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Ampicillin Solution
6个月
北京百奥莱博科技有限公司
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京*苄青霉素溶液价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京*苄青霉素溶液价格
产地:国产|进口
规格:10mL
品牌:百奥莱博
本产品是浓度为50mg/mL的*苄青霉素溶液,用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。
作用原理:能使细菌细胞膜内层的transpeptidase(转肽酶)失活从而抑制细菌细胞壁的合成。
抗性机制:抗性基因bla能特异性表达外周质酶β-lactamase(β-内酰胺酶),该酶可切割*苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期6个月。
更多有关北京*苄青霉素溶液价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·DNA探针变性液
编号:BTN131208
英文名称:DNA Probe Denaturation Solution
规格:10mL
杂交反应进行时,探针和靶核酸都必须是单链的。如果用双链DNA探针进行杂交(包括检测RNA时),双链DNA探针在杂交前必须进行变性。本产品就是即用型的DNA探针变性液,专门针对DNA探针在杂交前进行变性处理。
产品特点:
1. 即开即用。
2. 使用方便快捷,可用于核酸杂交。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
使用方法:
一、根据探针和靶分子的不同,分别按下面不同情况计算杂交分子的Tm 值
1. 对 DNA-DNA杂交,其Tm = 81.5 + 16.6×log10[Na+] + 0.41×GC%–500/L
说明:L是探针或靶分子的长度(用两者中最短的一个)
GC%是探针或靶分子中的GC 百分比(用两者中最短的一个)
Na+浓度是超级杂交液中Na+的浓度,为0.75 M,16.6×log10[Na+]=(-2.07)
2. 对 DNA-RNA杂交,其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高10-15℃。
3. 对 RNA-RNA杂交,其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高20-25℃。
4. 对 Oligo探针杂交,Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。
二、确定最佳杂交温度(预杂交温度跟杂交温度应该一样)
1. 对于大于200bp的DNA-DNA杂交,最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃,一般选择68℃。
2. 对 RNA-RNA或DNA-RNA杂交,最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃。
如果这样计算出的杂交温度很高(如高于70℃),则RNA 容易降解,所以最好选用含甲酰胺的超级杂交液(超级杂交液B型),以便能在42℃完成杂交。
3. 对 Oligo探针的杂交,最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo 较短,更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等),所以最佳温度需要适度摸索和优化。
三、确定洗膜温度
一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此条件下的最佳洗膜温度比Tm低5-12℃,一般情况下可以在55℃进行洗膜。Oligo探针可以室温洗膜。
四、预杂交步骤
预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口,再剪掉一角,留一个小口),按每平方厘米印迹膜加0.2mL超级杂交液的比例沿小口加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。
3. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保温1-2小时,延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
五、杂交步骤
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置5分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入0.05倍体积的自备的1 M的Tris-Cl溶液(pH7.2)以及等体积的自备的0.4 M的HCl溶液。
将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链DNA或RNA探针,则不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率而定,一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3.在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为6-12小时。
六、洗膜步骤。
注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低,热稳定性较差,在一定的温度和较低的离子强度下,即可洗掉。
1.杂交完毕,取出塑料袋,剪去一角,倒出所有的含探针的杂交液。此含探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2. 剪开杂交袋,用镊子取出印迹膜,浸没于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中,室温下振荡漂洗15分钟。
3. 重复上步操作一次。
4. 将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中,在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5. 重复上步操作一次。如果是同位素标记探针,则需要重复至用盖革计数器在无核酸区域检测不出放射信号为止。
6. 将印迹膜转移到滤纸上,吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。
北京*苄青霉素溶液价格关键词:BTN60206,*苄青霉素溶液,Ampicillin Solution
·重组蛋白G
编号:BTN131080
英文名称:Streptococci protein G
规格:1mg
本品为重组蛋白G,纯度>90%,带His标签,分子量10kD。
储存条件:-20℃保存,有效期1年。
·RNA洗脱液
编号:BTN71207
英文名称:RNA Elution Buffer
规格:10mL
本产品是专门从硅胶膜离心吸附柱上高效洗脱结合的RNA。本产品与各种硅胶膜兼容,洗涤普通离心吸附柱一次需要本产品20-100μl。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
编号:BTN130957
英文名称:Cell Lysate RT-PCR Mix
规格:100次
本产品是一种免RNA提取的RT-PCR的试剂盒,它使用精心优化的细胞裂解液直接裂解培养细胞和痕量组织块,然后直接在细胞裂解液中进行RT,再用cDNA进行PCR或荧光定量PCR。
产品特点:
1. 免RNA提取,从细胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR结果只需3个步骤约3小时,省略了整个RNA提取过程。
2. 灵敏度不低于常规方法(先提总RNA再进行RT-PCR),不但可以检测到低拷贝的RNA,还可用于检测miRNA。
3. 整合了去除基因组DNA的步骤,只检测RNA,无需担心基因组DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000个培养细胞或含相应细胞数的痕量组织(如LCM样品),验证过的细胞包括Hela、CHO、293、COS-7等,但不能用于U937细胞系。
5. 两步法RT-PCR,后续使用灵活。得到的cDNA既可用于普通PCR,也可用于基于SYBR的荧光定量PCR,也可用于其他定量PCR(如TaqMan),非常灵活。
6. 有单管操作和多孔板操作两种模式,前者适用于少量样品,后者适用于平行处理大量样品,适用于高通量筛查。
7. 本产品足够100次50μL体系的RT反应和600次30μL体系的PCR反应。
试剂盒组成:
成份 | 规格 |
细胞裂解液成分一 | 3.8mL |
细胞裂解液成分二 | 300μL |
细胞裂解液成分三 | 100μL |
Oligo(dT),0.5ug/uL | 50μL |
随机引物,0.2ug/uL | 50μL |
MMLV逆转录酶(含RI) | 300μL |
PCR MagicMix3.0 | 9mL |
RNase-free 水 | 10mL |
使用手册 | 1份 |
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