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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
605
- 英文名:
Column Humic Acid Scavenger
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货柱式腐殖酸清除剂打折促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货柱式腐殖酸清除剂打折促销
产地:国产|进口
英文名:Column Humic Acid Scavenger
编号:BTN60801
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染,用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染,它们往往对PCR等后续反应有极大的抑制作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。
产品特点:
1.去污染效果好,能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高,一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速,只需要10分钟。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 专用上柱液 | 9ml |
| 离心吸附柱 | 30套 |
| 通用洗柱液 | 30ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl,专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡,否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中,套上收集管,放于离心管架上,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完,可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中,12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000~15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入50μl通用洗脱液,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
使用效果:
图注:从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限,实际读数可能远高于4),处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增,而处理后均可以扩增。
疑难解答:
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测最大光吸收。注意:有腐植酸污染并不表示DNA不能使用,有的腐殖酸并不抑制PCR扩增。
Q: 腐殖酸的最大吸收波长是多少?
A:腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别,土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同,所以其最大吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的最大吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.,63:4993,1997),有的则在340nm,所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单,其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会抑制后续的DNA反应?
A:否,因为腐植酸是一大类物质的统称,他们的结构和特性各不相同,所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生,而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生,说明可能有抑制作用。
Q:除本方法外,还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸?
A:可以先电泳,然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA,如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q:本产品与柱式DNArc有何区别?
A:本产品由柱式DNArc改进而来,主要区别一是使用了不同的上柱液,减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附,更适用于微量DNA样品;二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂,适合于土壤DNA样品。
Q:在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时,为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现?
A:这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取,提取过程中污染了E.coli的基因组DNA,而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版,所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。
北京现货柱式腐殖酸清除剂打折促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·dUTP溶液,100mM
编号:BTN131038
英文名称:dUTP Solution,100mM
规格:0.4mL
dUTP(2"-脱氧-5´-三磷酸尿苷)在PCR和RT-PCR反应中替代dTTP,从而可以防止前面扩增的干扰。PCR反应中dUTP替代dTTP,导致产物中含有尿嘧啶,这种掺入适用于很多应用。将尿嘧啶-N-糖基酶 UNG(有时称为UDG)加入到PCR反应中,可切除任何污染PCR产物的尿嘧啶,从而避免假阳性的形成。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·EDTA溶液(0.5M,pH8.0)(DNA级)
编号:BTN100842
英文名称:dUTP Solution,100mM
规格:250mL
dUTP(2"-脱氧-5´-三磷酸尿苷)在PCR和RT-PCR反应中替代dTTP,从而可以防止前面扩增的干扰。PCR反应中dUTP替代dTTP,导致产物中含有尿嘧啶,这种掺入适用于很多应用。将尿嘧啶-N-糖基酶 UNG(有时称为UDG)加入到PCR反应中,可切除任何污染PCR产物的尿嘧啶,从而避免假阳性的形成。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·木材DNA提取试剂盒
编号:BTN130941
英文名称:Timber DNA extraction kit
规格:50次
dUTP(2"-脱氧-5´-三磷酸尿苷)在PCR和RT-PCR反应中替代dTTP,从而可以防止前面扩增的干扰。PCR反应中dUTP替代dTTP,导致产物中含有尿嘧啶,这种掺入适用于很多应用。将尿嘧啶-N-糖基酶 UNG(有时称为UDG)加入到PCR反应中,可切除任何污染PCR产物的尿嘧啶,从而避免假阳性的形成。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·热启动Taq DNA聚合酶
编号:BTN120401
英文名称:HotStart Taq DNA Polymerase
规格:100U
热启动Taq DNA聚合酶设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系,使用非常方便。热启动Taq DNA聚合酶是一种重组Taq DNA聚合酶,蛋白分子*基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性,避免形成引物二聚体和非特异性延伸。从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复酶活性。活化的酶具有与热启动Taq DNA聚合酶相同的功能:催化5´→3´方向合成DNA、无可检测的3´→5´校正外切酶活性、具有较低的5´→3´外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性,在PCR产物的3´-端多加1个腺嘌呤。活化前检测不到这些活性。
产品特点:
1.高产量扩增复杂模板。
2.不需要95℃加热4分钟即可激活酶活性。
3.PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成。
4.增强的PCR敏感性。
5.使用方便,室温配制PCR反应体系。
6.扩增产物具有3´-dA突出末端。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 20μl |
| 10×反应 Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。10×HotMaster Taq Buffer中含有Mg2+,配有浓度为15mM MgCl2 。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+,设置最佳的反应体系。该酶最适延伸温度为65℃,可在60℃-70℃之间调整。
以人基因组DNA为模板,护增1kb的片段
1.反应体系的建立:50μL反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系):
2.PCR反应循环的设置:
3.结果检测:反应结束后取5μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
北京现货柱式腐殖酸清除剂打折促销关键词:BTN60801,柱式腐殖酸清除剂,Column Humic Acid Scavenger
ARB13757 骆驼脂蛋白*(代"磷")脂酶A2(Lp-PL-A2)酶标法分析 Camel lipoprotein-associated phospholipase a2,lp-pl-a2 ELISA KIT
ARB11148 人肿瘤坏死因子配体相关分子-1A(TL1A)含量分析 Human tumor necrosis factor-related ligand 1a,tl1a ELISA KIT
羧苄青霉素溶液(50mg/ml) Carbenicillin 50mg/ml 10ml
5486-84-0 Fast Blue BB Salt 固蓝BB盐
甘油磷酸* L(-)-Camphorsulfonic acid 58409-70-4
ARB14094 大鼠过氧化*酶(CAT)ELISA代测服务
ARB10916 人抗磷脂抗体(Apl/APA)elisa检测操作说明书 Human anti-phospholipid antibody,apl/apa ELISA KIT
ARB13325 山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)Elisa定量检测 Goat phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,ampk ELISA KIT
ARB11404 人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)代做ELISA实验 Human glial fibrillary acidic protein,gfap ELISA KIT
亚麻酸 Flavourzyme 463-40-1
BTN70302 一步离心式石蜡清除剂 Paraffin Erasol
ARB11968 大鼠CD8分子(CD8)检测服务 Rat cluster of differentiation 8,cd8 ELISA KIT
谷*酰胺转移酶 Potassium acetate 80146-85-6
北京现货柱式腐殖酸清除剂打折促销关键词:BTN60801,柱式腐殖酸清除剂,Column Humic Acid Scavenger
·Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
编号:BTN120654D
英文名称:Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)
规格:20次
·糖原溶液(10mg/mL)(分子生物学级)
编号:BTN131190
英文名称:Glycogen Solution
规格:1mL
本产品为分子生物学级糖原溶液,浓度为10mg/mL,不含DNase,RNase。可直接用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂使用。
储存条件:室温运输,4℃保存,有效期一年。
·TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
编号:BTN90605A
英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| TdT缓冲液,5× | 20μl |
| TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
| 成份 | 用量 |
| 探针DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
| 标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) |
1μl |
| dATP,2mM | (见下注) |
| TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
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