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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
800
- 英文名:
Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")DOP-PCR试剂盒哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:DOP-PCR试剂盒哪里卖
英文名:Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
规格:50次
品牌:百奥莱博
编号:BTN111109
产地:国产|进口
DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR,是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。
产品特点:
1. 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶,降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间,平均500bp左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| DOP-PCR Magic Mix | 750μl |
| DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,保存期限为12个月。不要反复冻融。
使用方法:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
| 成分 | 阴性对照 | 样品 |
| DOP-PCR MagicMix | 25μL | 25μL |
| 基因组DNA模板(自备)或单个细胞 | 不加 | 10-100pg(或一个单个细胞) |
| DOP-PCR引物(20 pmol/μL) | 5μl | 5μl |
| 补水到 | 50μl | 50μl |
2. 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| 第一轮PCR(12个循环) | 94℃ | 1min |
| 30℃ | 1.5min | |
| 72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟) | 3min | |
| 第二轮PCR(35个循环) | 94℃ | 1min |
| 62℃ | 1min | |
| 72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒) | 2min | |
| 延伸 | 72℃ | 7min |
| 4℃ | Forever |
3.结束后取5-10μl直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液),红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
4. 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
我公司的DOP-PCR试剂盒哪里卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·Southern级植物DNA提取试剂盒
编号:BTN130940
英文名称:Plant DNA extraction kit(Southern Grade)
规格:10次
·大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
编号:BTN130560
英文名称:E.coli Rosetta-gami (DE3)pLys Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
Rosetta-gami(DE3)pLysS是Rosetta-gami(DE3)的的衍生菌株,用于具有毒性的含二硫键真核蛋白的表达。它是高度严紧表达宿主菌,包括Tunerlac 透性酶突变以及gor B/gor突变帮助细胞质内二硫键形成。
基因型:Δ(ara–leu)7697 Δ lac X74 Δ phoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F"[lac+lacIq pro](DE3)gor522::Tn10(TcR)gorB::kan plysS pRARE(CmR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
DOP-PCR试剂盒哪里卖关键词:Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit,BTN111109,DOP-PCR试剂盒
·镍柱原位清洁试剂盒
编号:BTN130507
英文名称:Ni-Agarose Column In-Place Cleaning Kit
规格:20次
镍柱介质是分离纯化His标记蛋白的重要材料,但反复使用后非常容易污染杂蛋白,是对His标记蛋白的回收率越来越低。为此本公司开发了镍柱原位清洁试剂。
产品特点:
1.即开即用,不用单独准备各种溶液。
2.原位清洁,直接在亲和层析柱中进行清洁,免去繁琐的装柱步骤。
3.操作步骤简单,半小时即可完成。
4.清洁的效果好,跟进口同类产品相当。
5.可清除污染的离子型结合蛋白、沉淀蛋白、弱疏水性蛋白、脂蛋白、强疏水性蛋白和脂类。
6.适用于各种镍柱介质(包括Ni-NTA或Ni-IDA)。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 100ml |
| 溶液D | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
自备试剂:去离子水。
使用方法:
如果镍柱介质污染了其他蛋白和杂质,需要按下列步骤再生;如果镍柱介质对His标记蛋白结合降低(蓝色越来越淡),则需要另购镍柱原位清洗试剂盒。
1.去除镍柱中的离子型结合蛋白:用10倍介质体积的溶液A洗涤镍柱(对1mL的镍柱介质需要用10mL溶液A洗涤),再用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。
2.去除镍柱中的沉淀蛋白、弱疏水性蛋白和脂蛋白:封堵住层析介质的下端出口,然后加入2倍介质体积的溶液B,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡2小时,再用10倍介质体积的溶液C洗涤镍柱介质,最后用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。
3.去除镍柱中的强疏水性蛋白和脂类:封堵住层析介质的下端出口,然后加入10倍介质体积的溶液D,再盖上上端口,颠倒混匀后浸泡20分钟,再用10倍介质体积的自备去离子水洗涤镍柱。处理后的镍柱介质根据需要可以直接使用,也可以保存在50%的乙醇溶液中,还可以继续下面的清洁步骤。
DOP-PCR试剂盒哪里卖关键词:Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit,BTN111109,DOP-PCR试剂盒
·YPDG液体培养基
编号:BTN130897
英文名称:YPDG Liquid Medium
规格:250mL
YPDG培养基为YPD和YPG培养基的混合培养基。可用来区分+和-菌落。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·酸洗玻璃珠(200μm)
编号:BTN100307B
英文名称:Acid-Washed Glassbeads(200μm)
规格:10g
本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分,主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子,因为用其他方法,包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。
产品特点:
1. 经过充分的酸洗,免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞,属于物理方法,不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好,同时不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间,非常快捷。注意:本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5mL的微生物样品。
5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表:
| 编号 | 玻璃珠直径 | 最适用途 |
| BTN100307A | 100μm | 作为超声破碎细菌时的添加物 |
| BTN100307B | 200μm | 破碎细菌 |
| BTN100307C | 400μm | 破碎酵母(如酿酒酵母) |
| BTN100307D | 800μm | 破碎霉菌、孢子等 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为两年。
使用方法:
以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例:离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,,再加入0.5mL溶液B,震荡2分钟,2000rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱,用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。
使用效果:
图注:使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液,最后用50μl DNA洗脱液洗脱,5μl用于琼脂糖电泳。电压300V,电泳时间5分钟,染料为绿如蓝,缓冲液为SuperBuffer。
北京百莱博科技有限公司专业生产基因结构和功能产品,欢迎来电咨询选购DOP-PCR试剂盒哪里卖。
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文献和实验,mRNA,Virus RNA(RNA病毒)几类 Trizol即异硫氰酸胍-苯酚法,这种方法的原理是:首先用强变性剂异硫氰酸胍裂解细胞,同时使核蛋白复合体中的蛋白变性,释放出核酸。释放出来的DNA和RNA由于在特定pH时溶解度不同,分别位于整个体系中的中间相和水相,从而使DNA和RNA分离开来。进一步通过有机溶剂来抽提沉淀RNA,就可以得到纯净的RNA;Trizol最早是MRC实验室的科学家发明的方法,后来把专利卖给了invitrogen/Gibco, invitrogen/Gibco将此方法推广到世界
的原理是:首先用强变性剂异硫氰酸胍裂解细胞,同时使核蛋白复合体中的蛋白变性,释放出核酸。释放出来的DNA和RNA由于在特定pH时溶解度不同,分别位于整个体系中的中间相和水相,从而使DNA和RNA分离开来。进一步通过有机溶剂来抽提沉淀RNA,就可以得到纯净的RNA;Trizol最早是MRC实验室的科学家发明的方法,后来把专利卖给了invitrogen/Gibco,invitrogen/Gibco将此方法推广到世界。他的trizol曾经由其他公司OEM制作,现在已经自己生产。本来Trizol是一个专利
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