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Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒大量库存促销在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒大量库存促销
产地:国产|进口
英文名:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
品牌:百奥莱博
本试剂盒是一种采用Annexin V-FITC与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)不能通过完整的活细胞,但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色, 因此通常将Annexin V与PI配合染色, 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
4×Binding Buffer | 10ml |
Propidium Iodide,PI | 500μl |
Annexin V-FITC | 250μl |
SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
组份 | 500U |
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl |
10×PCR Buffer | 1.8ml |
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
ddH2O | up to 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 60 s | |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
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