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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 细胞类型:
原代细胞/细胞系
- 品系:
详询
- 组织来源:
新鲜组织
- 物种来源:
Mammals
- 免疫类型:
血液科
- 细胞形态:
上皮成肌原粒淋巴成纤维等
- 器官来源:
正常组织源性
- 运输方式:
90%完全培养基+1201%DMSO,液氮储存
- 年限:
长久
- 生长状态:
悬浮贴壁
- 规格:
T25
(1)组织来源于正常新鲜组织。
(2)鉴定:Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
圻明生物原代细胞引种于:ATCC,武大细胞库,上海生化细胞所,中国科学院典型培养物保藏委员会等。 我们为全国广大客户提供优质的产品,完善的技术支持,过硬的质量保证。
操作指南及质量保证:
1. 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们免费重新发货。
2. 实验过程中若确定是客户问题,客户需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3. 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
鸡胚成纤维细胞细胞培养:细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5%CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;细胞于培养瓶或培养皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3㎜即可)。
鸡胚成纤维细胞细胞传代:1.细胞培养至密度80%以上时即可传代,先将细胞培养基取出3ml用15ml离心管装好,其他培养基全部吸干舍弃;2.培养皿加入2-3ml无菌PBS,轻轻晃动,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍弃;3.加入1ml胰酶,轻轻晃动,使胰酶浸没到皿底所有部分,将皿盖好放入培养箱中消化;4.3分钟后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞不再贴壁,即可加入第一步收集的培养基混匀,若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至不贴壁为止;5.将细胞悬液均匀分成几份,分别加入不同培养皿中,补加新培养基后放回培养箱培养。
如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25或者离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80°冰箱,若干冰完全升华,需立即复苏细胞。
T25瓶或者离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要不可忽略。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min),将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
Sci-P-1331 G-418硫酸盐(50mg/mL)
Sci-P-1332 青霉素-链霉素溶液(100×)
Sci-P-1333 抗菌-抗真菌剂(100×)
Sci-P-1334 庆大霉素(10mg/mL)
Sci-P-1335 潮霉素B(50mg/mL)
Sci-P-1336 两性霉素B溶液(250μg/mL)
Sci-P-1337 硫酸卡那霉素(100×)
Sci-P-1338 MEM非必需氨基酸溶液(100×)
Sci-P-1339 L-谷氨酰胺溶液(100×)
Sci-P-1340 丙酮酸钠溶液(100×)
Sci-P-1341 MEM氨基酸溶液(50×)
Sci-P-1342 MEM维生素溶液(100×)
Sci-P-1343 N-2添加剂(100×)
Sci-P-1344 G-5添加剂(100×)
Sci-P-1345 胰岛素-转铁蛋白-硒-G添加剂(100×)
Sci-P-1346 胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(100×)
Sci-P-1347 胰岛素-转铁蛋白-硒-X添加剂(100×)
Sci-P-1348 MEMα 完全培养基(含核苷、脱氧核苷)
Sci-P-1349 MEMα 完全培养基(不含核苷、脱氧核苷)
Sci-P-1350 Ham's F-12完全培养基
Sci-P-1351 HUVEC细胞专用培养基
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Sci-P-1354 RPMI-1640完全培养基
Sci-P-1355 DMEM高糖完全培养基
Sci-P-1356 DMEM低糖完全培养基
Sci-P-1357 DMEM/F12完全培养基(含HEPES)
Sci-P-1358 MEM完全培养基
Sci-P-1359 IMDM完全培养基
Sci-P-1360 McCoy's 5A完全培养基(不含HEPES)
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Sci-P-1364 人脂肪间充质干细胞无血清培养基
Sci-P-1365 人脐带间充质干细胞无血清培养基
Sci-P-1366 人骨髓间充质干细胞无血清培养基
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Sci-P-1372 “黑胶虫”清除培养基 (DMEM高糖)
Sci-P-1373 “黑胶虫”清除培养基 (MEM)
Sci-P-1374 “黑胶虫”清除培养基 (DMEM/F12)
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文献和实验犬瘟(亦称犬瘟热)的病原性病毒。主要侵犯狗科、鼬科动物。属于副粘液病毒。病毒粒子的直径为115— 160毫微米。邓金( G. W. Dunkin)和莱德劳( P. P. Laidlaw)首先分离成功。感染的狗(尤其是幼狗)在 4— 5天的潜伏期后发热,流泪,流鼻涕,呕吐,腹泻,便粘液,有时有抽风、痉挛等神经症状。气管、膀胱、胆道粘膜细胞内可证明有包含体。死亡率约 50%。在鸡胚成纤维细胞、狗肾细胞的培养细胞中生殖其减毒的病毒可用为活疫苗。
进行实验,则磷酸化 c-Src 丢失[4] 。就是说使用溶液法提取的蛋白谱是不完整的,蛋白有非等比例的丢失,内参也有可能存在丢失情况,那么如果做磷酸化蛋白定量,就会出现数据偏差。β整联蛋白是一种磷酸化蛋白,使用 Chaps 进行原代鸡胚成纤维细胞蛋白质提取,Chaps 不可溶组分使用 RIPA 裂解液再次提取,RIPA 不可溶组分再使用 sample buffer 提取,在五次采样(见下图)中,在 Chaps 不可溶组分和 RIPA 不可溶组分中都发现了大量的整联蛋白[5] 。caveolin
近十几年来,由于生物制品行业的飞速发展,传统的通过生物化学技术从动物组织获取生物制品的方法已经远远不能满足市场的需求,通过动物细胞在体外大规模培养来表达特定的蛋白、单克隆抗体、干扰素及病毒疫苗制品已成为目前最普遍的技术。 动物细胞体外大规模培养技术是在人工条件下,设定pH、温度、溶氧等,在细胞培养载体(容器)中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。常用的大规模培养的动物细胞有鸡胚成纤维细胞、原代地鼠肾细胞等多种元代细胞,及人二倍体细胞、CHO细胞、Vero细胞等。这些细胞
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