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605
- 英文名:
dTTP Solution,100mM
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输和-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京dTTP溶液,100mM优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京dTTP溶液,100mM优惠促销
编号:BTN120617
规格:0.5mL
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:dTTP Solution,100mM
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。
dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
欲了解更多北京dTTP溶液,100mM优惠促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·荧光素标记的生物素
编号:BTN131093
英文名称:FITC-Biotin
规格:5mg
本产品为荧光素标记的生物素,激发波长492nm,发射波长510nm。颜色为黄绿色。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·甲基化专一性PCR试剂盒
编号:BTN100923
英文名称:Methylation Specific PCR Kit
规格:50次
本产品是基于PCR的甲基化DNA检测试剂盒(即MSP试剂盒)。它由两个成分组成,一个是亚硫*(代"酸")*盐试剂盒,用于将DNA中所有没有甲基化的C转化成U,而甲基化的C不变。二是优化的PCR试剂盒,利用客户自备的专一性引物,根据PCR来检测甲基化位点的位置。
产品特点:
1.本产品是亚硫*(代"酸")盐修饰试剂盒和即用型PCR 3.0的整合,即开即用,非常方便。
2.柱式DNA回收方法极大提高亚硫*(代"酸")盐修饰后DNA的回收率。
3.优化的PCR mix,含有PCR所需要的所有成分,减少了操作误差。
4.PCR结束后可以直接上样电泳,非常方便。
5.用户需要自备MSP专一性引物。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B成分一(干粉) | 2.3g×5瓶 |
| 溶液B成分二(干粉) | 110mg×5瓶 |
| 通用溶胶液 | 50mL×2 |
| 离心吸附柱 | 50套×2 |
| 通用洗柱液 | 100mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
| PCR MagicMix 3.0 | 1.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(PCR MagicMix 3.0要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
自备试剂:超纯水、MSP引物、对照DNA模板和引物。
注:严格的实验一般要求下列5种对照DNA模板和相应的引物对,用户可以根据自身实验的要求只做其中的部分。
| 对照名称 | 起始DNA | 处理 |
| 未修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA (无甲基化宿主菌或体外扩增而得) |
未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 已修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 未修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA (用甲基化酶修饰未甲基化DNA而得) |
未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 已修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
| 未修饰样品DNA对照 | 样品DNA | 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
使用方法:
Ⅰ.亚硫*(代"酸")*盐修饰
一、准备试剂
1.配制溶液B成分一溶液:加5.0mL超纯水和27μl溶液A到装有溶液B成分一干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃至溶(尽量少的剧烈摇晃,约需要5分钟),总体积约5.5mL。
2.配制溶液B成分二溶液:加10mL超纯水到装有溶液B成分二干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃混匀(尽量少的剧烈摇晃)。
3.配制溶液B工作液:将55μL溶液B成分二溶液加入到溶液B成分一溶液中,轻柔颠倒混匀即可使用。一瓶溶液B工作液可以用10次。
二、DNA变性处理
1.将5μL溶液A加入到45μL DNA溶液中并吹打混匀(总体积没有45μL需要用水补足到45μL,DNA总量在0.2-5μg之间,不能超过 5μg,一般使用2μg DNA即可)。 注意:DNA必须是线状的,长度最好在20-50 Kb左右。基因组DNA可以预先用酶切处理(酶的位点不得在研究的DNA序列之内),也可以用机械打断法处理(得到的DNA一般在20-50 Kb左右)。
2.37℃放置15分钟使DNA充分变性。
3.立即在DNA溶液中加入500μl溶液B工作液,轻柔颠倒混匀。
4.55℃避光保温8-16小时。如果使用水浴或没有热盖的PCR仪器保温,最好加50-100μL石蜡油,避免水分蒸发。
注意:必须避光保温。55℃处理8小时足以使95%的C变成U,保温时间过长会引起DNA的断裂。如果有的区域的C难以转化成U,可以改用两步式PCR处理(每55℃保温3小时后95℃变性处理5分钟,共5-10个循环),效果会更佳。
5.冰浴10分钟。
6.加入1mL的通用溶胶液,颠倒混匀后取一半溶液上柱。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
7.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.取另一半溶液再上柱,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
9.加入0.7mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以洗涤残留的亚硫*(代"酸")*盐。
10.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl新鲜配制的溶液A稀释液(5μl的溶液A原液与45μl的超纯水混合而得),室温放置2分钟后离心半分钟。
11.将洗脱下来的DNA溶液放置在37℃保温15分钟。
12.加入0.7mL的通用溶胶液,混匀后上柱。
13.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,杂质等将穿透过柱。
14.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl DNA洗脱液,室温放置2分钟后离心半分钟。
15.所得溶液即为亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA,可以用于下面的甲基化专一PCR。
说明:此方法的回收率一般为50%,2μg DNA最后可以得到1μg的修饰后的DNA。由于修饰后的DNA呈长短不一的单链,EB染色效果很差,所以不能用灵敏度低的琼脂糖电泳-EB染色的方法检测,但可以用灵敏度更高的PAGE-银染方法检测。
Ⅱ.甲基化专一性PCR(以60μL的标准PCR反应体系为例)
1.在一干净的PCR管中,加入下列成分(冰上操作):
