BTN131196型Therminator II DNA聚合

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BTN131196型Therminator II DNA聚合酶多少钱由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Therminator II DNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN131196型Therminator II DNA聚合酶多少钱
品牌：百奥莱博
规格：100U
产地：国产|进口
编号：BTN131196
Therminator II DNA聚合酶是9°Nm DNA聚合酶中的一种，但有较强的修饰底物掺入能力，如dNTP、rNTP和acyNTP。Therminator II DNA聚合酶是Therminator DNA聚合酶的衍生物，前者比后者多了一个*基酸突变。这种改变提高了rNTP和3´功能基团经修饰核苷酸的掺入效率。

产品特点：
1．提高了修饰核苷酸特别是rNTP的掺入能力；
2．部分核糖核酸置换法测定DNA序列；
3．ddNTP或acyNTP的链终止法测序；
4．ddNTP或acyNTP链终止法测序用于SNP分析。

产品组成：

 

成份	规格
Therminator II DNA聚合酶(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指75℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

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·细菌总蛋白质微量提取试剂盒
编号：BTN90902
英文名称：Bacterial Total Protein Miniprep Kit
规格：30次
本试剂盒适用于细菌天然总蛋白的快速微量提取，可用于各种后续实验研究。

产品特点：
1．可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液或冰冻菌体沉淀。
2．在 1.5mL塑料离心管中操作，适用于大规模的快速筛选。
3．采用温和的中性裂解成分，蛋白保持天然活性。
4．产率是5-10mg蛋白质/mL细菌。
5．无须昂贵设备，无需溶菌酶、超声波破碎等复杂的操作步骤，离心分离即可得到，简单便捷。
6．得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法和及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	1.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

1．取 1mL 过夜培养的细菌，12000rpm离心1分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体。如为冰冻保存的菌体沉淀可直接进行第2 步。
2．每 10mg 湿重菌体沉淀加入0.5mL溶液A和50μL溶液B，吹打混匀。
3．冰上放置30分钟至1小时至菌液变清。
4．4℃ 12000 g离心1分钟。
5．将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分样品到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。


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·微量核酸沉淀剂
编号：BTN50903
英文名称：NA Precipitation Solution
规格：10mL
本产品是在经典的盐/醇核酸沉淀法基础上经过优化的即用型试剂，在沉淀浓缩核酸时替代常用的盐/醇(如乙酸*/乙醇)，在回收微量核酸时效率比经典的乙酸*/乙醇高30%以上。

产品特点：
1．高效，使用多种优化的成分替代经典的盐/醇(如乙酸*/乙醇)混合物，尤其适合于回收微量核酸(在1.5mL离心管中回收10ng以下的核酸效率比乙酸*/乙醇高30%以上)。
2．操作简单，按2：1的比例将本产品与待回收溶液混合即可，不需要任何额外处理步骤。
3．适用范围广，任何能用盐/醇(包括乙醇和异丙醇)沉淀回收的实验均可使用本产品。
4．不含DNase和RNase，不影响核酸的A260/280光吸收，不影响后续的反应过程(PCR和酶切等)。

储存条件：室温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按2:1的比例将本产品与核酸溶液(PCR反应液、胶回收液等)混合。本产品取用前需要摇匀。
2.室温15000g离心10分钟(如果核酸含量在2 ng以下，建议离心30分钟)。
3. 弃上清后加75%乙醇1mL，振荡混匀。
4. 15000离心3～5分钟，弃上清。
5. 再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的核酸沉淀，可溶于TE或水中。


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·噻孢霉素溶液
编号：BTN120684
英文名称：Cefotaxime Solution
规格：1mL
本产品为浓度100mg/mL的噻孢霉素水溶液。参考浓度50mg/mL。噻孢霉素(头孢噻肟*)分子式为：C16H16N5NaO7S2，分子量：477.45，CAS号：64485-93-4。效价：916-964μg/mg，溶于水。噻孢霉素为β-半乳糖苷酶抑制型抗菌素，能抑制肽聚糖的交联，从而抑制细菌细胞壁合成，常用于植物组织培养中抑制农杆菌。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·非蛋白型Western封堵液
编号：BTN140436
英文名称：Nonprotein Western Blocking Solution
规格：250mL
本产品为即用型免疫印迹膜非蛋白型封堵缓冲液，其不包含任何蛋白质，不会产生使用蛋白类封闭剂时出现的诸如交叉反应和非特异性结合等问题，在保证有效的封闭效果的同时，还只具有极低的背景。。

产品特点：
1．高信噪比，得到最佳的灵敏度。
2．本产品包括A型(Tris缓冲盐溶液，pH7.4，含Kathon杀菌剂)和B型(磷酸盐缓冲液，pH7.4，含Kathon杀菌剂)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·动物线粒体纯化试剂盒A(粗提)
编号：BTN111207A
英文名称：Animal Mitochondria Purification Kit(A)
规格：5次
线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是母系遗传研究的重要材料。对线粒体进行遗传研究和生化研究都需要纯化线粒体。本产品可用于纯化动物细胞线粒体的试剂盒。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。
2．有粗提和精提两个选择，但是精提需要超速离心机。粗提所得线粒体可以直接用于蛋白分析(SDS-PAGE、Western Blot、ELISA等)、蛋白组分析和线粒体DNA纯化。精提线粒体可以用于偶联分析和体外线粒体蛋白合成等实验。
3．本产品一次可以处理约2×108个培养细胞，30mg培养细胞(相当于15瓶150mm培养细胞)可以纯化到到0.5-1.5mg线粒体。
4．本产品适用于各种动物悬浮培养细胞和贴壁培养细胞，不能用于动物实体组织。
5．提供线粒体染液，可以在操作中随时监测纯化过程中线粒体的完整性。

