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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格
规格:48次/盒
编号:SYA123
产地:国产|进口
等级:科研试剂
一、简介:
本试剂盒用一对恶性疟原虫特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR 探针技术进行恶性疟原虫的检测。
二、用途:
本试剂盒可用于恶性疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置,还可用于恶性疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 恶性疟原虫荧光PCR反应液(qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(DNA Polymerase MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 恶性疟原虫阳性对照(PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列,Bio-Rad 系列,Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃保存,避免反复冻融,有效期为6个月。
六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液:用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml,置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中,摇匀送检。
肺脏等组织:取上述组织1g左右,置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本:取相应标本3-5ml,转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本:直接取200μl 抗凝血,转至一洁净的1.5ml 离心管中,加入1ml 双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm 离心5min,弃上清,至无明显红色沉淀。(若沉淀明显,请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水,剧烈震荡15s,13000rpm 离心5min,弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
肺、淋巴结等固体组织:剪取约0.1g 组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入0.5mL TE 转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl 转移到1.5mL 离心管中,加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
乳液等液体标本:取标本2-3mL,13000rpm 离心3min,弃上清,沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl进行PCR 反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(恶性疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
阳性对照(PTC):均产生扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明恶性疟原虫核酸阳性。
Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明恶性疟原虫核酸阴性。
如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行恶性疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明恶性疟原虫核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
我公司的恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·肠出血型大肠杆菌EHEC O157/H7双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA104
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·蜱传出脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA240
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·乙型流感病毒(IFVB-YA)分型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA195
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒H7亚型(AIV-H7)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA332
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·转基因植物35S启动子单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA265
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛结核杆菌抗体ELISA检测试剂盒(筛选)
编号:SYA653
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·贝氏柯克斯体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA133
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适合于检测全血等样本中的贝氏柯克斯体通用,用于贝氏柯克斯体通用感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对贝氏柯克斯体通用特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对贝氏柯克斯体通用的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组分 | 数量 | 规格 |
| 贝氏柯克斯体反应液(qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 贝氏柯克斯体阳性对照(PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管,取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
二、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1 µL | N×1µL |
| 总量 | 15 µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 minPCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照:均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明贝氏柯克斯体核酸阴性。
➤如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行贝氏柯克斯体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格关键词:百奥莱博,恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒,SYA123
蛋黄卵磷脂 β-Propiolactone
淀粉样物质染色液(Highman刚果红法) 3×50ml
83905-01-5 阿奇霉素 Azithromycin
β-丙*酸乙酯盐*(代"酸")盐 Fast Black K Salt 4244-84-2
BL0630 明胶-琼脂糖凝胶4FF Gelatin Sepharose 4FF
高纯质粒大提试剂盒
CYB161050 马IgG(冻干粉)
间羟基*乙*(代"酸") LY-237216 621-37-4
J0312 兔抗豚鼠IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
B0101 胎牛血清(辐照灭菌)
BTN100938 单细胞全基因组扩增试剂盒 Single Cell WGA Kit
肉桂醇 3,5-Dibromo-L-Tyrosine 104-54-1
ARB10224 人β*酚(β-Nph)定量分析 Human beta-naphthol,β-nph ELISA KIT
恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格关键词:百奥莱博,恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒,SYA123
·牛口蹄疫A型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA658
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·牛口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA660
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·乙型流感病毒(IFVB-YA)分型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA195
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒H7亚型(AIV-H7)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA332
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA092
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛病毒性腹泻(BVDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA490
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·禽流感病毒N1亚型(AIV-N1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA328
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·诺如病毒(NV)通用单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA200
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒针对诺如病毒通用型高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含诺如病毒通用型基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用仪器对PCR过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。
二、用途:
诺如病毒(Norwalk Viruses,NV)是人类杯状病毒科(Human Calicivirus,HuCV)中诺如病毒(Norovirus,NV)属的原型代表株。有5个基因群(Gene group G)GI、GII、GIII、GIV、GV。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,感染对象主要是成人和学龄儿童,寒冷季节呈现高发。
三、试剂盒组成:(50T/Kit)
组份 数量 规格
RT-PCR反应液(NV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(NV-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,伯乐系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
1. 采集时间:粪便样本应在发病首日采集,至多不能超过发病急性期(48~72h),此时为稀、软便,病毒排出量最多。
2. 采集方法
(1)一次流行,至少采集10例患者粪便,每份样本量约1~5mL,成形便和肛拭子诊断意义很小;
(2)病人呕吐物是粪便样本的最佳补充,有助于病原的诊断。采集、储存和运送条件同于粪便;
(3)从流行病学角度出发,在水、食物或其它外环境样本中检出NV意义重要;
(4)需注意检测技术要锁定在高度怀疑的传播媒介上,尽早采样并置4℃存放,若是饮用水,需用大容量(5~100L)浓集病毒后检测;
3.应避免样本间交叉污染。
4.样本收集后可立即检测;若不能立即检测,可置于-20℃以下过夜保存;如需长期保存,样本应冻存于-70℃以下,避免反复冻融。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(NV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(NV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(NV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明NV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明NV核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行NV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明NV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司是细菌PCR检测试剂盒产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购恶性疟原虫荧光PCR检测试剂盒价格。
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