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568
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的北京A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒现货价格,是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:北京A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒现货价格
编号:SYA054
品牌:百奥莱博
规格:48次/盒
等级:科研试剂
北京A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒现货价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
ARB13384 牛维生素B12(VB12)elisa测定使用说明书
PY02-359 沙氏葡萄糖琼脂培养基 250克
ARB12383 大鼠肺表面活性物质相关蛋白c(SP-c)血清中含量检测 Rat associated protein c,sp-c ELISA KIT
ARB12125 大鼠丙*酸*基转移酶(ALT)ELISA代测服务 Rat alanine aminotransferase,alt ELISA KIT
1305-62-0 Bromocresol Purple *甲*(代"酚")紫
邻硝基*(代"*")-β-D-吡喃葡萄糖苷 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 2816-24-2
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联*(代"*")甲酰 AMPS 134-81-6
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9007-43-6 细胞色素C(马心) Cytochromes C
北京A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒现货价格关键词:A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA054
·嗜水气单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA077
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA099
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA087
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的肠出血性大肠杆菌溶血素基因,用于肠出血性大肠杆菌溶血素基因的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| Hly反应液(Hly-qPCR MIX) | 1管 | 960μL/管 |
| 核酸提取液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(EnzymHly MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 250μL/管 |
| Hly阳性对照(Hly-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集及处理:
1.水样便取0.5-1mL;疑似污染的食物取1g。
2.水样便13000rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
二、DNA提取:
对上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50uL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Hly-qPCR MIX)、酶混合液(EnzymHlyMIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 20µL | N×20µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 21µL | N×21µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Hly-PTC)4μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 预变性 | 1循环 | 94℃ for 2 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 94℃ for 15 sec 55℃ for 30 sec |
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Hly-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,且有明显的指数增长曲线,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阴性。
➤如果35<Ct值,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒现货价格关键词:A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA054
·肉毒杆菌E型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA021
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副猪嗜血杆菌(HPS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA486
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对副猪嗜血杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对副猪嗜血杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织、关节液等样本中的副猪嗜血杆菌(HPS),用于副猪嗜血杆菌(HPS)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| HPS反应液(HPS-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| HPS阳性对照(HPS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
病死或扑杀猪,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;生猪灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中;若有关节囊肿,在囊肿表面常规碘酊消毒,用2mL或5mL灭菌注射器穿刺,无菌吸取1-2mL关节渗出液。
6.2 样品前处理
组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;关节渗出液:直接取100μL进行提取。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(HPS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(HPS-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(HPS-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明副猪嗜血杆菌核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明副猪嗜血杆菌核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行副猪嗜血杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明副猪嗜血杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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