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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 细胞类型:
原代细胞/细胞系
- 品系:
详询
- 组织来源:
新鲜组织
- 相关疾病:
无
- 物种来源:
Mammals
- 免疫类型:
血液科
- 细胞形态:
上皮成肌原粒淋巴成纤维等
- 器官来源:
正常组织源性
- 运输方式:
90%完全培养基+394%DMSO,液氮储存
- 年限:
长久
- 生长状态:
悬浮贴壁
- 规格:
T25
(1)组织来源于正常新鲜组织。
(2)鉴定:Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
圻明生物原代细胞引种于:ATCC,武大细胞库,上海生化细胞所,中国科学院典型培养物保藏委员会等。 我们为全国广大客户提供优质的产品,完善的技术支持,过硬的质量保证。
操作指南及质量保证:
1. 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们免费重新发货。
2. 实验过程中若确定是客户问题,客户需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3. 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
小鼠原代结肠平滑肌细胞细胞培养:细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5%CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;细胞于培养瓶或培养皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3㎜即可)。
小鼠原代结肠平滑肌细胞细胞传代:1.细胞培养至密度80%以上时即可传代,先将细胞培养基取出3ml用15ml离心管装好,其他培养基全部吸干舍弃;2.培养皿加入2-3ml无菌PBS,轻轻晃动,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍弃;3.加入1ml胰酶,轻轻晃动,使胰酶浸没到皿底所有部分,将皿盖好放入培养箱中消化;4.3分钟后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞不再贴壁,即可加入第一步收集的培养基混匀,若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至不贴壁为止;5.将细胞悬液均匀分成几份,分别加入不同培养皿中,补加新培养基后放回培养箱培养。
如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25或者离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80°冰箱,若干冰完全升华,需立即复苏细胞。
T25瓶或者离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要不可忽略。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min),将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
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文献和实验实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
.897 研究领域:骨关节炎 主要应用:构建sh-JMJD3腺病毒和sh-NC腺病毒,以MOI为300感染小鼠原代软骨细胞。研究发现抑制JMJD3的表达可抵抗异常流体剪切力导致的软骨细胞损伤,减轻骨关节损伤,为关节疾病得到治疗提供了潜在治疗靶点。 Figure 3 腺病毒感染软骨细胞后下调JMJD3基因可抑制SNP诱导的细胞凋亡和FSS诱导的软骨细胞损伤。 Figure 4 在与异常力相关的软骨损伤中,JMJD3使NR4A1基因启动子区的H3K27me3去甲基化。 案例二 客户
的速度,缓慢向远端移动。 结肠结构与功能直接影响结肠运动,因而与便秘的关系十分密切。影响结肠平滑肌结构的疾病可引起便秘,并可能与某些巨结肠的形成有关。这类疾病常导致平滑肌细胞数量的减少,而代之以纤维化,使结肠壁变薄,动力下降。影响结肠功能的因素尤多,包括结肠的蠕动方式、结肠内压力的改变、神经系统、激素、调节肽等。 近年来,肠壁神经丛的重要性受到人们的重视,被称为“肠脑”。除大家熟知的先天性巨结肠外,一些作者陆续报道了特发性巨结肠、巨直肠,甚至一些没有巨结肠外观的便秘
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