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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
849
- 英文名:
DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML厂家价格在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML厂家价格
产地:国产|进口
规格:5ml
编号:SY0420
品牌:百奥莱博
本品DEAE弱阴离子纯化预装柱是一种以DEAE弱阴离子交换树脂为填料的中压预装柱,规格为5ml,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化,离子交换基团-O-CH2CH2-N (C2H5)2。
基质(Matrix):高度交联的6%琼脂糖微球
粒径(Bead size):45-165µm
离子交换类型(Type):弱阴离子
载量(Capacity):~0.11-0.16mmol Cl-/ml 基质
流速(Flow Rate):300-600cm/h
pH范围:2-12
储存缓冲液:20%乙醇
柱子尺寸(Column Size):1.65×2.7cm(5ml)
储存条件:4℃,有效期2年。
关于DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML厂家价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·EDTA抗原修复液(50×)
编号:SY0764
英文名称:Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
规格:100ml
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多聚甲醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多*基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到最佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液,pH8.0,是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一,适用于大多数的抗原,经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算,约可做500个样品。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位,导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复,也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下,可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3)修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来完全浸没组织切片。
4)不同pH的修复液对修复效果的影响很明显,归于传统习惯使用柠檬酸*修复液,pH6.0(SY0763)比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原(抗体),使用高pH值(约8.0或9.0)的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件:-20℃,有效期一年。
DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML厂家价格关键词:SY0420,DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML,DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML
·慢病毒报告基因阳性对照
编号:SY0152
英文名称:Lentivirus Luciferase Reporter positive control
规格:50μl×4管;2×10e7TU/ml
pGMLV-CMV-Lu慢病毒质粒是以CMV作为启动子,启动Luciferase在细胞内的表达,可作为萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阳性对照使用,通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,使质粒对转录因子的非特异结合降到了最低。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞,比如原代细胞,干细胞,神经元细胞等。同时,慢病毒可以将携带的外源基因插入细胞的基因组中,进行长时间的表达。
质粒图谱

注意事项
1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。
2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。
3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次*酸*溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次*酸*溶液浸泡1h以上后弃去。
4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。
5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
储存条件:-80℃。
·第一条链 cDNA合成试剂盒
编号:SY0290
英文名称:First Strand cDNA Synthesis Kit
规格:50T
本试剂盒是基于Reverse Transcriptase,该酶热稳定性提高,在50℃的半衰期超过240min,且可长时间耐受高达55℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录,能稳定可靠地合成cDNA。且Reverse Transcriptase的独特设计,进一步增强了模板亲和力和行进性,使得全长cDNA的合成能力有了大幅度提升,可获得长达20 kb的cDNA,并且对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度,非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。
本试剂盒包含由总RNA或mRNA合成高质量第一条链cDNA所需的所有成分,并提供两种cDNA合成引物:Random hexamers和oligo(dT)18。合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR、qPCR以及PCR克隆。其中,5×RT Mix包含优化的缓冲体系和dNTP; Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。可根据需要,选择Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。
试剂盒组分:
| 组份 | 规格 |
| RNase free ddH2O | 1 ml |
| 5×RT Mix | 200 μl |
| Enzyme Mix* | 50 μl |
| Oligo dT18 (0.5 μg/μl) | 50 μl |
| Random hexamers (N6) | 50 μl |
| *包含RNase inhibitor,用于抵抗环境和体系中可能存在的痕量的RNase。 | |
储存条件:-20℃,有效期一年。
质量控制
所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。
