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冷藏
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长期
- 英文名:
Bucladesine
- 库存:
299
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- CAS号:
16980-89-5
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应布拉地新*盐 生化试剂,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:布拉地新*盐 生化试剂
英文名:Bucladesine
规格:25mg
编号:QN0576
品牌:百奥莱博
别名:二丁酰环磷腺甙
CAS号:16980-89-5
分子式:C18H23N5NaO8P
分子量:491.37
布拉地新*盐 生化试剂极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
PY02-351 亚硫*(代"酸")铁琼脂 250克
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001008 兔血清 100ml|500ml
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6106-21-4 Succinic acid Sidium 琥珀酸*
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布拉地新*盐 生化试剂关键词:布拉地新*盐,二丁酰环磷腺甙,16980-89-5
·直链淀粉
编号:QN0199
英文名称:Amylose
规格:250mg
本品常用作α-淀粉酶底物。
CAS号:9005-82-7
分子式:(C6H10O5)n
储存条件:室温干燥保存
性状:白色或类白色粉末
类型:Type III
杂质:支链淀粉,essentially free ≤10% 丁醇
溶解性:溶于0.05M NaOH,参考浓度1mg/ml
·潮霉素B
编号:QN0095
英文名称:Hygromycin B
规格:1g
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml),可直接用培养液稀释使用。
CAS:31282-04-9
分子式:C20H37N3O13
分子量:527.52
储存条件:2~8℃
性状:澄清或轻微浑浊黄色溶液
大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
| 终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
布拉地新*盐 生化试剂关键词:布拉地新*盐,二丁酰环磷腺甙,16980-89-5
我公司立足北京,辐射全国。随着产品战略的不断延伸,产品理念的不断完善,百奥莱博将逐步成长为一流的生化试剂供应商,并一如既往的为您提供优质的布拉地新*盐和完善的售后服务,与您一起携手整合各自的优势资源,竭尽全力支持您的事业,为中国生命科学的发展贡献一份力量。
·SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(AP显色)
编号:QN1228
英文名称:SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
规格:100T-200T
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验,采用AP显色。
试剂盒组成:
封闭液(5%BSA)—————————10ml
Bio-羊抗兔IgG浓缩液——————100ul
SABC-AP浓缩液—————————100ul
稀释液-————————————30ml
1×AP反应缓冲液————————30ml
25×BCIP-———————————1ml
25×NBT————————————1ml
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
实验步骤:(以石蜡切片为例,仅作参考)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 可选步聚:
a、热修复抗原
b、酶消化
c、跳过此步,直接进入下一步。
3. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体,不洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。具体稀释度和孵育时间参考一抗生产厂家说明书。)
5. 根据用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4) 洗2分钟×3次。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-AP浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-AP浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-AP工作液,20-37℃,30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.根据用量,1ml AP缓冲液中加入40ul NBT溶液,混匀后再加入40ul BCIP溶液。此工作液现用现配。室温显色, 镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤终止反应。
**对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。**
注意事项:
1、如果染色背景过高,在SABC反应之后,AP显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后AP显色。
2、因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
我公司坚持“品质至上”, 通过与国际知名品牌的合作,选择高品质的产品,提供优质的客户服务。布拉地新*盐现货供应,以保证产品质量和市场需求率为主要目标,争取能在科研生命道路上能够长久的服务于广大新老客户。
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文献和实验化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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