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- 百奥莱博
- WE0177-YMB
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
875
- 英文名：
Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温(15～30℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家
品牌：百奥莱博
英文名：Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
编号：WE0177
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品采用柱式提取方法，可以处理1-5ml的全血，可纯化获得大小为100bp到50kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 3×260ml |
| Buffer GR | 25ml |
| Buffer GL | 25ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
保存条件：Buffer RCL 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、本试剂盒最多可以提取1-5ml全血样品，如需提取大量血液样本请选用血液基因组非柱式提取试剂盒(#WE0176)。
4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请置于56℃水浴重新溶解。
6、如下游实验对RNA污染较敏感，可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
7、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入1-5ml血液样品，加入3倍体积的Buffer RCL轻轻涡旋或颠倒混匀。
2、3000 rpm(～900×g)离心10分钟，小心吸弃上清。
3、向沉淀中加入400μl Buffer GR，重悬沉淀。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。
4、1-2ml血液样本提取时,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ，混匀；2-5ml血液样本提取时,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混匀。
5、加入400μl Buffer GL，颠倒混匀15次，剧烈涡旋震荡至少1分钟。
注意：不要直接将蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：
1)如溶液未彻底清亮，补加适量蛋白酶K ，孵育。延长孵育时间至溶液完全清亮为止。
2)孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
7、加入400μl无水乙醇，颠倒混匀10次。短暂离心，使管壁和管盖上液体集中到管底。
8、将上步所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DL中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤9。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温下放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤12所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，12000rpm离心1min；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
·细菌蛋白抽提试剂盒
编号：WE0261
英文名称：Bacterial Protein Extraction Kit
规格：100次
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎，有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP，Western Blot，蛋白纯化等下游操作。
试剂盒组成：
| 组份 | 100次 |
| Bacterial Protein Extraction Reagent | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 1ml |
| Lysozyme(50 mg/ml) | 200μl |
| DNaseⅠ(1000U/ml) | 100μl |
保存条件：Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温
注意事项：
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统，蛋白提取后的纯化操作，请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液，可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株，如果抽提效果不理想，可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况，可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。
使用方法：
细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟，收集菌体。
2、可选步骤：每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail，涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例，向菌体沉淀中加入抽提液，充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后，室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白)，进行蛋白定量及下游实验。
注意：如目的蛋白以包涵体形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。
昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重，按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后，冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟，分离可溶性蛋白。
常见问题分析
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 目的蛋白不溶 | 目的蛋白表达为包涵体 | 优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液 |
| 在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I | ||
| 加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来 |
温度过低 | 将使用试剂恢复至室温 |
| Lysozyme 活性降低或失活 | 加入更多的Lysozyme 或更换新的酶 | |
| 提取物粘度高 | DNase I 活性降低或失活 | 加入更多的DNase I 或更换新的DNase I |
| 将*离子的终浓度增加至2 mM | ||
| 蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中 |
蛋白量过大 | 加入Lysozyme及DNase I |
| 蛋白抽提试剂有沉底析出 | 温度过低 | 将蛋白抽提试剂恢复至室温 |
储存条件：-20℃
北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家关键词：WE0177,柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml),Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
*甲基磺酰*(代"*")溶液 PMSF 100mmol/L 1.5ml|5ml|10ml
ARB11296 人钩端螺旋体IgG(Lep IgG)elisa检测操作说明书 Human leptospira igg,lep igG ELISA KIT
