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北京百奥莱博科技有限公司
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4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京WB抗体清除液(中性,去污剂法)价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:WB抗体清除液(中性,去污剂法)
编号:KFS063
产地:国产|进口
规格:500ml
Western Blot 抗体清除缓冲液(Stripping buffer),用于Western Blot 中做完免疫杂交之后的膜重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测其它蛋白,通过使用抗体清除液,充分去除结合的一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
Western Blot 抗体清除缓冲液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5 次。
中性抗体清除液基于去污剂法,无腐蚀性,可快速地应用于PVDF 膜上一抗和二抗的去除。
使用说明
1. 在完成Western 化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5 分钟。
2. 弃蒸馏水,加入适量的Western 一抗二抗去除液(中性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10 分钟。
3. 弃抗体清除液,并吸尽残余液体。加入TBS、TBST 或PBS 漂洗3-4 次,每次在摇床上漂洗3-5 分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western 的后续操作。
注意事项
1. 为取得最佳效果,推荐使用PVDF 膜。
2. 如多次重复使用同一张膜5 次以上,有可能会导致蛋白信号的减弱,建议膜重复使用不超过5 次。
3. 使用ECL 等类似的化学发光试剂进行的Western Blot 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测,例如DAB,NBT/BCIP 等,不适用于本试剂。
储存:4℃,有效期12个月。
关键词:WB抗体清除液(中性,去污剂法),KFS063,百奥莱博
北京WB抗体清除液(中性,去污剂法)价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
| 编号 | 名称 |
| KFS207 | Caspase 9荧光法检测试剂盒(AFC) |
| KFS380 | 丙二醛(MDA)测试盒/脂质过氧化物(LPO)测试盒 |
| KFS322 | MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒 |
| KFS166 | Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-*离子指示探针) |
| KFS122 | 高*酸化物 |
| KFS339 | CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
| KFS056 | DyLight649标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 |
| KFS230 | TNF-α蛋白检测试剂盒 |
| KFS187 | Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 |
| KFS065 | 一抗稀释液(Western Blot) |
| KFS265 | Ac-VDVAD-FMK(caspase 2 抑制剂) |
| KFS024 | 成心肌鉴定cTnI免疫组化试剂盒(IHC) |
| KFS007 | 漂片抗原修复液(10X) |
| KFS431 | Dylight405标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| KFS219 | Caspase-3蛋白检测试剂盒 |
| KFS031 | 即用型免疫组织化学SP试剂盒(Mouse) |
| KFS046 | FITC标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 |
| KFS021 | TRA-1-81免疫荧光试剂盒(IF) |
| KFS085 | 4-20%预制胶(205-6.5 kDa分离范围;10个样/胶) |
| KFS141 | 高*酸化物[神经元红色荧光探针][DiIC12(3)] |
| KFS420 | Cy3标记山羊抗大鼠IgG(H+L) |
| KFS032 | 即用型免疫组织化学SP试剂盒(Rabbit) |
| KFS251 | Hoechst33258染色试剂盒 |
| KFS193 | Annexin V-kFluor555/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 |
| KFS341 | DNA损伤/断裂分析试剂盒(IF FM HCS法,橙/绿/蓝) |
| KFS091 | 10×电转移缓冲液 |
| KFS110 | 革兰氏染液 |
| KFS040 | kFluor488标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 |
| KFS188 | Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 |
| KFS088 | 8-16%预制胶(205-14 kDa分离范围;10个样/胶) |
| KFS126 | 高尔基体红色荧光探针 |
| KFS428 | Cy5.5标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| KFS273 | Bafilomycin A1 (自噬抑制剂,质子泵抑制剂) |
| KFS049 | kFluor488标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 |
| KFS009 | 免疫染色封闭液 |
| KFS097 | Western blot检测试剂盒(选配二抗、PVDF膜及相关缓冲液、ECL试剂) |
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文献和实验制成50% 悬液。 每 1mL 细胞裂解液上清加入 100 µL Agarose protein A+G 珠子,4℃ 振荡 10 min,进行预清除。 4℃,10000 rpm 离心10 min移去 Agarose protein A+G 珠子,转移上清至一新离心管中。 用 Bradford 法(考马斯亮蓝染色法)测定上清蛋白浓度。(应至少将细胞裂解液作 1:10 稀释后再测定,这是因为存在于裂解液中的去污剂成分会干扰考马斯亮蓝的作用)。 根据所测得的细胞裂解液蛋白浓度,用 PBS
和运行时可作为样品的pH 指示剂(图 3A)。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移(s)(图 3B, 表 5 和 6)以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时(图 3C)。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化,导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。(B)在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。(C)在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后,进行电泳。拆卸梳子和添加电泳缓冲液
和离子强度的使用和要求。这方面我有惨痛教训,当时我买的抗体稀释液偏酸,结果背景一片黄(未见特异性染色),建议 pH 在 7.4-7.6 浓度是 0.01 M。(中性及弱硷性条件(pH7-8)有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解) 11)DAB 显色 背景的深浅和特异性染色的深浅均可以由 DAB 孵育条件决定。DAB 显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现特异性染色较强而本底着色较浅时即可冲洗
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