细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 蛋白质研究

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 蛋白质研究在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 蛋白质研究
品牌：百奥莱博
英文名：Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit
产地：国产|进口
  本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜，释放细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer A	50ml
Buffer B	3ml
Buffer C	25ml
Protease Inhibitor Cocktail	750μl

保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：2～8℃

注意事项：
1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2、所有样品操作请置于冰上进行。
3、可根据具体实验情况调整试剂用量，保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
4、可以采用更高的速度来离心。

使用方法：

一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
2、收集细胞，计数。离心去上清。
3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育20分钟。
注意：各种细胞的特性不同，需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
1、取材，保存组织。
2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
3、称组织重量，每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，用匀浆器在冰上充分匀浆，放置在冰上孵育20分钟。
注意：各种组织的特性不同，需要根据不同组织调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，放置在冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

储存条件：-20℃

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百里酚蓝* Maltase 62625-21-2
*酚水溶液  5% 100ml
链霉素硫*(代"酸")盐 EGTA tetrasodiu*(代"m") 3810-74-0
ARB10787 人抗中性粒/中心体抗体(ACA)检测服务 Human anti-centrol and centrosome antibody,aca ELISA KIT
4×Native-PAGE蛋白上样液 5×1ml
ARB12940 小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)elisa检测 Mouse platelet-derived growth factor ab,pdgf-ab ELISA KIT
甘*胆酸 Fluorescamine 475-31-0
*甲环酸 6-Azauridine 1197-18-8
BTN60601 DNA UV防护剂 DNA UV Erasol
4-甲氧基*甲*(代"酸") 2,2"-Biquinoline 100-09-4
ARB11575 人基质金属蛋白酶9(MMP-9)定量分析 Human matrix metalloproteinase,mmp-9 ELISA KIT
甘露低聚糖 γ-Linolenic acid
F030710 BIOTIN标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*BIOTIN
细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 蛋白质研究关键词：Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit,WE0265,细胞核/浆蛋白抽提试剂盒

Weigert铁苏木素染色液   2×50ml
PY02-088  马丁氏肉汤  250克  
BTN130927 宫颈采样拭子 Uterus Swabs
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(7-15万)
肝素*检测试剂盒(天青A比色法)   100T
77-86-1 TRIS 三羟甲基*基甲*(代"烷")
ARB12949 小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)Elisa方法检测 Mouse alpha-granular membrane protein,gmp-140 ELISA KIT
PY08-021  马铃薯葡萄糖琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于霉菌和酵母菌的计数
甲基葡萄糖 Amikacin 13224-94-7
ARB12347 大鼠尿素(UreA)Elisa分析 Rat urea ELISA KIT
BL0870 羊抗兔IgG免疫血清 0.5ml
干酪素 S-Carboxymethyl-L-Cysteine 9000-71-9
硝酸*(代"银")水溶液  5%|10% 100ml
2-*氧乙酸 7,8-Benzoquinoline 120-23-0
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·DNA文库定量试剂盒(Illumina平台)
编号：WE0231
英文名称：NGS Library Quantification Kit for Illumina
规格：1ml|5ml
  本产品是采用染料法(SYBR Green I)对NGS建库后的产物进行实时荧光定量PCR(qPCR)。试剂盒提供了qPCR过程所需的反应混合液，DNA引物混合物，标准品，试剂体系完整，操作简单方便。本试剂盒使用的是一种经化学修饰的全新高效热启动聚合酶，酶的激活需在95℃下孵育10 min。该产品特异性强，扩增效率高，能够对构建的文库浓度进行快速准确的定量。适用于无需ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪，如Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyleriQ，iQ5，CFX96。
  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
  不需要ROX校正的仪器： Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyler iQ，iQ5，CFX96等。
  需要Low ROX校正的仪器： ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System， QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system， Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
  需要High ROX校正的仪器： ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

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