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- 2025年07月16日
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深圳子科生物科技有限公司
技术指标：每毫升rProtein A/G结合35~50mg人血清IgG，38-51mg兔IgG /ml填料，5.5-18.5mg鼠血清IgG/ml填料，4.5-17.8mg鼠腹水IgG/ml填料
一、 产品简介
通过基因重组技术，将蛋白A与蛋白G基因重组于同一质粒载体中，并在大肠杆菌中进行表达，得到分子量为50.5KDa的可溶性蛋白A/G。该可溶性蛋白A/G具有四个IgG结合位点，来自于蛋白A；和两个IgG的结合位点，来自于蛋白G。因具有上述特性，使得基因工程重组蛋白A/G具有广泛的IgG的结合能力，对各种哺乳类动物的IgG都能结合，使得该产品在IgG的诊断和纯化中具有十分广泛的用途。
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术，将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化，使得单位体积中结合更多蛋白A/G，产品最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白A或蛋白G、蛋白A/G偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化，或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。
二、重组蛋白A/G预装柱/填料
| 目录号 | 规格(ml) | 备注说明 |
| PAG000001 | 1 | 手动 |
| PAG000005 | 5 | 手动 |
| PAG100001 | 1 | 自动 |
| PAG100005 | 5 | 自动 |
| 目录号 | 规格(ml) |
| PAG001005 | 5 |
| PAG001025 | 25 |
| PAG001100 | 100 |
三、 重组蛋白A/G预装柱/填料产品技术指标
rec-Protein A/G per Sepharose 4FF 比值：4.0-4.5mg rec-Protein A/G per ml Sepharose 4FF
rec-Protein AG分子量：50.5 KDa
每分子rec-Protein G可结合IgG位点数：6个（4个来自于蛋白A，2个来自于蛋白G）
rec-Protein A可结合白蛋白位点数：无
线性流速：300-500 cm/h
耐压指数：≤0.3 MPa（填料）
l 、注意事项
请在实验前仔细阅读本rProtein A预装柱使用说明。同时，将所要的所有试剂、耗材拿出置于室温，恢复至室温使用。
2、 产品保存
产品储存于2-8℃，保质期两年。
3、 rProtein A/G-Sepharose 4FF纯化IgG抗体步骤
以下方法适用于从血清或腹水中纯化IgG抗体，不同来源的IgG与rProteinA/ G的结合能力不同，具体情况请参考表1。
1. 将血清或腹水样品（推荐上样量2 mL样品/mL柱）装入截留分子量3.5 KDa透析带中，于4 ℃冰箱中对1× PBS（pH 7.4）透析过夜；
2. 将rProtein A/G-Sepharose 4FF装柱固定好，用10倍柱体积1× PBS（pH 7.4）平衡层析柱，建议流速为1 mL/min；
3. 将透析好的样品从层析柱上端加入，建议流速为1 mL/min，为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样，重复2遍（或者是将样品1次性加入层析柱后置于摇床上，轻轻摇动，结合30 min）；
4. 样品结合后，用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱，建议流速为1 mL/min，勿让层析柱滴干；
5. 洗脱IgG，向层析柱上端加入洗脱液（100 mM甘氨酸，pH 2.7），用预先加有100 μL中和缓冲液（1M Tris，pH 9.0）的4 mL Ep管接收，2 mL /管，共收集10倍柱体积，进行10 % SDS-PAGE电泳，确定IgG样品所在管，回收样品。
6. 加入5倍柱体积再生缓冲液（100 mM甘氨酸，pH 2.0），再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。 向层析柱加入10倍柱体积, 20% Ethanol，于4~8 ℃冰箱。
重组蛋白A/G预装柱/填料其他产品:500ml过滤上杯 Filter Upper Cups 0.10µm 500ml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包，24只/箱
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0.22µm 500ml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包，24只/箱
0.22µm 500ml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包，24只/箱
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0.45µm 500ml,PES 聚醚砜膜,滤膜直径75mm,已消毒 1只/包，24只/箱
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0.45µm 500ml,SFCA,无表面活性剂醋酸纤维膜，滤膜直径75mm,已消毒 1只/包，24只/箱
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1L 过滤器上杯 1LFilter Upper Cups 0.10µm 1000mlml,PVDF聚偏氟乙烯膜,滤膜直径91mm,已消毒 1只/包，24只/箱
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接收瓶 Reservoir Bottles 150ml 聚苯乙烯材料，耐烯酸，已消毒 1只/包，24只/箱
250ml 聚苯乙烯材料，耐烯酸，已消毒 1只/包，24只/箱
500ml 聚苯乙烯材料，耐烯酸，已消毒 1只/包，24只/箱
1000ml 聚苯乙烯材料，耐烯酸，已消毒 1只/包，24只/箱
酶标板 ELISA Plates 96孔 高结合力不可拆,300～400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 高结合力可拆,配8孔条,300～400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 高结合力可拆,配12孔条,300～400ng/cm2 10块/盒,200块/箱
48孔 高结合力可拆,配12孔条,300～400ng/cm2 10块/袋,400块/箱
96孔 中结合力不可拆,200～300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 中结合力可拆,配8孔条,200～300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
96孔 中结合力可拆,配12孔条,200～300ng/cm2 10块/盒,200块/箱
48孔 中结合力可拆,配12孔条,200～300ng/cm2 10块/袋,400块/箱
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文献和实验或超声清洗（HiPrep 与 Precision Columns 3.2/300 柱型不能拆卸换膜）；必要时移除层析柱顶端 2～3 mm 凝胶，调节 Adaptor 消除顶端死体积。部分预装柱，也可以将填料倒出，去除板结或碎填料后，重新装填。测定柱效或重复之前做过的样品。后续注意样品前处理（如核酸的去除、样品缓冲液条件）以及层析柱的日常维护。 图 1：凝胶过滤分离原理 绝招二：凝胶过滤层析的三大应用种类 根据应用目的的不同
制备过程中的去垢剂、酶抑制剂或不适合的酶切条件等。 案例分享 以下例子使用 2 个串联的 GSTrap FF 5ml 预装柱纯化 TLP40 蛋白。 添加的 PreScission Protease 酶量为 2U/100 µg GST 标签蛋白。 根据 GSTrap FF 预装柱大小，用一定体积的 PreScission buffer对PreScission Protease 进行稀释 (如对于 5 ml 预装柱，可用 4.5 ml
用于大分子蛋白、超螺旋DNA、病毒纯化等生物大分的分离纯化。包括已经这些样品的除盐等。分离范围1x104-4x106 ￥700 CS-G02-02 类似Sepharose 6 BF.F. 500ml ￥2200 CS-G02-03 1 L ￥3800 CS-G02-04 5 L ￥18000 离子交换色谱填料 货号 产品名称 规格 特性及应用 价格 CS-I01-00 DEAE琼脂糖凝胶 FF 1ml预装柱 110
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