BTN131134型Percoll批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN131134型Percoll批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN131134型Percoll批发
品牌：百奥莱博
编号：BTN131134
规格：250mL
Percoll是一种常用的低粘度的密度梯度介质，由直径在15-30nm的硅胶颗粒组成，颗粒外包被了聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮(PVP)，为化学惰性，不会影响细胞的活性。

产品特点：
1．Percoll渗透压很低(<20mosm/kg H2O)，粘度也很小，可形成高达1.3g／ml 密度。
2．采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。
3．离心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度，可用于分离各种悬浮的细胞、线粒体、叶绿体和病毒(可小到70S)。
4．由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
5．Percoll溶液高压灭菌，必须进行不添加盐或蔗糖。盐的存在会引起percoll糊化，蔗糖的存在会引起焦糖化。

储存条件：常温运输和保存，有效期五年(未开封状态)。

使用方法：
1．不同浓度(密度)Percoll溶液的制备：先用9 份Percoll与1份 8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。

 

Percoll浓度(％)	70	60	50	40	30	20
比重g/ml	1.090	1.077	1.067	1.056	1.043	1.031

2．不连续密度梯度Percoll层的制备：先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层Percoll 比重相差不大时，可将Percoll液放入注射器中，小针头斜面紧贴管壁，任其自然慢慢流下。
3．装样：样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异，一般加样体积不宜过大，细胞浓度也不可过高，否则会影响细胞的分离和回收。
4．离心：一般采用离心力为400g，时间20～25min。由于多层Percoll 之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
5．取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll 层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

分离纯化细胞举例
1．富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五种不同密度的Percoll,如用10ml 试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2～1.5ml，初步从外周血中分离的PBMC细胞1×10８悬于１ml培基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK 杀伤活性的LGL细胞位于42.5％与45％Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2．纯化淋巴母细胞和除去死细胞：分别叠加50％和30％Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者)，按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞；两层Percoll之间为淋巴母细胞，纯度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。

除BTN131134型Percoll批发外，我公司正在打折促销以下产品：
2-*基*并噻唑 Anisomycin 136-95-8
PC3901 2 x Real Time PCR Mix (Probe荧光探针法定量PCR)
HC0333 8道道雷勃彩色移液器(全彩)
ARB10811 人抗百日咳病毒(PT-Ab)检测服务 Human anti-pertussiu toxin,pt-ab ELISA KIT
ARB13006 小鼠抗核抗体(ANA)定量分析 Mouse anti-nuclear antibody,ana ELISA KIT
ARB10951 人谷胱甘肽硫转移酶pI基因(GSTpI)ELISA代测服务 Human glutathione s-transferases,gstpi ELISA KIT
ARB13863 猪生长激素(GH)血清中含量检测 Porcine growth hormone,gh ELISA KIT
ARB12335 大鼠卵巢癌标志物CA125Elisa定量检测 Rat ovarian cancer marker-ca125 ELISA KIT
尿苷 Lanolin 58-96-8
9007-34-5 Collgen TypeⅠ  胶原蛋白Ⅰ型
ARB12062 大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)含量检测 Rat macrophage-derived chemokine,mdc ELISA KIT
CYB163055 羊抗马IgG-FITC
乳酸脱*酶染色液(M型,四唑盐法)   2×50ml
BL1075 预染超低分子量蛋白MARKER
BL0816 HRP标记羊抗鸡IgG抗体
B0501 马血清(辐照灭菌)
胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒(羟胺*化铁微板法)   100T
罗丹明123 Maltotriose 62669-70-9
ARB11108 人乳头瘤病毒(HPV)Elisa方法检测 Human papillomavirus,hpv ELISA KIT
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·单细胞裂解液(DNA提取)
编号：BTN130803
英文名称：Single Cell Lysis Solution
规格：1mL
本产品为单细胞DNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定。纯化所得DNA可用于全基因组扩增(WGA)等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·Hoechst 33258干粉
编号：BTN130864
英文名称：Fluorescent Dye Hoechst 33258，Powder
规格：10mg
Hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光，其常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

CAS号：23491-45-4
分子式：C25H24N6O•3HCl
分子量：533.88

产品特点：
1．Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
2．Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
3．Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；其和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
4．Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/mL。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/mL。

储存条件：低温运输，-20℃干燥避光保存，有效期一年。

使用举例：
1．用PBS或合适的缓冲液制备10～50 µM Hoechst33258染料。
2．将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中。
3．在37℃培养细胞10～20分钟。
4．用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
5．用带有350nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。


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·大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞
编号：BTN140218
英文名称：E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
规格：10*100μl
本产品是采用大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因，对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用，特别适合用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。

产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达107，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. DB3.1感受态细胞具有链霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型：F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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