ΔA265变化为0.001为一个酶活单位。


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  嘌呤霉素试剂如何储存？
化学试剂的变质，大多数情况是因为受外界条件的影响，如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等，都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告，并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下，一般化学试剂贮有不宜超过2年，基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰，所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂，必须另设专用容器回收或贮存，具有吸潮性或易氧化，易变质的化学试试剂必须密封保存，避免吸湿解，氧化或变质。 定期盘点，核对出现差错应及时检查原因，并报主管领导或部门处理。



·DAB法显色试剂盒(山羊IgG)
编号：QN1160
英文名称：Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗山羊IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。



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