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- 详细信息
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273
- 英文名:
SABC(Rabbit IgG)-FITC(POD) Kit
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一周
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家
编号:QN1219
品牌:百奥莱博
规格:100T-200T
产地:国产|进口
英文名:SABC(Rabbit IgG)-FITC(POD) Kit
本试剂盒适合于一抗为兔IgG来源的免疫组化实验,提供DAB及FITC两种显色方式。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶与FITC将保证SABC具有很高的敏感性。
试剂盒组分:
封闭液(5% BSA)———————————10ml
生物素标记羊抗兔IgG浓缩液-——————100ul
SABC-FITC浓缩液-———————————100ul
SABC-POD浓缩液————————————100ul
稀释液————————————————30ml
20×DAB显色液A————————————1ml
20×DAB显色液B————————————1ml
抗荧光衰减封片剂———————————10ml
操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)
1、切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2、热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3、滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4、用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37℃ 1小时孵育左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5、根据使用量,用稀释液将bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 处理30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。如果用荧光观察,请接步骤6、7,如果用DAB显色,请直接转至步骤8。
6、根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
7、滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
8、根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
9、DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B ,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10、苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞爬片:常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果用FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片:固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:
1、如果用DAB染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01-0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
2、如果用FITC观察背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗涤2次,然后封片观察。
3、因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
关于SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·2×蛋白上样缓冲液(含DTT)
编号:QN1108
英文名称:SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)
规格:10ml
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,*酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的*键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用方法:
1.请按每20微升蛋白样品加入20微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2.混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3.冷却至室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项:
1.聚丙*(代"烯")酰胺凝胶浓度为8%时*酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度12%时,约在20kd左右,胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2.本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有*酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
储存条件:-20℃
SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家关键词:QN1219,SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色),SABC(Rabbit IgG)-FITC(POD) Kit
·革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒
编号:QN0902
英文名称:Gram-positive Bacterium Plasmid Extraction Mini Kit
规格:50T|100T
本试剂盒使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的 RNaseA 全部加入),混匀,置于 2~8℃保存。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
储存条件:室温,有效期一年,RNA酶,溶菌酶于-20℃保存。
·D-半乳糖醛酸
编号:QN0182
英文名称:D-(+)-Galacturonic acid monohydrate
规格:1g|5g
别名:右旋水解乳糖醛酸
CAS号:91510-62-2
分子式:C6H10O7·H2O
分子量:212.15
储存条件:室温干燥保存
纯度:≥97.0%(T)
性状:白色针状结晶
·鸟苷
编号:QN0554
英文名称:Guanosine
规格:10g
本品常用于制造无环鸟苷、三氧唑核苷等。
别名:鸟嘌呤核苷
CAS号:118-00-3
分子式:C10H13N5O5
分子量:283.24
熔点:250℃
性状:白色或类白结晶性粉末
纯度:≥98%
·6-*基正己酸
编号:QN0264
英文名称:6-Aminocaproic acid
规格:25g|100g
CAS号:60-32-2
·葡聚糖T-40
编号:QN0151
英文名称:Dextran T-40
规格:10g
CAS号:17-0270-01
分子量:40000
储存条件:RT
·柠檬酸
编号:QN0133
英文名称:Anhydrous Citric acid
规格:100g
柠檬酸是一种重要的有机酸,又名枸橼酸,无色晶体,常含一分子结晶水,无臭,有很强的酸味,易溶于水。其*盐在冷水中比热水中易溶解,此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。在工业,食品业,化妆业等具有极多的用途。
别名:无水枸橼酸
CAS号:77-92-9
分子式:C6H8O7
分子量:192.12
储存条件:室温干燥保存
性状:单斜全对称形结晶
SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家关键词:QN1219,SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色),SABC(Rabbit IgG)-FITC(POD) Kit
F030424 胶体金标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*GOLD
SJ0856 脱纤维绵羊血
2,1,3-*并噻二唑 DEP 273-13-2
ARB13310 口蹄疫非结构蛋白3AB抗体免费代测
幽门螺旋杆菌染色液(亚甲蓝法) 100ml
DP115 N96快速质粒提取试剂盒
F030232 HRP标记小鼠抗猪IgG抗体 HRP*Monoclonal Mouse Anti-Pig IgG
细胞裂解液 Cell lysis solution 50ml|100ml
DNA Marker(300-5000bp) 100次
ARB11270 人骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)elisa检测 Human osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
Tris缓冲盐溶液(10×TBS,pH7.5) 500ml
HC0023 96孔PCR板(半裙边)
我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品,热情期待您的咨询选购SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC荧光/DAB显色)厂家。
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文献和实验两者所用的显色系统也不同。SP法与SAP法的其他染色步骤同SABC法。 Envision TM SVStemS 该法是近几年在国内推广使用的一种方法,它的原理是将多个抗鼠和抗兔IgG分子与辣根过氧化物酶结合形成聚合物。以代替传统方法的二抗和三抗,直接与特异性第一抗体结合,从而放大了抗原抗体结合的信号,使检测变得简单而且敏感性增加。经DAB显色即可完成染色,其他染色步骤与SABC法相同。 Envision TM SVStemS原理示意图
步,才能找到解决办法。8、SABC染色(37℃):这是博士德的人性化之处,直接就可以用。9、DAB显色镜下控时:DAB浓度应该比推荐的要低一些,这样可以便于控制反应时间以及在合适的时候中止反应。同时注意,使用后残余的DAB应妥善处理,而不是随便倒入下水道,因为它可能有致癌性。10、苏木素轻度复染:不建议使用。尽管复染后标本层次分明,但实际情况是,这样有时也会掩盖阳性结果,从而使前功尽弃。11、脱水透明:脱水乙醇的浓度由低到高,有一个较准确判断脱水成功与否的办法是:观察透明后盛二甲苯容器的壁,若发现白色雾状
免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种以抗原抗体特异性反应为基础,对组织或细胞中特定抗原(通常是蛋白质)的定性和定位分析的实验方法。免疫组化可以在微观层面上反映出疾病过程中细胞内蛋白质的表达变化,对于病理诊断和研究具有重要价值。通常,根据显色剂(酶、荧光素、同位素、 金属离子等)与样品类型的不同,将免疫组化作以下分类。 图 1 免疫组化病理分类 IHC/ICC(统称为免疫组化)是指通过酶标记物在组织、细胞原位通过抗原抗体反应和化学的显色反应,对特定抗原进行定性和定
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