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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
981
- 靶点:
HA
- 级别:
多克隆
- 目录编号:
WE0350
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 抗体英文名:
Anti HA-Tag Rabbit Ployclonal Antibody
- 抗体名:
抗HA标签多克隆多克隆抗体
- 宿主:
兔
- 免疫原:
重组HA标签
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖
品牌:百奥莱博
英文名:Anti HA-Tag Rabbit Ployclonal Antibody
规格:20μl|100μl
产地:国产|进口
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。
抗体类型:兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
除WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖外,我公司正在打折促销以下产品:
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"
植物基因组提取试剂盒 50次
WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖关键词:兔抗重组HA标签,WE0350,抗HA标签多克隆抗体,HA抗体,重组HA标签抗体
·抗β-Actin单克隆抗体(植物)
编号:WE0353
英文名称:Anti β-Actin Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
Actin是细胞骨架的主要成分, 广泛表达于真核细胞。 目前发现Actin至少存在6种异构体形式。 Actin已经在各种物种的细胞中发现,并且在在免疫原性及物理特征上都比较相似,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,因此它常被用于校正系统的内参。本抗体经常作为各种模式生物如拟南芥,水稻等的内参。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
克隆号:6D1
免疫原:全长Actin蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
应用种属:拟南芥,水稻,斑马鱼,果蝇,秀丽线虫,酿酒酵母
·TA快速连接试剂盒(pUC-T)
编号:WE0249
英文名称:pUC-T TA Cloning Kit
规格:20次
pUC-T TA载体是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在EcoR V酶切位点处切开,在两侧的3"端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3"端添加一个A,它可以与pUC-T 3"端的T互补连接,因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。
试剂盒中配备高效率的T4 DNA Ligase和为快速高效DNA连接优化的2×Quick Ligation Reaction Buffer。连接效率相当于用T4 DNA Ligase 进行常规连接1小时。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入。克隆后可以用BcaBEST Sequencing Primers和 M13通用引物对PCR产物进行测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| pUC-T(50ng/μl) | 20μl |
| Control Insert(50ng/μl) | 10μl |
| Quick T4 DNA Ligase | 20μl |
| 2×Quick Ligation Reaction Buffer | 120μl |
注意事项:
1、Insert DNA 要求
1)连接使用的PCR片段3’末端应带有“A”尾。有些高保真DNA聚合酶,如我公司的Pfu扩增的PCR产物是平滑末端,可使用加A试剂盒加上A尾后,再进行T载体克隆。
2)PCR产物建议进行切胶回收纯化后再进行T载体克隆,以免PCR产物中的非特异片段或残存引物等杂质影响。推荐使用WE0168快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒。
2、连接反应要求
1)本试剂盒能使大多数连接反应在25℃条件下5分钟甚至更短时间内达到反应终点,增加反应时间反应效率不会增强。如用快速连接反应1小时后,转化效率会明显降低;如25℃快速连接反应过夜,则转化效率会下降到75%。
2)2×Quick Ligation Reaction Buffer含有ATP,使用前置于冰上使其融化后充分混匀,建议初次使用分装成小管冻存,避免其反复冻融影响DNA连接效率。
3)由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用之前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深,以免粘在枪头上造成损失。
4)如快速连接产物用于电转,因快速连接反应体系中的PEG会影响电转效率,建议使用离心柱将连接产物进行DNA纯化(如WE0170快速DNA产物纯化试剂盒)后再进行电转。
3、感受态细胞要求
建议使用高效的热击转化感受态细胞,这样才可能得到比较理想的阳性克隆,如需进行蓝白筛选,宿主细胞必须具有正确的基因型(F´编码的【lacZ ΔM15】)产生ω片段,才能与载体DNA产生的LacZ α 多肽结合,表现出β-半乳糖苷酶活性(α互补)。pUC-T TA载体以pUC18载体为基础构建而成,因此,适合pUC18载体的感受态细胞都可以使用。推荐使用本公司WE0251 TOP10感受态细胞、WE0252 DH5α感受态细胞。
4、阳性克隆筛选
