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738
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒现货价格在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒现货价格,产品信息:
类别:病毒PCR检测试剂盒
| 产品名 | 产品编号 | 等级含量 | 包装规格 |
| 人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒 | SYA188 | 科研试剂 | 48次/盒 |
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SYA188
等级:科研试剂
一、简介:
本试剂盒用一对人副流感病毒2 型特异性引物,一对人副流感病毒4 型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对人副流感病毒2 型/4 型RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中人副流感病毒2 型的探针报告基团为FAM,人副流感病毒4 型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。
二、用途:
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中人副流感病毒2型/4型的特异性检测。适用于人副流感病毒2型/4型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
人副流感2型/4型反应液(PIV2/PIV4-qRT-PCR MIX) 1管 576μL/管
qRT 酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 192μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
人副流感2 型/4 型阳性对照(PIV2/PIV4-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(PIV2/PIV4-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 12µL N×12µL
酶混合物 4µL N×4µL
总量 16µL N×16µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PIV2/PIV4-PTC)4μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 50℃ for 30 min
预变性 1循环 95℃ for 5 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 10 sec
55℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测PIV2,VIC/HEX/JOE基团检测PIV4。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
(2) 阳性对照(PIV2/PIV4-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
8.3 结果判定
(1) FAM通道:Ct值≤35 PIV2核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV2核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV2核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2) VIC/HEX/JOE通道:Ct值≤35 PIV4核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV4核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV4核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒现货价格专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:百奥莱博,人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒,SYA188
使用移液器有哪些注意事项?
垂直吸液、慢吸慢放;选择合适的量程范围,不能超过量程使用;选择与移液器匹配的枪头,安装枪头时不要用力太猛;移液器每日用完后,应旋到最大刻度。
关于人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒现货价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| SYA155 | 病毒PCR检测试剂盒 | 禽流感H5病毒单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA635 | 动物疫病ELISA检测试剂盒 | 猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒 |
| SYA118 | 细菌PCR检测试剂盒 | 猪种布鲁氏菌单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA324 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA077 | 细菌PCR检测试剂盒 | 嗜水气单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA093 | 细菌PCR检测试剂盒 | 肠致病性大肠杆菌(EPEC)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA360 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 禽马立克氏病病毒(MDV)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA164 | 病毒PCR检测试剂盒 | 丙型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA415 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 猪圆环病毒2型(PCV-2)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA203 | 病毒PCR检测试剂盒 | 札如病毒单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA079 | 细菌PCR检测试剂盒 | 沙门菌及痢疾杆菌单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA129 | 细菌PCR检测试剂盒 | 莫氏立克次体单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA191 | 病毒PCR检测试剂盒 | 偏肺病毒/腺病毒双重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA272 | 转基因PCR检测试剂盒 | 水稻转基因Bt63 单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA204 | 病毒PCR检测试剂盒 | 星状病毒单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA220 | 病毒PCR检测试剂盒 | 轮状病毒A/B分型双重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA304 | 物种PCR检测试剂盒 | 猪源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量) |
| SYA437 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 猪钩端螺旋体病(LPP)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA133 | 细菌PCR检测试剂盒 | 贝氏柯克斯体单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA195 | 病毒PCR检测试剂盒 | 乙型流感病毒(IFVB-YA)分型单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA016 | 细菌PCR检测试剂盒 | 肉毒杆菌8种通用型单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA308 | 物种PCR检测试剂盒 | 猫源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量) |
| SYA285 | 转基因PCR检测试剂盒 | 马铃薯转基因Cry3c单重凝胶PCR检测试剂盒 |
| SYA507 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 牛支原体(mycoplasma)单重荧光PCR检测试剂盒 |
| SYA633 | 动物疫病ELISA检测试剂盒 | 猪口蹄疫病毒O型抗体ELISA检测试剂盒 |
| SYA465 | 动物疫病PCR检测试剂盒 | 轮状病毒(ROV)单重荧光PCR检测试剂盒 |
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