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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
378
- 英文名:
Non-enzymatic DNA Scavenger
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")非酶DNA清除剂-2(<200nt)优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:非酶DNA清除剂-2(<200nt)优惠促销
英文名:Non-enzymatic DNA Scavenger
规格:15次
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。百奥莱博开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
产品特点:
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。
2. 本身不含RNase污染,因为本产品为非酶产品;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。
3.快速,只需要十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 能用于小RNA中DNA污染的去除。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合(即100μl RNA溶液需加100μL DNA Scavenger-2),充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足100μL,最好加无RNase水补足到100μL以便后续操作,如果体积大于100μL,试剂的用量也需要按比例增加。
2. 加入相当于RNA溶液和DNA Scavenger-2 混合液总体积1/2的自备*仿,充分震荡半分钟。
3. 12000~15000g室温或4℃离心1-3分钟。
4.转移上清到一个RNase-free的塑料离心管中,加2倍体积的溶液B(用前摇匀),充分震荡半分钟。
5. 12000~15000g室温或4℃离心10分钟后,小心弃上清。如果处理的样品中含有小RNA,最好使用30分钟的离心时间。
6. 加1mL自备75%乙醇,充分震荡半分钟。
7. 12000~15000g室温或4℃离心5分钟后小心弃上清。
8. 短暂快速离心,小心吸弃余液。
9. 加入自备RNase-free 水溶解RNA沉淀后立即使用或放-80℃长期保存。
疑难解答:
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
Q:为何处理后的RNA还有DNA 条带?
A:有些时候(尤其是使用非变性电泳检测时)RNA 会形成聚合物,电泳很慢,人们会误以为是DNA,可以加少量无DNase的RNase处理样品,确认就是DNA。如果是,可能是样品中盐浓度过高使DNA 去除效率降低,可以预先用乙醇沉淀法去掉盐离子。
Q:本产品跟DNA Scavenger(BTN60201)有何区别?
A:前者可以用于小RNA(长度小于200nt)的RNA样品而后者不能。
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非酶DNA清除剂-2(<200nt)优惠促销关键词:非酶DNA清除剂-2(<200nt),BTN70801,Non-enzymatic DNA Scavenger
·一管式双链cDNA合成试剂盒
编号:BTN130308
英文名称:One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
规格:10次
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下:

cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链,其原理图如下:

产品特点:
1. 即开即用,含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA,对不含poly rA的RNA(如细菌RNA),不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行,第一链cDNA合成后不需要任何处理,直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA,最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Oligo dT引物 | 10μl |
| cDNA第一链合成缓冲液 | 40μl |
| MMLV 逆转录酶(200U/μL) | 10μl |
| 5×cDNA 第二链合成缓冲液 | 160μl |
| 20×cDNA 第二链合成酶混合液 | 40μl |
| T4 DNA聚合酶 | 20μl |
| 0.2 M EDTA溶液 | 40μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂,用户需自备相关试剂。
二:双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中,按下表设置cDNA合成反应:
| 成分 | 用量 |
| 自备mRNA样品 | 4μl(0.5-2μg) |
| Oligo dT引物 | 1μL |
| 70℃ 2分钟后室温放置2分钟,短暂离心 | |
| cDNA 第一链合成缓冲液 | 4μL |
| MMLV 逆转录酶 | 1μL |
| 轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA | |
| 超纯水 | 48μL |
| cDNA 第二链合成缓冲液 | 16μL |
| cDNA 第二链合成酶混合液 | 4μL |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时 | |
| 自备的T4 DNA聚合酶 | 2μL |
| 轻柔吹打混匀后,16℃继续保温30分钟 | |
| 0.2M EDTA溶液 | 4μL |
注:如果不需要将双链cDNA平末端化,则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片,则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常,需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。
非酶DNA清除剂-2(<200nt)优惠促销关键词:非酶DNA清除剂-2(<200nt),BTN70801,Non-enzymatic DNA Scavenger
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