试剂盒组成：

粗提型(BTN111207A)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml
蔗糖	80g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml

精提型(BTN111207B)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml×2
蔗糖	100g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：线粒体膜对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或冷室进行，所要用到的溶液和离心管都必须预先冷却，否则线粒体容易破裂。

一、准备工作(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)。未用完的下列溶液需要-20℃保存，否则容易长菌。下次使用前务必让沉淀溶解并摇晃均匀。
1．将溶液A和溶液B放冰上预冷待用。
2．配制1.7M高比重溶液(仅限BTN111207B精提型试剂盒，BTN111207A粗提型试剂盒不需要配制此溶液)：36克蔗糖用溶液B溶解并定溶到60mL，冰上预冷待用。
3．配制1.0M低比重溶液，BTN111207A粗提型试剂盒需要100mL，配制方法是将34克蔗糖用溶液B溶解并定溶到100mL，冰上预冷待用。111207B粗提型试剂盒需要150mL，配制方法是将51克蔗糖用溶液B溶解并定溶到150mL，冰上预冷待用。
4．配制线粒体重悬液，BTN111207A粗提型试剂盒需要200mL，配制方法是将150mL溶液B和50mL 1.0M低比重溶液混合；BTN111207B精提型试剂盒需要300mL，配制方法是将225mL溶液B和75mL 1.0M低比重溶液混合，即得300mL 线粒体重悬液，冰上预冷待用。

二、线粒体粗提(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)
5．如果提取材料是单层细胞，先用60mL自备的PBS缓冲液洗涤2×108个培养的单层细胞，共洗涤2次。然后用塑料刮匙刮下细胞，重悬在60mL PBS缓冲液中。如果是悬浮细胞，则1000g 4℃离心10分钟收集2×108个细胞，再用60mL PBS缓冲液洗涤2次，最后将细胞重悬在60mL PBS缓冲液中。
6．用平甩转子(swinging-bucket rotor)离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留细胞沉淀。
7．加入5倍体积(以细胞沉淀的体积为基数)的预冷的溶液A，轻柔重悬细胞。
8．冰上放置4-5分钟。注意：冰浴时间不要超过5分钟。
9．如果是成纤维细胞，由于其难以裂解，可将细胞重悬液在-80℃放置20-30分钟后再化冻，然后进入下步操作。如果不是成纤维细胞，则直接进入下步操作。
10．将细胞重悬液体转移到预冷的Dounce玻璃匀浆器中(工作体积为10-15mL，间隙为0.12 mm，最好是玻璃材质，否则线粒体产率会降低)匀浆适当次数。细胞株不同，其最适匀浆次数不同，一般需要40次-60次左右。匀浆是线粒体纯化最关键的步骤，故匀浆前最好先通过预实验确定最适匀浆次数，方法是每匀浆5-10次后，取2-3μl匀浆液到载玻片上，然后在相差显微镜下观察，完整细胞数量降低到20%以下为佳。
11．加入1/3体积的、预冷的1.0 M低比重溶液，轻柔混匀。
12．用平甩转子离心机4℃ 1000 g离心10分钟。沉淀含残留完整细胞、细胞碎片和细胞核，上清液含线粒体。
13．转移上清液到离心管中，冰上放置。在显微镜下检测上清液中线粒体的完整性。具体做法是先滴50μL左右上清液到载玻片上，再滴入50μl詹纳斯染液绿B染色液20分钟，油镜下观察，蓝绿色颗粒状物即为线粒体。
14．用固定角度转子(fixed-angle rotor)离心机4℃ 15000g离心15分钟，弃上清，所得棕黑色沉淀即为粗提线粒体沉淀。
15．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，4℃ 15000g离心15分钟，弃上清。
16．重复上步一次。
17．最后用适量的线粒体重悬液重悬线粒体，可用于各种后续实验(本试剂盒不提供相关试剂)，如果用于下面的精提操作，则用10mL线粒体重悬液重悬。

三、线粒体精提(需要超速离心机)
18．在跟超速离心机匹配的50mL的离心管中，加入10mL预冷的高比重溶液，再在上面加上10mL预冷的低比重溶液，最后再加上10mL线粒体粗提液。
19．70000g 4℃离心40分钟，线粒体将位于高比重溶液和低比重溶液之间区域。
20．小心用广口吸管吸出线粒体到新的离心管中，加入等体积的线粒体重悬液。
21．用平甩转子离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
22．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，在平甩转子离心机上4℃ 1000g离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
23．再重复上步一次。
24．最后用适量线粒体重悬液重悬线粒体，得到线粒体精提液。可以直接用于Lowry法蛋白浓度测定，也可以用于其他后续实验。

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