彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)说明书在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)说明书
产地：国产|进口
英文名：Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
品牌：百奥莱博
规格：10T(50μl)
编号：RFT043
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为1.2kD-45kD，分子量大小为 1.2kD，4.6kD，10kD，16kD，27kD，45kD (注：蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。



储存条件：-20℃。

除彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)说明书外，我公司正在打折促销以下产品：

·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号：RFT076
英文名称：SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格：50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。

试剂盒组成：

 

组份	规格	保存条件
40%PAA(29:1)	100 ml	4℃
4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8	100 ml	4℃
4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8	50 ml	4℃
APS(干粉)	0.5 g	RT
TEMED	0.5ml	4℃，避光
4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂)	1 ml	-20℃
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉)	1 L	RT

使用方法：
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一)，再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。

表一：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：

SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
6%	50-150kD
8%	30-90kD
10%	20-80kD
12%	12-60kD
15%	10-40kD

配制分离胶前，根据以下配方准备10% APS：
10% APS配制-5 ml：将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10%APS。

制备分离胶步骤：
1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合；加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合

表二：SDS-PAGE分离胶配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	5ml	10ml	15ml	20ml
8％胶
H2O	2.7	5.4	8.1	10.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1	2	3	4
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
10％胶
H2O	2.45	4.9	7.35	9.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.25	2.5	3.75	5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
12％胶
H2O	2.2	4.4	6.6	8.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.5	3	4.5	6
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
15％胶
H2O	1.825	3.65	5.475	7.3
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.875	3.75	5.625	7.5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2

二、浓缩胶制备：
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合；加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
5、静置30-60分钟，等待浓缩胶聚合。

表三：SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	2 ml	4 ml	5 ml	10 ml
H2O	1.17	2.34	2.925	5.85
4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8	0.63	1.26	1.575	3.15
40％ PAA(29:1)	0.2	0.4	0.5	1
TEMED	0.002	0.004	0.005	0.01
10％ APS	0.02	0.04	0.05	0.1

三、电泳：

凝胶凝固好后，根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L：将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中，加入约900 ml水彻底溶解，用水定容至1 L，即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔)，轻轻的拨出梳子，随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样，电泳，一般是浓缩胶80V，分离胶120V恒压，等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后，结束电泳，染色或者进行下一步实验。


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儿茶素 COA 225937-10-0或154-23-4
ARB11343 人美丽线虫凋亡基因(CED-3)Elisa分析 Human caenorhabditis elegans death gene,ced-3 ELISA KIT
蛋白离心柱   个
ARB10798 人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)含量测试 Human anti-cardiolipin antibody igm,aca-igM ELISA KIT
F030433 胶体金标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*GOLD
BTN130863 碘化丙啶干粉 PI Powder
NF-227 兔抗人全血清
疏水硅烷 Xylene blue
ARB12409 大鼠组织蛋白酶K(cAth-K)elisa测定使用说明书 Rat cathepsin k,cath-k ELISA KIT
PY08-029  一次性血液增菌培养基 00ml  10支/盒，用于从血液中分离病原菌
Tris-硼*(代"酸")电泳缓冲液(5×TBE,RNase free)   500ml
铬天青S C12E9 1667-99-8
BL1311 Taq Plus DNA Polymerase
维生素C检测试剂盒(铜氧化比色法)   50T
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基**(代"胺")*盐 Prestained Protein Molecular weight Mark 82692-93-1
BL0794 牛IgG抗原(干粉)
F030821 BIOTIN标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*BIOTIN
弹力纤维染色液(改良Gomori醛品红法)   4×50ml
ARB11208 人细胞外信号调节激酶(ERK)含量检测 huma extracellular signal -regulated kinase，erk  ELISA KIT
琼脂糖蛋白A VA
7647-14-5 Sodium Chloride  *化*
ARB14135 甘薯轻斑驳花叶病毒(SPMMV)Elisa定量检测 
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·植物RNA提取试剂
编号：RFT032
英文名称：Plant RNA Extraction Reagent
规格：100ml
本试剂可从植物组织，特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎，白松松针或嫩苗，和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。每100 ml可处理100 mg组织200次。

自备试剂：液氮，研钵，无RNase离心管，5 M NaCl(无RNase水配制)，*仿，异丙醇，75%乙醇(无RNase水配制)，无RNase水。

少量提取操作步骤(样品少于0.1 g)：
1.取不多于0.1g植物组织，在液氮中研碎，转移到1.5 ml 离心管中，加0.5 ml提取试剂，振荡至彻底混匀。
注：振荡不要太剧烈，否则容易导致基因组DNA污染。
2.室温放置5分钟。
3.4℃条件下12000 rpm离心2-3分钟，上清转入新的无RNase离心管。
4.上清中加入0.1 ml5 MNaCl(无RNase水配制)，温和混匀。
5.加入0.3 ml *仿，上下颠倒混匀。
6.4℃条件下12000 rpm离心10-15分钟，取上层水相转入新的无RNase离心管。
7.加与所得水相等体积的异丙醇，混匀，室温放置10分钟。
8.4℃条件下12000 rpm离心10-15分钟。弃掉上清，注意不要倒出沉淀。加1 ml 75%乙醇冲洗沉淀。(沉淀可能很难看见，应小心操作。)
9.4℃条件下5000-7000rpm离心3分钟。倒出液体，注意不要倒出沉淀。剩余的少量液体短暂离心，用枪头吸出，室温晾干1-2分钟至沉淀干燥。
10.加适量无RNase水充分溶解RNA，-70℃保存。

注意：本试剂有刺激性味道，操作时请在通风处进行。

储存条件：4℃，有效期6个月。

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