阳性DNA片段成功插入至pUC-T Vector中后,一般情况下β-半乳糖苷酶的表达将受到破坏,重组克隆体在含有X-Gal、IPTG、Amp的LB固体培养基上培养时将显示白色菌落。但有时比较短的DNA片段插入载体时,基因的读码框有可能正好与LacZ的读码框相吻合,克隆体也会显示蓝色菌落。
5、阳性对照
为了确认实验操作的正确性,以及实验试剂的有效性,我们建议使用本试剂盒中配备的Control Insert(750 bp)进行阳性对照实验。
使用方法:
1、按以下体系配制反应液:
| 成分 | 反应体系 | 对照体系 |
| pUC-T | 1μl | 1μl |
| DNA 插入片段 | 0.1 -0.3 pmol | -- |
| Control Insert DNA | -- | 1μl |
| 2×Quick Ligation Reaction Buffer | 5μl | 5μl |
| Quick T4 DNA Ligase | 1μl | 1μl |
| RNase -Free Water | 补足至10μl | 补足至10μl |
注:Insert DNA的使用量:在进行克隆时,Vector DNA和 Insert DNA的摩尔比一般为:1:2-1:10,可根据实验情况选择适当的Vector DNA和 Insert DNA的摩尔数比。Insert DNA的使用量=nmol数×660×Insert DNA bp数。本载体1μl(50ng)的摩尔数约为0.03 pmol。
2、轻轻混合,短暂离心。25℃反应5分钟。
注意:反应时间不要超过15分钟,否则会降低连接效率。
3、反应结束后,将DNA连接产物存放于0-4℃,而后进行转化实验;也可将DNA连接产物置于-20℃保存。
注意:勿进行加热失活反应。
4、将连接产物加入50μl感受态细胞中(将感受态细胞置于冰上融化),冰浴30分钟。
注意:用化学法转化时,连接产物的加入量不要超过感受态细胞体积的10%。
5、42℃热击45秒钟,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
6、加入450μl无菌SOC或LB培养基,混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45分钟,使菌体复苏。
7、根据实验要求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有X-Gal、IPTG和Amp的LB固体培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃,直至液体被吸收后,倒置培养,37℃培养12-16小时。
8、计算白、蓝色菌落,挑选白色菌落,使用PCR法或酶切法鉴定插入片段是否正确。
储存条件:-20℃。
WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖关键词:兔抗重组HA标签,WE0350,抗HA标签多克隆抗体,HA抗体,重组HA标签抗体
·抗GST标签多克隆抗体
编号:WE0345
英文名称:Anti GST-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
规格:100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种GST编码载体表达的GST-Tag融合蛋白。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:500-10000)
·HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L)
编号:WE0370
英文名称:Donkey Anti-Chicken IgY(IgG)(H+L),Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别鸡IgY,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:鸡IgY
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
我公司正在优惠促销一抗等系列产品,期待您的咨询选购WE0350型抗HA标签多克隆抗体怎么卖。
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文献和实验性结合能力,70-80%的抗体纯化都采用了蛋白A亲和层析的方法,该方法已经成为抗体纯化的经典方法,在免疫诊断试剂小规模和工业大规模中都得到了良好的应用。该法具有非常高的选择性,一步亲和层析就可达到超过95%的纯度。蛋白A纯化柱可与多种动物血清进行结合,用于多克隆抗体的纯化,包括人、兔和小鼠,(如表1所示)。蛋白A纯化柱用于人血清中IgG的浓缩,广泛用于标本的预处理;蛋白A纯化柱用于兔IgG的纯化,所纯化的抗体可广泛用于病理免疫组织化学,金标试纸条,ELISA的组装。除多克隆抗体之外,蛋白纯化柱也越来
了)。I. 我所测定的蛋白分子量是105KD,按理说分离胶应当采用7.5%,但我所查资料却要求分离胶和浓缩胶均采用11%的配方,不知为何?解答:上述您提到的两种凝胶均可以使用,因为105KD的蛋白在上述两种胶的线性分辨范围内,但需注意条带位置。J. 接下来我准备采用DAB显色技术,二抗是生物素化的多克隆抗体,三抗是亲和素生物素体系,不知采用这样的方案后,封闭液是否要作调整,能否再用5%的脱脂奶粉呢?好像有资料说脱脂奶粉会影响亲和素生物素的生成,是吗?解答:不能使用脱脂奶粉,因为脱脂奶粉中含生物素,用BSA代替应该
技术,二抗是生物素化的多克隆抗体,三抗是亲和素生物素体系,不知采用这样的方案后,封闭液是否要作调整,能否再用5%的脱脂奶粉呢?好像有资料说脱脂奶粉会影响亲和素生物素的生成,是吗?解答:不能使用脱脂奶粉,因为脱脂奶粉中含生物素,用BSA代替应该好一点.M. 还有一问题,一般一次上样的蛋白总量是多少,跟目的蛋白的表达量有关系吗?解 答:Western Blot一般上样30-100微克不等,结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和抚育时间都有关系,也与显色时间长短有关。开始摸条件时,为了拿到阳 性
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