功能检测1:以500 ng mouse total RNA为模板,Oligo dT18为引物,50℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增ne*(代"b")ulin基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的20.0 kb条带。
功能检测2:以100 pg Hela cell total RNA为模板,Oligo dT18为引物,50℃反应30分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的550 bp条带。
功能检测3:以500 ng Hela cell total RNA为模板,Oligo dT18为引物,55℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测4:以1 pg-1 µg HeLa cell total RNA为模板,以Oligo dT18和Random hexamers为引物,测试qRT-PCR性能。
以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线,R2>0.990,斜率在-3.20到-3.60之间。
客户需要准备的材料
1.RNase free的1.5 ml微量离心管或0.2ml PCR管
2.水浴锅或PCR仪
3.冰
4.RNA(高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的。
引物选择
1) 如果模板为真核生物来源,建议选择Oligo dT18,其与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。
2)基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下,用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时,可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
3)Random hexamers特异性最低,所有RNA,包括mRNA、rRNA、tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高,或者模板为原核生物来源,使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时,可使用Random hexamers为引物。
应用实例
1 第一条链cDNA合成*(以20μl反应体系为例)
1)按照下表在RNase free离心管中配制如下混合液:
| RNase free ddH2O | to 20 μl |
| Oligo(dT)18(0.5 μg /μl) | 1 μl |
| or Random Primer | or 1 μl |
| or Gene Speicific Primers | or 2 pmol |
| 5×RT Reaction Mix | 4 μl |
| Enzyme Mix** | 0.8-1μl |
| 模板RNA | Total RNA: 50 ng-5 μg/mRNA: 5-500 ng |
*可选步骤(一般不需要):如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却 5min,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
** Enzyme Mix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请瞬时离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。可每次按照0.8μl使用,不会影响使用效果。
2)用移液枪轻轻吹打混匀。
3)如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP),42℃孵育30-50min。
如用Random Primer,25℃孵育10 min,42℃孵育30-50 min。
4)65℃加热15 min(或者85℃加热5 min)失活Reverse Transcriptase。
2 RT-PCR
建议取1/10-1/5 体积(2-4 μl)的反转录产物作为PCR模板。
1)建议反应条件
| Components | Volume | Final Concentration |
| cDNA Template | 2 μl | as required |
| Forward Primer (10 μM) | 1 μl | 0.2 μM each |
| Reverse Primer (10 μM) | 1 μl | 0.2 μM each |
| 10×Taq Buffer (含Mg2+) | 5 μl | 1× |
| 2.5 mM dNTPs | 4 μl | 0.2 mM |
| Taq DNA Polymerase | 0.5 μl | 2.5 units |
| ddH2O to final volume | 50 μl | Not applicable |
注意事项
1)所有操作均应在冰上进行。
2)除使用RNase free的枪头和离心管外,RNA实验用的试剂建议专用,并在单独的洁净的区域操作。操作时,戴上口罩和一次性手套,避免说话。总RNA提取完成后,建议取少量跑1%琼脂糖凝胶电泳,检验RNA的完整性。
3)逆转录反应抑制物包括酚,盐,SDS,EDTA等。建议用75%乙醇 (用DEPC水配制)仔细洗涤RNA沉淀 (轻弹管底让沉淀悬浮,并静置数分钟)。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML厂家价格关键词:SY0420,DEAE弱阴离子纯化预装柱,5ML,DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML
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文献和实验组分,也是一个关键的毒性因子,且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位的流程。 图 2. 大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位流程图 首先使用合适的去垢剂 C8E4,把 OmpA 膜蛋白溶解出来; 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 mL进行初步纯化,收集目标蛋白洗脱液; 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯,使用高分辨率层析柱 Superdex 200
和 Capto DEAE 都是 Capto 骨架的填料。DEAE 是弱阴离子交换配基,而 adhere 是多模式配基,兼具强阴离子交换和疏水配基,为纯化工艺提供更多的选择性。而流穿模式可以使多糖流穿而带负电的杂质结合在柱子上,从而达到快速除杂的目的。 Cytiva针对9种不同纯化应用,推出相应的层析组合产品,订购推荐的两步纯化或三步纯化套餐,即可获得精选填料或预装柱一份(52 种,任您选择),加速您的蛋白质研究! 详情请查看:https://h.dxy.cn/Cytivasales/kz/dbzyj
率大于58%,这一工艺的开发造福社会同时为用户带来安全高效的纯化方案。 将粗糖通过Capto adhere 和Capto DEAE 两种层析介质串联,流穿模式进行分离纯化的。Capto 骨架的介质具有很好的刚性和载量,对于多糖这样大分子的物质仍然有很好的通量。Adhere 是复合模式的配基,同时具有弱阴离子交换与疏水作用, DEAE则是弱阴离子交换层析填料。 下面是流脑多糖的纯化路线图: 通过层析图206nm 和A280nm 吸收可以看出通过层析纯化可以将多糖与蛋白分开,达到多糖与蛋白核酸的分离
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