BTN90303 硅胶膜DNA离心吸附柱(大提) Silica Spin Column For Maxiprep
ARB13166 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)定量分析 Mouse heat shock protein 60,hsp-60 ELISA KIT
ARB11199 人组织相容性复合体I类相关基因A(MICA)酶标法分析 Human mica ELISA KIT
BL1211 改良型石炭酸复红染液(*酚品红染液)
腺苷 L-(+)-Tartaric acid disodiu*(代"m") salt 58-61-7
KREBS-RINGER缓冲液 500ml
HC0273 单道整支灭菌移液器
ARB10907 人抗精子抗体(AsAb)elisa检测 Human anti-sperm antibody,asab ELISA KIT
葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶微板法) 50T
花生酸甲酯 4-Vinylphenylboronic acid 1120-28-1
ARB12402 大鼠降*素基因相关肽(CGRP)Elisa方法检测 Rat calcitonin gene related Peptide,cgrp ELISA KIT
PY04-050 磺胺嘧啶* 12mg/支×10支 每支添加于100ml亚硫*(代"酸")盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)培养基中，用于产气荚膜梭菌的平板计数
F030408 胶体金标记山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1*GOLD
北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家关键词：WE0177,柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml),Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
·磁珠法游离DNA提取试剂盒
编号：WE0204
英文名称：MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit
规格：96次
本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水、淋巴液、尿液等无细胞体液中简单、高效的纯化回收游离DNA(Free circulating/Cell-free DNA)。在高盐存在时，游离DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后，高纯度的游离DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可用于定量PCR以及二代测序建库等下游实验。该试剂盒还可用于病毒DNA的提取。
试剂盒组成：
| 组份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(浓缩液) | 72ml |
| Buffer KCW2(浓缩液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自备试剂：异丙醇、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取率低。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer KCW1和Buffer KCW2中加入无水乙醇并做好标记。
4、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
5、Magbeads在使用前一定要涡旋震荡20秒使其充分混匀。
操作步骤：
第一次使用前请检查Buffer KCW1和Buffer KCW2中是否已加入无水乙醇。
1、向1.5ml的离心管中加入20 ul 蛋白酶K ，之后加入300 ul血浆。
2、向上一步的离心管中加入300 ul Buffer KCL，涡旋震荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟。
3、将上一步的离心管从水浴锅中取出，短暂离心后室温放置5分钟。
4、向上一步的离心管中加入150 ul异丙醇，涡旋震荡混匀后短暂离心。之后向离心管中加入40 ul彻底混匀的Magbeads，涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡10分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)或连续颠倒混匀10分钟。
注意：如果样品量较多，可将异丙醇与Magbeads提前按比例混匀，之后同时加入裂解产物中。
5、将上一步的离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)，期间避免接触Magbeads。
6、将离心管从磁力架上取下，加入500 ul Buffer KCL后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后弃去溶液。
注意：如果样品为血清、羊水、淋巴液或尿液，Buffer KCL漂洗步骤可去除。
7、将离心管从磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW1后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液，期间避免接触Magbeads。
8、将离心管从磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW2后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液，期间避免接触Magbeads。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10分钟，使乙醇挥发干净。
注意：如果离心管壁上有液珠，可向离心管中加入800 ul无水乙醇。盖盖后颠倒离心管，之后彻底去除无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下，加入30-100 ul Buffer EB或去离子水。涡旋震荡时Magbeads完全悬浮于洗脱液中后将其放入56℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟或放于56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将上一步的离心管放置于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
储存条件：室温(15～30℃)
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购北京现货柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)厂家。
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文献和实验相关实验
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP349） ——中量全血操作流程（1-10 ml血样）
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝或新鲜全血(本实验以10 ml人的新鲜全血（a）/抗凝血（b）分别为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限
单层敞开式摇瓶机厂家报价? 产品说明: JY-25-54单层敞开式摇床是同类产品中技术较先进和质量完善可靠的产品,造型美观大方,数显测速,转速可任意设定,操作简便,实为生物工程、医药、卫生、微生物学等行业科研和生产使用的理想仪器. 主要特征: 1、精湛的制作工艺，确保机械运转更稳定更可靠。 2、单层敞开式摇床机芯采用优质铸铁和NSK进口轴承使机械更坚固耐用。 3、交流感应长寿命电机、款、宽调速、恒力矩、无碳刷、免保养。 4、独特的电机过热，温度失控自动断电
全部提取出来，进行长期保存，满足长期、反复、多种研究的需要。 常见解决方案的缺点： 传统方法：对于范围在1-10ml的血样的DNA提取，传统的方法，用SDS，蛋白酶k消化，再用酚氯仿，反复抽提，此过程不但用到了有毒害的苯酚，氯仿，而且特别繁琐，费时间，耗费大量人力物力，并且接触毒害物质在当今社会已经越来越显得不可行。 离心柱方案和磁珠方案： 商品化的离心柱型分离方法或者磁珠分离方案，因为一次处理量太大，要满足中量、大量血液DNA提取的磁珠或者离心柱型的解决方案，在成本
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