EGTA溶液(0.5mg/mL，蛋白级)(国产,进口)

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百奥莱博专业生产销*(代"售")EGTA溶液(0.5mg/mL，蛋白级)(国产,进口)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：EGTA溶液(0.5mg/mL，蛋白级)(国产,进口)
产地：国产|进口
英文名：EGTA Solution
编号：BTN130532
规格：10mL
品牌：百奥莱博
本产品为无色液体，浓度为0.5mg/mL。EGTA(乙二醇二乙*(代"醚")二胺四乙酸)，分子量是380.35，难溶于水，溶于1M NaOH。工作浓度为0.5～1.3mM(0.2～0.5mg/mL)。EDTA是一种常用的螯合剂，可以特异抑制Ca2＋依赖的蛋白酶活性。


储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

关于EGTA溶液(0.5mg/mL，蛋白级)(国产,进口)的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
蛋白银染试剂盒   "20T
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SJ0838 超低分子量标准蛋白质
ARB13263 小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)定量分析 Mouse ureaplasma urealyticum antibody,uu-ab ELISA KIT
玉米赤霉酮 L-Cystine 5975-78-0
ARB13401 羊旋毛虫(TrIchInellA spIrAlIs)尿液中含量检测 
ARB14090 牛腹泻病毒检测服务 
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·CpG甲基转移酶(M.SssI)
编号：BTN120511
英文名称：CpG Methyltransferase(M.SssI)
规格：100U
CpG甲基转移酶(M.Sssl)能识别双链DNA上的二核苷酸序列并甲基化其中的所有胞嘧啶残基(C5)，其甲基化过程如下图所示：


产品用途：
1．阻止限制性内切酶的切割。
2．CpG甲基化依赖性基因表达的研究。
3．研究特异序列与DNA大沟的相互作用。
4．改变DNA的物理特性。
5．对DNA统一进行［3H］ 标记。
6．减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性。

备注
1．CpG甲基转移酶(M.Sssl)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等级真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的DNA底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的DNA修饰工具。
2．只要限制性内切酶的识别位点含有CG序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG甲基转移酶使DNA甲基化，而E.coli中的Mcr和Mrr的限制作用不受甲基化影响，故应使用Mcr-、Mrr-的E.coli菌株作为转化的宿主菌。
3．胞嘧啶残基被甲基化后，可影响DNA的物理特性，如：降低Z-DNA形成的自由能，增加DNA的螺旋程度，改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
4．MgCl2并不是必需的辅因子。Mg2+存在时，M.Sssl更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，M.Sssl还具有拓扑异构酶的活性。

活性定义：1单位指在20μL反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μgλDNA不被BstUl限制性内切酶切割所需要的酶量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·血液细胞核DNA和线粒体DNA共提试剂盒
编号：BTN120810
英文名称：Blood nuclear DNA and mitochondrial DNA extraction kit
规格：25次
本试剂盒是在本公司血液DNA提取试剂盒产品基础上开发的、专门用于从新鲜或冷冻的哺乳动物抗凝全血中同时提取细胞核DNA和线粒体DNA的试剂。

产品特点：
1.一份样品可以同时得到细胞核DNA和线粒体DNA，节约宝贵的实验材料。
2. DNA产率高。细胞核DNA产率一般为30-50μg/mL 新鲜血液，线粒体DNA产率约为1μg/mL 新鲜血液。陈旧血液DNA产率差别较大。
3. DNA 纯净，OD260/OD280在1.8-2.0 之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4.适用于哺乳动物血液，不适用于其他动物血液。
5. 所用试剂安全无毒，健康环保。

试剂盒组成：

 

成分	规格
红细胞裂解液D型	250mL
溶液A	25ml
溶液B	2ml
溶液C	5ml
DNA 洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：

一：白细胞核和线粒体的分离
1. 将3mL 用EDTA 抗凝管收集的新鲜血液转移到一个干净的15mL塑料离心管中。注意：最好使用新鲜血液。对于陈旧血液，由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤，所以DNA 得率会大大减少，具体减少多少根据冻凝时间长短不同而不同。
2. 向血液中加入等体积(3mL)的D型红细胞裂解液；轻柔颠倒数次混匀，室温静置10分钟以裂解红细胞和白细胞的细胞膜，直至溶液变成清澈的红色。注意：D型红细胞裂解液一旦打开后，非常容易污染细菌，未用完的部分最好-20℃保存，下次使用前，要溶解后充分摇匀。
3.室温下1000 g离心10分钟沉淀白细胞核。
4.转移上清(含线粒体)到新的15mL塑料离心管中，注意不要触及白细胞核沉淀。
5.在白细胞核沉淀中加入3mL D型红细胞裂解液。轻柔颠倒数次混匀后，室温下1000 g离心10分钟以沉淀白细胞核。
6.转移上清(含线粒体)到第4 步所得的、已经含有上清的15mL塑料离心管中。
将白细胞核沉淀放置冰上，和即将准备好的线粒体一起用于DNA提取，也可以放置在-20℃待用。
7. 将汇集的含线粒体的上清于4℃下15000g离心30分钟。
8.小心移弃上清，小心将线粒体沉淀重悬在1mL D型红细胞裂解液中，然后转移到1.5mL塑料离心管中，15000g离心5分钟，移弃上清得到线粒体沉淀。
9. 用1mL D型红细胞裂解液洗涤线粒体2次(每次先重悬线粒体，再15000g离心5分钟得沉淀)。
10. 所得线粒体可以直接用于DNA提取，也可放置在-20℃待用。

二：DNA的提取(下面步骤为白细胞核DNA提取和线粒体DNA提取通用)
11.在白细胞沉淀或线粒体沉淀中加入0.5mL溶液A，用移液枪吹打数次混匀后再加入75μL溶液B，混匀后于55℃温育10分钟。注意：溶液将成浑浊状。
12. 再加入0.2mL溶液C充分颠倒混匀。
13.在4℃下13000g离心20分钟后，将上清(含DNA)转入一新的1.5mL塑料离心管中。
14. 加入两倍体积的自备无水乙醇充分震荡混匀后，室温13000 g离心5分钟，去尽上清。
15. 加入1mL 75%乙醇，充分混匀后室温13000g离心5分钟，去尽上清。
16. 重复上步一次。
17. 短暂离心，去尽残留溶液(此步十分重要，不要省略)。
18. 短暂晾干半分钟，加入适量DNA 洗脱液2.0 溶解DNA(对细胞核DNA，可加入500μL DNA 洗脱液2.0，对线粒体DNA，可加入50μL DNA 洗脱液2.0)。
19. 65℃保温15分钟以便彻底溶解DNA沉淀。溶解后的DNA可以立即用于后续的OD 检测、酶切、PCR或其他实验，也可以放置在-20℃长期保存。

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