PVDF膜(0.22μM)哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括PVDF膜(0.22μM)哪里买在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：PVDF膜(0.22μM)哪里买
编号：WE0300
英文名：PVDF Membrane(0.22μM)
规格：1 sheet
品牌：百奥莱博

关于PVDF膜(0.22μM)哪里买的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·一抗稀释液(WB IHC)
编号：WE0321
英文名称：Antibody Diluent
规格：20ml
  本稀释液适用于免疫组织化学、免疫印迹等实验中一抗的稀释。产品添加了抗体保护剂、稳定剂等成分，有效增加了稀释后抗体的稳定性。用此稀释液稀释后的一抗可在2～8℃环境下稳定保存半年以上(抗体终浓度极低的工作液稳定期将会缩短)。本产品不适用于Biotin标记抗体、HRP/AP等酶标记抗体稀释。如需要稀释标记后蛋白或抗体，请另行选购对应稀释液：生物素标记抗体稀释液，辣根过氧化物酶标记物稀释液。

注意事项：
1、本产品含有5%正常山羊血清。
2、产品含防腐剂，请带手套小心操作。
3、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：请按照所需的稀释比例来使用本稀释液。

储存条件：2～8℃


·水性封片剂
编号：WE0317
英文名称：Mounting Solution(Aqueous)
规格：10ml
  在免疫组化切片染色中，有些显色底物(如AEC,AP-Red)生成的颜色产物以及一些核复染试剂(如核快红)为脂溶性，可溶于有机溶剂。因此，染色和复染过程中若用到此类试剂，就不适合用梯度酒精脱水、二甲*透明、中性树胶封片，而应使用水性封片剂进行封片。本产品适用于AEC、AP-Red染色，以及BCIP/NBT染色(核快红复染)后封片使用。

注意事项：
1、本封片剂是水溶性的，凝固后再遇水仍可溶解。因此封好的组织片应避免与水接触，否则需要再次凝固或重新封片。
2、本产品含有防腐剂，操作时应戴手套。

操作步骤：
1、IHC染色结束后，擦干组织周围水分，加适量(一般约100μl)水性封片剂于组织上，使其覆盖整个组织表面。
2、将切片放置于干净平整处，使封片剂凝固。封片剂完全凝固时间：室温1小时左右，65ºC 5-10分钟。

实验图例：

水性封片剂封片后显微照相效果(400倍放大)

储存条件：室温


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·实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)
编号：WE0140
英文名称：BaReSYBR Mixture
规格：5ml
  本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系， 浓度为2×， 包含HotStar Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测。本品中所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合，使该产品可以用于多种不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。经独特方法处理的热启动DNA聚合酶和专门的PCR缓冲液使本品具有特异性高的特点，满足常规荧光定量检测。该产品应用范围广，适用于无需ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。

产品组成：

 

组份	5ml
2×BaReSYBR Mixture	5×1ml
ddH2O	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应程序，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaReSYBR Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。

2、PCR反应程序：
两步法PCR：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶需在预变性95℃、5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考；若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融


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·血液基因组DNA提取试剂盒
编号：WE0176
英文名称：BalbGen Blood DNA Kit
规格：可处理50ml血液|可处理200ml血液
  本试剂盒提供了一种快速、灵活的方法，适用于新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的样品)提取总DNA，包括基因组DNA和线粒体DNA。本品可以灵活处理0.1-20ml的全血，采用非离心柱的方法，无需使用*酚、*仿等有机溶剂，有效去除蛋白、色素、脂类及其它抑制性杂质污染。整个过程在一个管中操作，减少了污染及样本混淆的风险。提取的DNA产量高、质量好，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot以及文库构建等实验。

试剂盒组成：

组份	可处理50ml血液	可处理200ml血液
Buffer FG1	2×65ml	2×260ml
Buffer FG2	30ml	120ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	3 mg	12.5mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	1.25ml

保存条件：Buffer FG1 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)。

产品特点
1、纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大：可从0.1-20ml的全血中提取DNA，无需使用*酚、*仿等有机溶剂。
3、兼容性强：适用于处理各种血液和细胞样本。

