霍乱弧菌霍乱毒素基因/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)双重

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北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括霍乱弧菌霍乱毒素基因/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)双重荧光PCR检测试剂盒(ctxA)供应在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：霍乱弧菌霍乱毒素基因/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)双重荧光PCR检测试剂盒(ctxA)供应
编号：SYA109
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒

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BL0810 HRP标记羊抗人白蛋白抗体
PY02-159  麦芽浸膏汤  250克  
BL1102 40%丙*(代"烯")酰胺(19:1)
ARB12206 大鼠丝*酸/苏*酸蛋白*(代"磷")酸酶(STK)酶标法分析 reat serine/threonine protein kinase,stk ELISA KIT
6-羟基-2,5,7,8-四甲基*并二*吡喃-2-羧酸 Guanine HC1 53188-07-1
吲唑 Deoxy-Big CHAP 271-44-3
Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒   100T
ARB12526 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)定量分析 Rat inhibitory subunit of nf-κbα,ikbα ELISA KIT
606-68-8 NADH Na2 还原型辅酶Ⅰ二*
全血丙*(代"酮")酸检测试剂盒(乳酸脱*酶比色法)   50T
M0108 胶体金标记物保存稀释液                                         
ARB12075 大鼠内皮型NO合酶(eNOS)Elisa方法检测 Rat endothelial nitric oxide synthase enos  ELISA KIT
PY04-070  *啶酮酸  2mg/支×10支  每支添加于100mlFraser增菌液中制成FraserⅡ培养基，用于李斯特氏菌选择性增菌培养
BTN100502 高效E.coli感受态细胞制备试剂盒 High Efficiency E.coli Competent Cell Preparation Kit
BTN130876 PreScissiom 蛋白酶 PreScissiom Protease
BTN100908 一站式长效期SDS-PAGE电泳套装 One-Stop Stable SDS-PAGE Pack
ARB12654 大鼠催乳素(PRL)免费代测 Rat prolactin,prl ELISA KIT
标准鲁哥氏染色液(Lugol"s碘液,1%)   100ml
ARB11499 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)含量分析 Human adipose differentiation-related protein,adrp ELISA KIT
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·A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA054
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA574
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及组织、血液样本中布鲁氏菌(BS)的特异性检测，用于布鲁氏菌(BS)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对布鲁氏菌特异性引物，对布鲁氏菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
布鲁氏菌PCR反应液(BS-PCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(BS-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可按常规方法提取，也可采用商品化DNA试剂盒提取
➤培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出PCR反应液(BS-PCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
PCR反应液	15µL	N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μLPCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

预变性	1循环	94℃ for 2 min
PCR扩增	35循环	94℃ for 30 sec 58℃ for 30 sec 72℃ for 30 sec

四、结果分析：
➤称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中，加入100mL 1×TAE电泳缓冲液，微波炉加热溶解，稍冷后加入10μL染色液混匀，倒入插有梳子的制胶板中。
➤待胶凝固后，取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中，取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中，电压值设定为电泳槽正负极距离(cm)与5(V/cm)的乘积。待*酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。

试验成立判定：
➤阴性对照(NTC)：无任何的条带(引物带除外)。
➤阳性对照(BS-PTC)：在260bp处有条带。
➤被检样品：在260bp处有条带为阳性样品，否则为阴性样品。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。


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HC0075 吸头
NF-259 冻干抗人B因子血清
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N"-4-丁磺酸 Brij-35 161308-36-7
ARB12456 大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA检测服务 Rat thyroid-stimulating hormone,u-tsh ELISA KIT
BL1197 结晶紫染色液(2.5%)
ARB12721 大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)检测服务 Rat myelin basic protein,mbp ELISA KIT
PY02-027  G-N增菌培养基  250克  
BTN130433 磁珠动物DNAOUT MAG Animal DNAOUT
369-07-3 邻硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷 ONPG
无机磷检测试剂盒(米吐尔钼蓝微板法)   100T
54010-71-8 葡萄糖-6-磷酸一* D-Glucose6-phosphate Sodium sslt
ARB10254 人乙*(代"醛")脱*酶(ALDH)Elisa方法检测 Human aldehyde dehydrogenase,aldh ELISA KIT
BTN130696 G(5′)ppp(5′)A帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs
脱氧核糖核酸(鱼精) Z-Ser-OH
3-磷酸甘油酸激酶 Silver iodide 9001-83-6
十二烷基吡喃葡萄糖苷 L-Arginine 59122-55-3
葡聚糖凝胶G-150 VB4
ARB14045 猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA检测服务 Monkey β2-microglobulin,bmg/β2-mg ELISA KIT
花生四烯酸 Folin & Ciocalteu’s phenol reagent 506-32-1

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