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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的SYA165型甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒优惠价,是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:SYA165型甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒优惠价
编号:SYA165
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
等级:科研试剂
一、简介:
本试剂盒用一对甲型(A型)流感病毒特异性引物,一对乙型(B型)流感病毒特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对甲型流感病毒RNA、乙型流感病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中甲型流感病毒的探针报告基团为FAM,乙型流感病毒的探针报告基团为HEX/VIC/JOE。
二、用途:
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中A型流感病毒和B型流感病毒的特异性检测。适用于A、B型流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
甲型乙型流感反应液(AB-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
qRT 酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
甲型乙型流感阳性对照(AB-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(AB-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AB-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和HEX(若仪器无HEX通道,可选择VIC或JOE通道)。其中FAM基团检测A,HEX/VIC/JOE基团检测B。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):FAM和HEX/VIC/JOE通道全部阴性。
(2) 阳性对照(AB-PTC):FAM和HEX/VIC/JOE通道的Ct值<30。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
8.3 结果判定
(1) FAM通道:Ct值≤35 IAV-A核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明IAV-A核酸阴性。
Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明IAV-A核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2) HEX/VIC/JOE通道:Ct值≤35 IAV-B核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明IAV-B核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明IAV-B核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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SYA165型甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒优惠价关键词:SYA165,百奥莱博,甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
·高致病猪蓝耳和猪蓝耳(hp-PRRSV/PRRSV)通用型(二合一)荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA468
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA159
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA572
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规格:48次/盒
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编号:SYA135
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA096
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感H9病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA158
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA275
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA176
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·H1/H3型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA167
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA082
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·金黄色葡萄球菌杀白细胞素(PVL)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA039
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·类鼻疽伯克霍尔德菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA771
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对类鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对类鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
该试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的类鼻疽伯克霍尔德菌(BM),用于类鼻疽伯克霍尔德菌(BM)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
BM反应液(BM-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
BM阳性对照(BM-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、样品前处理与DNA提取
6.1 样本前处理:
取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BM-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BM-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(BM-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行类鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
SYA165型甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒优惠价关键词:SYA165,百奥莱博,甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
·结核分枝杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA046
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA515
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA466
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA016
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感H9N1病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA159
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·羊源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA301
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副溶血性弧菌TDH/TLH双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA101
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA152
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感H9病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA158
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·汉坦病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA244
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠出血性大肠杆菌致贺毒素1(Stx1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA084
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA069
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for 8 kinds of botox
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对副溶血性弧菌耐热直接溶血素特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对副溶血性弧菌耐热直接溶血素的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH),用于副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| TDH反应液(TDH-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| TDH 阳性对照(TDH -PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列,博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6 个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
水样便取0.5-1 mL;疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理:
水样便13000rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TDH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL 荧光PCR 反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TDH-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(TDH-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行副溶血性弧菌耐热直接溶血素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明副溶血性弧菌耐热直接溶血素核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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