自备试剂：异丙醇、70%乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、所有离心操作均在室温下完成。
3、血液样品反复冻融，会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融，以免降解。如果提取冷冻血液的基因组DNA，建议37℃水浴，迅速解冻后再进行后续操作。
4、血液样品的储存：
1)短期保存：已加入抗凝剂的血液样品可在2～8℃储存最多10天，对于某些实验例 如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，请将血液样品在2～8℃储存不超过3天，此时基因组DNA的降解程度较轻。
2)长期保存：已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推荐使用EDTA作为抗凝剂)。

操作步骤：

一、从100～900μl全血中提取基因组(以300μl血液处理量为例)
1、取300μl全血于2ml离心管(自备)中，加入300μl(样本等体积)Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，10000×g离心30秒，弃上清。
2、再向离心管中加入450μl(1.5倍样本体积)Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。10000g离心30秒，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在极少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上，可以减少管壁上清的回流。
3、按照附表配制Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液最好现用现配.井在配好后1小时之内用完。
4、加入150μl的Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡，不要等所有样品部加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次.毎次5秒，可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入30μl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，再次混旋混匀。
5、65℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入150μl导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至出现丝状或簇状基因组DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少，可能看不到DNA，则至少上下频倒高心管20次确保沉淀完全。
7、10000×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：少数时候沉淀可能贴壁不牢，注意不要吸弃沉淀。
9、加入300μl的70%乙醇，涡旋震荡5秒，10000×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在管底可见白色的DNA沉淀，在极少情況下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干操DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入200lμl的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解，可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

二、从1～5ml全血中提取基因组(以3ml血液外理量为例)
1、取3ml全血于15ml离心管(自备)中，加入3ml(样本等体积)Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，2500×g离心5分钟，弃上清。
2、再向离心管中加入4.5ml(1.5倍样本体积)Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在极少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上，可以減少管壁上清的回流。
3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液最好现用现配，井在配好后1h之内用完。
4、加入1.5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋振荡，不要等所有样品都加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次，毎次5秒可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入300lμl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，再次涡旋混匀。
5、65℃孵育10～30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品额色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入1.5ml导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少，可能看不到DNA，则至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
7、2500×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以造当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：在管底可见自色的DNA沉淀，在极少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
9、加入1.5ml的70%乙醇，涡旋震荡5秒，2500×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢.可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在极少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干燥DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入300μl的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。一20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解，可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

三、从6～20ml全血中提取基因组(以10ml血液处理量为例)
1、取10ml全血于50ml离心管(自备)中，加入10ml Buffer FG1，上下颠倒混匀5次，2500×g离心5分钟。
2、再向离心管中加入15ml Buffer FG1，涡旋震荡，使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟，弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在极少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
注意：此混合液最好现用现配，井在配好后1小时之内用完。
4、加入5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液，立即涡旋混匀至溶液无团块。
注意：
1)如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡，不要等所有样品都加完后再震荡。
2)通常涡旋震荡3-4次，毎次5秒可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入1ml BufferFG2/蛋白酶K 混合液，再次涡旋混匀。
5、65℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
6、加入5ml导丙醇，上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要，应该至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
7、2500×g离心5分钟。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
8、弃上清，并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
注意：在管底可见白色的DNA沉淀，在极少情况下沉淀可能会松弛 ，所以要缓慢倒掉上清。
9、加入5ml的70%乙醇，涡旋震荡5秒，2500×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或増大离心力。
10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中 。
注意：在极少情况下沉淀可能会松驰 ，所以要缓慢倒掉上清。
11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验，但避免过度干燥DNA沉淀，因过度干燥会使DNA难于溶解。
12、加入1ml的Buffer GE，低速涡旋5秒，65℃孵育1小时溶解DNA，期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
注意：如果DNA没有完全溶解.可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA，建议延长孵育时间。

附表：不同体积血液所需各种缓冲液用量

缓冲液	血液样品的体积(μl)
	100	300	1000	3000	5000	10000	20000
Buffer FG1(μl)	250	750	2500	7500	12500	25000	50000
Buffer FG2(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
蛋白酶K(μl)	0.5	1.5	5	15	25	50	100
异丙醇(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
70%乙醇(μl)	50	150	500	1500	2500	5000	10000
Buffer GE(μl)	100	200	200	300	500	1000	1000
补加FG2和蛋白酶K 混合液	10	30	100	300	500	1000	1000

储存条件：室温(15～30℃)。

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