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DOP-PCR试剂盒哪里卖

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  • ¥150 - 1640
  • 百奥莱博
  • BTN111109-DOM
  • 北京
  • 2025年07月09日
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      800

    • 英文名

      Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输、-20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")DOP-PCR试剂盒哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:DOP-PCR试剂盒哪里卖
    英文名:Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
    规格:50次
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN111109
    产地:国产|进口
    DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR,是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。

    产品特点:
    1. 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
    2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
    3. 使用高保真酶,降低突变率。
    4. 长度在300-1700bp 之间,平均500bp左右。
    5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
    6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    DOP-PCR Magic Mix 750μl
    DOP-PCR引物(20pmol/μL) 250μL
    超纯水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输、-20℃保存,保存期限为12个月。不要反复冻融。

    使用方法:

    1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
    成分 阴性对照 样品
    DOP-PCR MagicMix 25μL 25μL
    基因组DNA模板(自备)或单个细胞 不加 10-100pg(或一个单个细胞)
    DOP-PCR引物(20 pmol/μL) 5μl 5μl
    补水到 50μl 50μl

    2. 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
    预变性 95℃ 5min
    第一轮PCR(12个循环) 94℃ 1min
    30℃ 1.5min
    72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟) 3min
    第二轮PCR(35个循环) 94℃ 1min
    62℃ 1min
    72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒) 2min
    延伸 72℃ 7min
      4℃ Forever

    3.结束后取5-10μl直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液),红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
    4. 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。

    我公司的DOP-PCR试剂盒哪里卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:

    ·Southern级植物DNA提取试剂盒
    编号:BTN130940
    英文名称:Plant DNA extraction kit(Southern Grade)
    规格:10次

    ·大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
    编号:BTN130560
    英文名称:E.coli Rosetta-gami (DE3)pLys Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
     Rosetta-gami(DE3)pLysS是Rosetta-gami(DE3)的的衍生菌株,用于具有毒性的含二硫键真核蛋白的表达。它是高度严紧表达宿主菌,包括Tunerlac 透性酶突变以及gor B/gor突变帮助细胞质内二硫键形成。

    基因型:Δ(ara–leu)7697 Δ lac X74 Δ phoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F"[lac+lacIq pro](DE3)gor522::Tn10(TcR)gorB::kan plysS pRARE(CmR)

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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    ·镍柱原位清洁试剂盒
    编号:BTN130507
    英文名称:Ni-Agarose Column In-Place Cleaning Kit
    规格:20次
    镍柱介质是分离纯化His标记蛋白的重要材料,但反复使用后非常容易污染杂蛋白,是对His标记蛋白的回收率越来越低。为此本公司开发了镍柱原位清洁试剂。

    产品特点:
    1.即开即用,不用单独准备各种溶液。
    2.原位清洁,直接在亲和层析柱中进行清洁,免去繁琐的装柱步骤。
    3.操作步骤简单,半小时即可完成。
    4.清洁的效果好,跟进口同类产品相当。
    5.可清除污染的离子型结合蛋白、沉淀蛋白、弱疏水性蛋白、脂蛋白、强疏水性蛋白和脂类。
    6.适用于各种镍柱介质(包括Ni-NTA或Ni-IDA)。

    产品组成:
    成分 规格
    溶液A 100ml
    溶液B 20ml
    溶液C 100ml
    溶液D 100ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存,有效期两年。

    自备试剂:去离子水。

    使用方法:
    如果镍柱介质污染了其他蛋白和杂质,需要按下列步骤再生;如果镍柱介质对His标记蛋白结合降低(蓝色越来越淡),则需要另购镍柱原位清洗试剂盒。

    1.去除镍柱中的离子型结合蛋白:用10倍介质体积的溶液A洗涤镍柱(对1mL的镍柱介质需要用10mL溶液A洗涤),再用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。
    2.去除镍柱中的沉淀蛋白、弱疏水性蛋白和脂蛋白:封堵住层析介质的下端出口,然后加入2倍介质体积的溶液B,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡2小时,再用10倍介质体积的溶液C洗涤镍柱介质,最后用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。
    3.去除镍柱中的强疏水性蛋白和脂类:封堵住层析介质的下端出口,然后加入10倍介质体积的溶液D,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡20分钟,再用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。


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    ·YPDG液体培养基
    编号:BTN130897
    英文名称:YPDG Liquid Medium
    规格:250mL
    YPDG培养基为YPD和YPG培养基的混合培养基。可用来区分+和-菌落。

    储存条件:常温运输及保存,有效期两年。


    ·酸洗玻璃珠(200μm)
    编号:BTN100307B
    英文名称:Acid-Washed Glassbeads(200μm)
    规格:10g
    本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分,主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子,因为用其他方法,包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。

    产品特点:
    1. 经过充分的酸洗,免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
    2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞,属于物理方法,不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好,同时不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
    3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间,非常快捷。注意:本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
    4.一次可以处理5mL的微生物样品。
    5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表:
    编号 玻璃珠直径 最适用途
    BTN100307A 100μm 作为超声破碎细菌时的添加物
    BTN100307B 200μm 破碎细菌
    BTN100307C 400μm 破碎酵母(如酿酒酵母)
    BTN100307D 800μm 破碎霉菌、孢子等


    储存条件:常温运输及保存,保存期为两年。

    使用方法:
    以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例:离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,,再加入0.5mL溶液B,震荡2分钟,2000rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱,用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。

    使用效果:
    酸洗玻璃珠使用效果
    图注:使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液,最后用50μl DNA洗脱液洗脱,5μl用于琼脂糖电泳。电压300V,电泳时间5分钟,染料为绿如蓝,缓冲液为SuperBuffer。



    北京百莱博科技有限公司专业生产基因结构和功能产品,欢迎来电咨询选购DOP-PCR试剂盒哪里卖

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