| 成分 | 样品管 | 对照管 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30μl | 30μl |
| 亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA模板 | 100-500ng | 无 |
| 对照DNA模板 | 无 | 100-500ng |
| 自备MSP引物F | 25pmol | 无 |
| 自备MSP引物R | 25pmol | 无 |
| 对照模板专一性PCR引物F | 无 | 25pmol |
| 对照模板专一性PCR引物R | 无 | 25pmol |
| 补水到 | 60μl | 60μl |
注:有5种对照DNA模板可以供用户根据自身需要选择,详见自备试剂栏。
2.将混合物混匀,放入PCR仪中进行热启动PCR,结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。
北京dTTP溶液,100mM优惠促销关键词:BTN120617,dTTP溶液,100mM,dTTP Solution,100mM
·电泳级尿素
编号:BTN100873
英文名称:Urea
规格:100g
本产品是电泳级尿素干粉,专门用于尿素-PAGE胶的制备。PAGE电泳中尿素的作用是增加膜蛋白的溶解度,抑制核酸样品核苷酸碱基配对,使其迁移率与核酸序列和碱基组成无关,此外它还能提高多肽在SDS PAGE中的分辨率。它主要用于下列实验:
1. 核酸的尿素-PAGE变性电泳。
2. 多肽的SDS-PAGE电泳。
3. 膜蛋白的SDS-PAGE电泳
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·RNase抑制剂(猪源)
编号:BTN130834
英文名称:RNase Inhibitor From Pig
规格:500U
本产品是电泳级尿素干粉,专门用于尿素-PAGE胶的制备。PAGE电泳中尿素的作用是增加膜蛋白的溶解度,抑制核酸样品核苷酸碱基配对,使其迁移率与核酸序列和碱基组成无关,此外它还能提高多肽在SDS PAGE中的分辨率。它主要用于下列实验:
1. 核酸的尿素-PAGE变性电泳。
2. 多肽的SDS-PAGE电泳。
3. 膜蛋白的SDS-PAGE电泳
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·哺乳动物专用蛋白酶抑制剂
编号:BTN130527
英文名称:Protease Inhibitor for Mammal
规格:1mL
本产品为哺乳动物蛋白酶抑制混合液,溶剂为DMSO。专门用于裂解哺乳动物组织(如,血液、肝脏、肌肉等)时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止蛋白质降解。本产品抑制谱广,能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶和*基肽酶等各种蛋白酶活性。与各种细菌细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期两年。
·酿酒酵母EGY48化学感受态细胞
编号:BTN140387
英文名称:E.coli EGY48 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating 操作。Transformation marker为his3,trp1,ura3 ,报告基因为LEU2 。本产品经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA。
基因型:MAT α,ura3,his3,trp1,Lex Aop(x6)-LEU2
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
北京dTTP溶液,100mM优惠促销关键词:BTN120617,dTTP溶液,100mM,dTTP Solution,100mM
ARB10164 人TH糖蛋白(THP)Elisa定量检测 Human t-h glycoprotein,thp ELISA KIT
鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
25249-54-1 PVPP 聚乙*(代"烯")聚吡*(代"咯")烷铜
BTN61202 一步式广谱DNAOUT Magic DNAOUT
核酸沉淀溶液(焦磷酸*法) 100ml
BFD001 猪瘟病毒抗体检测试剂盒
BL1347 BCIP/NBT显色试剂盒
F030429 胶体金标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*GOLD
马尿酰-组*酰-亮*酸 Choline oxidase 207386-83-2
BL0831 HRP标记牛血清白蛋白BSA抗体
ARB12623 大鼠维生素C(VC)Elisa方法检测 Rat vitamin c,vc ELISA KIT
77-06-5 Gibberellic Acid(GA3) 赤霉素
ARB11214 人细胞纤维连接蛋白(cFn)酶标法分析 Human cellular fibronectin,cfn ELISA KIT
9005-64-5 Tween-20 吐温-20
BL0237 麦芽提取物 Malt Extract
PY02-333 改良月桂基硫*(代"酸")盐胰蛋白胨(MLST)肉汤基础 250克
TTC染色液 1%|2% 50ml|100ml
ARB10289 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)尿液中含量检测 Human alpha-fetoprotein lens culinaris agglutⅡn 2,afp-l2 ELISA KIT
磷酸*缓冲液(pH7.0) 0.5mol/L 500ml
α-乳白蛋白 T4 DNA Ligase 9051-29-0
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购北京dTTP溶液,100mM优惠促销。
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文献和实验1 、工作室尺寸 (mm) : 350×400×400 ; 2 、外型尺寸 (mm) : 615×540×850 ; 3 、温控范围:室温 +10 ~ 200 ℃ ; 4 、温度波动: ≤±1℃ ; 5 、温度均匀性: ±5℃ ; 6 、额定功率: 1.3KW ; 7 、电源电压: 220V50Hz ; 8 、重量: 100kg ; 产品特点: 该理化干燥箱内胆均用不锈钢薄板制作,有数显设定及测量工作温度,备有超
质分子量标准(19-119KD) (50次)--每支 280元 五. 秋季部分产品特价促销单 具体产品和价格如下: 一. DNA分子量标准产品: DNA分子量标准 规格 优惠价 DL2000 50次 58元 参照片断(bp):100 、250、500、750、1000、2000bp Marker1 50次 58元 参照片断(bp):100 、200、300、400、500、600bp Marker2 50次 58元 参照片断(bp):100 、300、500
膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中 5 min。剪一张比膜稍宽的长条 Whatman 3 mm 滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪 3~5 张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。(转移过程一般需要 8-24 hr,每隔数 hr 换掉已经湿掉的纸巾。转移液用 20× SSC。注意在膜与胶之间不能有气泡。整个操作过程中要防止膜上沾染其他污物。)4. 转移结束后取出 NC 膜,浸入 6× SSC 溶液数 min,洗去膜上沾染的凝胶颗粒,置于两张滤纸之间,80 °C 烘 2 hr
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